杏鮑菇生物學特性及栽培配方初篩

陸珠　于延申　于春艷

摘要：以杏鮑菇菌株作為試驗材料，對其進行生物學特性及原種配方、栽培種栽培配方研究。結果表明，菌絲的最適生長條件如下：pH值為8.0，最適生長溫度為25 ℃，最適碳源為可溶性淀粉，最適氮源為酵母浸粉，最適微量元素為 KH2PO4。各因素對菌絲的影響程度排序為溫度>碳源>pH值>氮源，各因素影響間差異極顯著，最佳原種配方為2號配方，即85%玉米、5%麥麩、5%鋸末、2%豆粕、1%玉米粉、0.5%石灰、1.5%石膏、60%含水量。最佳栽培種配方為5號配方，即65%鋸末、20%麥麩、10%稻殼、3%豆粕、1%石灰、1%石膏、60%含水量。

關鍵詞：杏鮑菇;生物學特性;栽培;碳源;氮源;原種配方

中圖分類號：S646.1+40.1;S646.1+40.4 文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2021）19-0168-04

杏鮑菇（Pleurotus eryngii）別稱刺芹側耳[1-2]，因其菌肉肥厚且具有杏仁香味和鮑魚味，又稱為杏仁鮑魚菇[3]，有“草原上美味牛肝菌”的美稱[4]，可以降血壓、降血脂、提高免疫力[5-6]，是集食用、藥用、保健于一體的珍稀食用菌品種[7]。杏鮑菇是20世紀90年代末發展起來的珍稀食用菌[8]，是目前最受歡迎的蘑菇品種之一，其最早起源于歐洲，為亞洲部分地區的人們廣泛食用[9-12]。近年來，杏鮑菇已經成為東亞地區種植最廣泛的蘑菇之一。本研究采用單因素和4因素3水平正交試驗對吉林省食用菌研究院保藏的杏鮑菇（菌株號：JLSHJY2018064）的生物學特性[13-16]進行研究，優化菌絲培養條件，進而篩選最佳生長條件。基于優化的菌絲生長條件，以菌絲生長速度和菌絲長勢為衡量標準，篩選原種培養基配方和栽培種培養基配方。

1材料與方法

1.1供試材料

本試驗于2020年11月至2021年1月末在吉林省蔬菜花卉科學研究院完成。供試菌株由吉林省食用菌研究院保藏（菌株號：JLSHJY2018064），經過分子生物學試驗，提取其DNA并擴增ITS序列，將其結果在GenBank上進行比對，確定該菌株為杏鮑菇（GenBank登錄號：MW426371）。

1.2試驗方法

1.2.1單因素試驗

1.2.1.1碳源試驗PDA（馬鈴薯葡萄糖瓊脂）基礎培養基，碳源分別為葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖、可溶性淀粉，其他成分不變，配制100 mL培養基，并倒入3個平板中。在培養基平板中央接入直徑為 5 mm 的大小相同的菌塊，于25 ℃培養。每隔24 h觀察1次并用平板劃線法測量、標記菌絲生長長度。連續測量直至某一平板長滿菌絲，同時觀察并記錄菌絲長勢，繪制折線圖，每個處理設3個重復。

1.2.1.2氮源試驗PDA基礎培養基，氮源分別為酵母粉、蛋白胨、尿素、硫酸銨、麥麩汁，其他條件不變。處理、接種、培養、記錄、測量、分析方法等同“1.2.1.1”節。

1.2.1.3pH值試驗采用PDA基礎培養基，設置pH值為5、6、7、8、9等5個梯度，為作圖方便分別命名為pH1、pH2、pH3、pH4、pH5，其他條件同“1.2.1.1”節。

1.2.1.4溫度試驗PDA基礎培養基，pH值設為自然條件，接種后分別置于15、20、25、30、35 ℃的恒溫培養箱中培養，其他條件同“1.2.1.1”節。

1.2.1.5微量元素篩選試驗PDA基礎培養基，pH值自然，以空白、0.15% KH2PO4、0.1% MgSO4、0.15% KH2PO4+0.1% MgSO4、0.1% CaCO3、005% 維生素B1作為供試的微量元素。其他條件同“1211”節。

1.2.2正交試驗從5種單因素中選出培養效果最佳者，組成4因素3水平的正交試驗（表1）。具體采用PDA培養基，分別添加相應的碳源、氮源、微量元素，改變pH值及溫度，置于不同環境下培養。其他條件同“1.2.1.1”節。

1.2.3原種培養基配方試驗分別以高粱、玉米和小麥為主料，配方為85%主料、5%麥麩、5%鋸末、 2%豆粕、1%玉米粉、0.5%石灰、1.5%石膏，分別設置含水量為55%、60%、65%。分別編號為1（主料為高粱，含水量為55%）、2（主料為高粱，含水量為60%）、3（主料為高粱，含水量為65%）、4（主料為玉米，含水量為55%）、5（主料為玉米，含水量為60%）、6（主料為玉米，含水量為65%）、7（主料為小麥，含水量為55%）、8（主料為小麥，含水量為60%）、9（主料為小麥，含水量為65%）。接種量以鋪滿袋口為準，置于25 ℃培養。每隔24 h觀察1次并用劃線法測量、標記菌絲生長長度。連續測量直至出現某一袋長滿菌絲，同時觀察并記錄菌絲長勢，繪制折線圖，每個處理設10個重復。

1.2.4栽培種栽培配方試驗分別以木屑、玉米芯和鋸末為主料，配方為主料65%、20%麥麩、10%稻殼、3%豆粕、1%石灰、1%石膏，含水量分別設置為55%、60%、65%，其他條件同“1.2.3”節。分別編號為1（主料木屑，含水量55%）、2（主料木屑，含水量60%）、3（主料木屑，含水量65%）、4（主料玉米芯，含水量55%）、5（主料玉米芯，含水量60%）、6（主料玉米芯，含水量65%）、7（主料鋸末，含水量55%）、8（主料鋸末，含水量60%）、9（主料鋸末，含水量65%）。

1.3數據分析

試驗采用Graph Pad Prism 5和SPSS軟件進行圖片制作和統計分析。

2結果與分析

2.1碳源對菌絲生長的影響

由圖1、表2可以看出，菌絲在葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖和可溶性淀粉5種碳源上均能生長，在以乳糖為碳源的培養基上，菌絲生長緩慢，長勢明顯減弱，與生長速度最快、長勢最好的蔗糖相比差異極顯著。在以葡萄糖為碳源的培養基上，菌絲的長勢也較稀疏，與蔗糖相比差異顯著。在以蔗糖、麥芽糖和可溶性淀粉為碳源的培養基上，菌絲生長速度雖有差別但差異不顯著。綜合菌絲長勢和菌絲生長速度可見，蔗糖、麥芽糖和可溶性淀粉均是菌絲可利用的較好碳源。

2.2氮源對菌絲生長的影響

由圖2、表2可以看出，菌絲在酵母粉、蛋白胨、尿素、硫酸銨和麥麩汁氮源上均能生長，但在以尿素為氮源的培養基上生長極其緩慢;在以硫酸銨為氮源的培養基上菌絲生長緩慢，長勢明顯減弱;在以酵母粉為氮源的培養基上生長速度最快，菌絲長勢最好;在以蛋白胨、麥麩汁為氮源的培養基上的長勢次之;在以蛋白胨、尿素、硫酸銨和麥麩汁為氮源的培養基上的生長速度與酵母浸粉相比差異均極顯著。綜上，酵母浸粉是菌絲生長的最適氮源。

2.3pH值對菌絲生長的影響

由圖3、表2可以看出，菌絲在pH值為5.0～90時均能生長，在此期間菌絲生長速率呈先逐漸上升后又逐漸下降的趨勢，與生長速度最快、長勢最好的pH3（pH值為7）相比，pH2 （pH值為6）時的菌絲生長速率差異不顯著，與其他組別相比差異極顯著。

2.4溫度對菌絲生長的影響

由圖4、表2可以看出，菌絲在15～35 ℃范圍內均能生長，但在15 ℃以下、35 ℃以上時，菌絲生長非常緩慢，菌絲長勢較弱。在25、30 ℃時，菌絲生長速度快、長勢好。與生長速度最快、長勢最好的25 ℃相比，菌絲在30 ℃下的生長速率差異不顯著，與在20 ℃下的生長速率相比差異顯著，與15、35 ℃下的生長速率相比差異極顯著。因此得出菌絲的最適生長溫度為25～30 ℃。

2.5微量元素對菌絲生長的影響

由圖5可以看出，菌絲在0.15% KH2PO4、01% MgSO4、0.15% KH2PO4+0.1% MgSO4、01% CaCO3、0.05% 維生素B1為微量元素的培養基上均能生長，與生長速度最快的以0.15% KH2PO4為微量元素的培養基相比，0.1% MgSO4、0.15% KH2PO4+0.1% MgSO4的菌絲生長速率差異不顯著，與0.1% CaCO3培養基有顯著性差異，與005%VB1培養基相比差異極顯著。由此可見，015% KH2PO4、0.1% MgSO4、0.15% KH2PO4+01% MgSO4均是菌絲可利用的較好微量元素。

2.6正交試驗結果分析

由于單因素試驗不能考慮到交互作用的影響，因此需要進行正交試驗才能得出最終結果。本研究以碳源、氮源、溫度、pH值組建4因素3水平的正交試驗，觀察各試驗菌絲的生長情況（表3、表4）。由表3可以看出，9組試驗菌絲均能生長，以第7組菌絲的生長速度最快、長勢最好。經SPSS主體效應分析得出結論，各因素對菌絲生長的影響力排序為溫度>碳源>pH值>氮源。在正交試驗中，生長最快的為7號培養條件（碳源為可溶性淀粉，氮源為酵母浸粉，pH值為8，溫度為25 ℃）。

2.7原種培養基配方試驗結果分析

由圖6可以看出，菌絲在供試配方上均能生長，最佳原種培養基配方為2號，即85%玉米、5%麥麩、5%鋸末、2%豆粕、1%玉米粉、0.5%石灰、1.5%石膏、60%含水量。與3、5號配方相比差異不顯著，與1號配方相比差異顯著，與6、8號配方相比差異極顯著，與4、7、9號配方相比差異極顯著。

2.8栽培種栽培配方試驗結果分析

由圖7可見，菌絲在供試配方上均能生長，最佳培養基配方為5號，即65%鋸末、20%麥麩、10%稻殼、 3%豆粕、1%石灰、1%石膏、60%含水量。與1、

2、4、7、8、9號培養基相比差異不顯著，與3號培養基相比差異極顯著，與6號培養基相比差異極顯著。

3結論

通過對杏鮑菇菌絲生長所需的碳源、氮源、溫度、pH值和微量元素的單因素試驗和正交試驗，得出供試范圍內的適宜碳源為可溶性淀粉，適宜氮源為酵母浸粉，適宜pH值為8，適宜溫度為25 ℃，微量元素為 KH2PO4，最佳原種培養基配方為2號，最佳栽培種培養基配方為5號。

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作者簡介：陸珠（1991—），女，吉林公主嶺人，碩士，實習研究員，主要從事食用菌方面的研究。E-mail：783929277@qq.com。

通信作者：于延申，碩士，研究員，主要從事食用菌方面的研究。E-mail：1943294308@qq.com。