茶多酚對草魚感染嗜水氣單胞菌病的影響

○潘忠斌

我國是世界茶葉生產(chǎn)大國，茶葉加工中獲得的茶多酚具有抗氧化、抗細菌感染、抵抗輻射、提高機體免疫力的功效。適量的茶多酚可以有效的促進草魚生長，提高機體免疫力。本試驗通過對草魚飼喂含茶多酚的飼料，了解添加茶多酚對草魚免疫指標的影響、最合適添加濃度及人工感染嗜水氣單胞菌的成活率。

1 .材料和方法

1.1 飼料

本試驗選用正大草魚魚苗專用飼料F3,產(chǎn)品成分表如表1。將選用的飼料進行破碎后按照試驗要求添加茶多酚，配制成5種含量不同的飼料，并將破碎后的飼料制為2-3mm的顆粒。

表1 選用飼料成分表

1.2 試驗魚選擇及管理

試驗用的草魚幼魚選擇平均體重為（16.33±0.11）g的草魚魚苗450尾，魚苗健壯，隨機將草魚的幼魚分為5組，每個試驗組90尾，3個重復，每個網(wǎng)箱飼養(yǎng)30尾，飼養(yǎng)于15個網(wǎng)箱內(nèi)。試驗前將草魚停食48小時，然后按照試驗分組投喂含量茶多酚不同的飼料，每日飼喂兩次，保證在20分鐘內(nèi)吃完且無殘留餌料。飼喂60天后接種嗜水氣單胞菌，繼續(xù)飼喂15天。試驗用的魚按照分組飼養(yǎng)在不同的網(wǎng)箱內(nèi)，水溫在18-24℃左右，pH值6.8-7.5，溶氧保持在5mg/L以上，水池內(nèi)配備過濾以及增氧設備。

1.3 樣本采集

試驗結(jié)束后，停食24小時，在每個網(wǎng)箱中隨機選3尾，采集尾靜脈血，將采集的試驗組草魚靜脈血液進行3000r/分鐘離心，離心10分鐘后緩慢吸取上清液，放置于-20℃冰箱內(nèi)盡快進行檢測。

1.4 血清的免疫指標

本實驗檢測的血清指標為：超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、堿性磷酸酶（AKP）三種項目，試劑采購自某生物工程研究所。

1.5 攻毒試驗

采集血清后，將每組隨機選取草魚20尾，設置3個重復，將試驗草魚每尾注射0.2mL濃度為1.6×108cfu/mL的嗜水氣單胞菌，觀察15天內(nèi)的死亡情況，每天均進行詳細的記錄。

2 結(jié)果與分析

2.1 茶多酚對草魚血清免疫指標的影響

表2 結(jié)果顯示，在草魚飼料中添加茶多酚后超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、堿性磷酸酶（AKP）這三個檢測項目的活性均高于未添加茶多酚的對照組，且當飼料中添加的茶多酚含量為500mg/kg和700mg/kg的三個檢測項目的數(shù)值明顯高于其他組（P＜0.05），但700mg/kg數(shù)據(jù)有所下降，說明飼料中添加茶多酚量為500mg/kg可以顯著提高SOD、CAT、ASP的活性。

表2 試驗組飼料不同茶多酚含量的血清免疫指標

2.2 飼喂茶多酚對感染嗜水氣單胞菌存活率的影響

將一定濃度的嗜水氣單胞菌注射于草魚體內(nèi)發(fā)生感染，各組草魚的存活率如圖1，在感染后的15天中，5個試驗組的存活率均在下降，但是相比較而言，飼喂含茶多酚飼料的草魚存活率高于對照組，尤其是試驗組的茶多酚含量為500mg/kg、700mg/kg與其他組差異顯著（P＜0.05）

圖1 試驗組飼喂茶多酚感染嗜水氣單胞菌存活率

3 討論

茶多酚作為一種在茶中提取的物質(zhì)，具有抗氧化功能，降脂功能以及抗菌抗病毒的功能。目前茶多酚在畜禽養(yǎng)殖業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)等均有一定的應用并獲得了較好的效果。2012年劉振東對茶多酚對羅非魚生長情況等免疫指標進行研究，結(jié)果顯示飼喂飼料茶多酚含量為133mg/kg時的羅非魚生長狀態(tài)、增重情況、非特異性免疫情況優(yōu)于其他實驗組。2017年崔光等研究了飼糧中添加茶多酚對于育成前期水貂的生長以及營養(yǎng)情況的影響，結(jié)果顯示在日糧中添加0.05%的茶多酚可以有效的提高水貂鈣磷比例的消化，更有意義生長。2020年陳明等研究了茶多酚對蘇姜育肥豬的肉品質(zhì)以及生長性能進行了研究，結(jié)果顯示使用含量為300mg/kg時的飼料效果最佳。2021年蔣磊等研究了茶多酚對于肉雞生長性能以及肉品質(zhì)的影響，結(jié)果顯示添加量為0.04%更有益于蛋雞的生長和產(chǎn)出更高品質(zhì)的肉。本試驗通過對草魚飼喂含不同濃度茶多酚的飼料，了解喂食60天后血清學免疫指標，免疫指標顯示在飼喂含量為500mg/kg時指標數(shù)值最佳，且在后續(xù)的攻毒試驗組中，飼喂含茶多酚500mg/kg、700mg/kg的草魚生存率最高。

機體抗氧化能力的三種指標在飼喂含有不同濃度的茶多酚均有所提高，說明了飼喂茶多酚可以有效的提高草魚機體的抵抗力。嗜水氣單胞菌是一種主要通過腸道感染的致病菌，在接種病菌后會引起草魚出現(xiàn)全身癥狀，當機體的免疫力得到有效的提高后可以防止該種細菌的感染，本試驗采用的不同濃度茶多酚飼料均起到了提高血清免疫指標的作用，血清檢測指標隨著濃度的升高而升高，在飼喂?jié)舛葹?00mg/kg的試驗組中檢測指標有所下降，主要原因是茶多酚濃度較高不能完全吸收起到了抑制的作用。機體抗病能力的提高有效的提高了草魚感染嗜水氣單胞菌后的生存率。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，通過飼喂飼料添加劑，提高抗病水平，可以有效的提高抗病力，為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)帶來更好的效益。

4 結(jié)論

茶多酚作為茶葉中提取的一種可以有效增加機體免疫力，抑制病菌生長的物質(zhì)，應用于草魚的養(yǎng)殖中會起到一定的積極作用，有效的提高養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟效益，本研究通過對草魚的血清學免疫指標進行檢測，感染試驗組草魚嗜水氣單胞菌的生存率的實驗結(jié)果顯示，草魚飼料中添加含量為500mg/kg的茶多酚更有益于提高草魚的免疫力。

（通聯(lián)：231300，安徽六安舒城縣水產(chǎn)發(fā)展中心，18056479107）