穿心蓮內酯干混懸劑對人工感染大腸桿菌致肉雞腹瀉的藥效評價

李江北，楊 霞，傅嘉莉，李美娣，邱 電，陳建新，武 力

(華南農業大學獸醫學院 廣東省獸藥研制與安全評價重點實驗室，廣州 510642)

雞大腸桿菌病是由致病性大腸桿菌引起的一種常見的多發性傳染病[1]，可發生于各日齡雞群，該病嚴重影響雞的成活率及生長性能，已成為制約我國養雞業健康發展的重要疫病[2]。大腸桿菌性腹瀉是雞大腸桿菌病的其中一種類型，是腸毒素性大腸桿菌ETEC入侵機體后，在小腸中定殖并釋放出腸毒素，從而引起嚴重的腹瀉[3]，發病雞只還表現精神沉郁、食欲減退或廢絕[4]、體溫升高、體重下降等癥狀[5]。該病發病率高達 29%～71%，病死率可達 4%～42%[6]。由于多年來抗生素在雞養殖業上的長期、廣泛使用，使得細菌耐藥性問題日益嚴重[7]，現有抗生素難以有效防控該疾病，抗生素替代物的開發已逐漸成為雞養殖業的迫切需求和研究熱點[8]。臨床實踐表明，穿心蓮及復方制劑對腹瀉有較好的防治效果，并具有低殘留、低毒性、不易產生耐藥性等優點[9]。曹雨辰等[10]發現，以苦參和穿心蓮為主要藥材制備的“參蓮口服液”對臨床生長豬和肉雞的腹瀉具有顯著療效；嚴永武等[11-12]報道，穿心蓮末灌服對綿羊腹瀉具有顯著療效；Li等[13]研究表明，蓮香散能降低大腸桿菌感染肉雞的死亡率，改善肉雞生長性能。但由于穿心蓮質量容易因產地、氣候、耕作條件及加工方式的不同而發生變化，從而影響穿心蓮提取物及復方的質量和藥效的穩定性[14-15]。以穿心蓮活性成分為原料的獸藥制劑具有有效成分確切可控，療效穩定等優點，因而比穿心蓮及其復方具有更好的應用前景[16]。

穿心蓮內酯是清熱解毒類中藥穿心蓮的主要有效成分[17]，具有免疫調節、抗炎、抗病毒、抗腫瘤、降糖、降壓等藥理活性[18]，對細菌性與病毒性上呼吸道感染及細菌性痢疾有顯著療效，被譽為“天然抗生素藥物”[19]。張程亮等[20]研究發現，穿心蓮內酯可改善由瀉葉和蓖麻油導致的小鼠腹瀉；Guo等[21]報道，穿心蓮內酯可通過干擾細菌群體感應降低禽致病性大腸桿菌及其毒素對雞Ⅱ型肺細胞的損傷。但穿心蓮內酯對雞大腸桿菌腹瀉的治療未見報道。人醫上，穿心蓮內酯有滴丸、分散片、軟膠囊等制劑[22]，但獸醫上只批準穿心蓮內酯作為原料藥，尚沒有任何獸用制劑獲得批準，阻礙了該藥的臨床應用[23]。本試驗依據穿心蓮內酯的理化性質研制出穿心蓮內酯干混懸劑，評價該干混懸劑對肉雞大腸桿菌感染的臨床藥效，為穿心蓮內酯抗肉雞大腸桿菌感染的臨床使用提供試驗依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 主要藥品與試劑 穿心蓮內酯購于四川恒瑞通達生物科技有限公司，尿素購于福晨(天津)化學試劑有限公司，變性淀粉購于安徽華明太合生物工程有限公司，微晶纖維素-羧甲基纖維素鈉(CL-611)購于杜邦營養與生物科技，LB瓊脂和肉湯購于廣東凱微生物科技有限公司，粘菌素由清遠容大生物工程有限公司贈送，血清生化試劑盒購于邁瑞生物醫療電子有限公司，丙二醛(MDA)檢測試劑盒、超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)檢測試劑盒購于上海碧云天生物技術有限公司。

1.1.2 試驗菌株 產腸毒素性大腸桿菌ETECO101，由華南農業大學獸醫學院藥理教研室曾振靈教授課題組贈送。

1.1.3 試驗動物 1日齡嶺南黃快長型商品代肉雞，由溫氏大華農生物科技有限公司提供。

1.1.4 飼養管理 試驗在華南農業大學獸醫學院的試驗雞舍內進行，試驗雞采用籠養方式。試驗開始前1周對雞舍進行全面清掃消毒。試驗初始溫度保持在33 ℃，隨后每周降2～3 ℃，最后維持在24～26 ℃；相對濕度保持在65%～75%。試驗期間雞自由采食及飲水，給藥期間確保藥水飲完后再自由飲水。按照常規程序免疫，定期進行消毒，人工定時清糞，保持雞舍環境衛生，每日觀察和記錄雞群健康狀況、死亡情況，及時清除死亡雞只。

1.2 試驗方法

1.2.1 穿心蓮內酯干混懸劑的制備 稱取13 g尿素置于燒杯中，加入200 mL水攪拌至溶解，然后加入13 g變性淀粉攪拌至溶解，再加入4 g微晶纖維素-羧甲基纖維素鈉(CL-611)，高速剪切機以12 000 r·min-1轉速乳化10 min。稱取10 g穿心蓮內酯原料藥加入溶液中攪拌至均勻分散，高速剪切機以12 000 r·min-1轉速乳化10 min。所得含藥混懸液在高壓均質機低壓200～300 bar下循環5次，依次逐漸加壓至400、600、800和1 000 bar的壓力下各循環5次，然后以壓力1 200 bar循環20次，制得穿心蓮內酯混懸液。以300 mL穿心蓮內酯混懸液為基量，出風溫度100 ℃，進風溫度180 ℃和進料速度14 mL·min-1進行噴霧干燥，得到穿心蓮內酯干混懸劑。

1.2.2 菌種制備 取-70 ℃冷凍儲存的受試細菌ETECO101接種于LB平板，并于 37 ℃恒溫培養箱中培養過夜，使其長出合適大小的單菌落；挑取單菌落菌株接種于錐形瓶內100 mL LB肉湯中，置于 37 ℃、210 r·min-1轉速的搖床中振蕩培養12 h，使細菌生長至對數期，4 ℃預冷離心機內1 500 ×g離心8 min，棄掉上清液，然后用生理鹽水重懸稀釋，使菌液最終含菌量大約為 5 × 108cfu·mL-1，備用。

1.2.3 動物分組與試驗設計 將1日齡嶺南黃快長型商品代肉雞飼養至12日齡，選取健康試驗雞300只，隨機分為5個組，每組4個重復，每個重復15只。第1組為空白對照組(CON組)，第2組為大腸桿菌攻毒組(ETECO101組)，第3、4、5組均為大腸桿菌攻毒加受試藥物組。分別在第3、4試驗組雞的飲水中添加穿心蓮內酯干混懸劑(AG)，使得飲水中藥物濃度分別為100和200 mg·L-1，在第5組試驗組雞的飲水中添加粘菌素(colistin, CS)，藥物濃度為60 mg·L-1。提前3 d連續給藥直至攻菌后第3天停止給藥，早、晚各給藥1次，每次每個重復700 mL。于肉雞15日齡攻毒，除空白對照組外，各組腹腔注射0.2 mL含5×108cfu·mL-1ETECO101的生理鹽水，空白對照組腹腔注射0.2 mL 生理鹽水。其中，每組3個重復(3×15只，以每個重復為單位)用于計算存活率、糞便評分、平均日增重和平均日采食量，以評價藥物的藥效，試驗至感染后第7天結束；每組剩余的1個重復(15只)于攻菌后24 h和第5天分別取6只雞進行采血、剖檢和組織取樣。具體分組及處理見表1。

表1 動物分組與試驗設計表

1.3 樣品采集及指標測定

1.3.1 存活率及生長性能 在ETECO101感染后以每個重復為單位每天記錄死亡率、體重和采食量，通過平均日采食量(ADFI)和平均日增重(ADG)計算飼料/增重比(FCR)。

1.3.2 腹瀉 在ETECO101感染后24和36 h，通過觀察糞便形態，判定腹瀉評分，分為4個等級(表2)：0-正常，無拉稀，糞便正常，形狀規則；1-輕微，糞便周圍有一圈拉稀，形狀規則；2-中等，拉稀，糞便水樣，形狀無規則；3-嚴重，拉稀嚴重，糞便水樣噴射狀，帶血絲，形狀無規則。并根據評分系統，由與試驗無關人員進行盲評，通過糞便得分進行腹瀉判定。

表2 肉雞腹瀉評分標準

1.3.3 血清及組織樣本采集 在細菌感染后24 h 和第5天，每組的第4個重復中隨機選取6只肉雞，通過翼靜脈穿刺收集血液樣本，收集到真空采血管(5 mL)中，靜置30 min，然后將血樣在3 000×g4 ℃下離心15 min以收集血清，并在-80 ℃下儲存以備分析。處死后取空腸用冰冷的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)沖洗，并固定在4%多聚甲醛中以進行組織學分析。脾和法氏囊組織稱重，并將肝固定在4%多聚甲醛中以進行組織學分析。

1.3.4 免疫器官指數 通過稱量所采脾和法氏囊的重量，計算出各個器官的免疫指數，計算公式如下:

1.3.5 腸道形態 將小腸組織置于4%的多聚甲醛溶液中固定2 d后，用石蠟包埋，然后用切片機切成厚度為5～10 μm的圓形切片，將切片用蘇木精和曙紅染色以觀察腸道形態。測量每個樣品5個定向良好的隱窩-絨毛單位的絨毛高度和隱窩深度，并計算絨毛高度與隱窩深度之比。

1.3.6 血清生化指標 采用全自動生化分析儀測定血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素(UREA)、葡萄糖(GLU)和肌酐(CREA)含量。

1.3.7 血清氧化應激狀態 使用酶聯免疫吸附測定試劑盒測定血清中丙二醛(MDA)的含量，測定超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性。

1.4 數據統計分析

采用GraphPad Prism 8中的方差分析(ANOVA)對數據進行顯著性分析，然后采用T test比較對照組與所有其他組。結果以“平均值±標準誤”表示，P<0.05表示具有顯著差異。

2 結 果

2.1 臨床特征與死亡情況

ETECO101感染后，與正常組相比，發病雞精神沉郁，羽毛雜亂，嚴重者靜臥嗜睡、抱團，腹瀉嚴重，肛門四周有糞便玷污，拉黃綠色稀糞，呈噴射狀，不規則。與感染組相比，各給藥組臨床癥狀相對較輕。

ETECO101感染后12～24 h，肉雞出現死亡(圖1)，24 h后死亡明顯減少。細菌感染后第7天，ETECO101組的存活率為68.9%，100 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組與粘菌素組的存活率為82.2%，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組的存活率為86.7%。相對于ETECO101組，100 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組與粘菌素組使肉雞存活率提高13.3%(P<0.05)，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組使肉雞存活率提高17.8%(P<0.05)。

*表示與感染組相比差異顯著，P<0.05。下同

2.2 穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞生長性能的影響

從生長性能來看(表3)，攻毒后7 d內，相對于ETECO101組，各給藥組均顯著增加了肉雞ADG(P<0.01)和ADFI(P<0.01)。

表3 穿心蓮內酯干混懸劑對ETECO101感染肉雞生長性能的影響(n=3)

2.3 穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞腹瀉的影響

從糞便評分來看(圖2)，相對于空白組，ETECO101感染后的24和36 h，肉雞腹瀉顯著升高；相對于ETECO101組，在24和36 h，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組顯著抑制了肉雞腹瀉(P<0.05)；在36 h時，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑和粘菌素組顯著抑制了肉雞腹瀉(P<0.05)。

腹瀉評分基于每組3個重復進行打分

2.4 病理剖檢與肝組織病理學

病理剖檢發現，與正常組相比，感染組肉雞腹腔腥臭味，充滿黃綠色水樣或黏稠液體。肝腫大，淤血或散在出血，表面覆有纖維素性黃色薄膜；心腫大，心包炎；脾腫大，充血；腸道脹氣，腸壁變薄，腸黏膜脫落嚴重，有大量的出血點。與感染組相比，給藥組癥狀相對較輕。

對肝組織進行組織病理學分析，結果表明(圖3)，對照組肝細胞形態正常，肝索結構清晰，肝細胞呈多邊形，細胞核仁明顯；大腸桿菌攻毒組肝細胞排列紊亂，細胞之間界限不清，肝索結構消失，部分區域可見均質粉染，細胞發生碎裂的壞死灶；穿心蓮內酯組和粘菌素組肝細胞形態較細菌攻毒組改善。

圖3 穿心蓮內酯干混懸劑對ETECO101感染肉雞第5天后肝組織病理變化的影響(400×)

2.5 穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞免疫器官指數的影響

從免疫器官指數來看(圖4)，相對于空白組，ETECO101組顯著降低了感染后24 h肉雞法氏囊指數(P<0.01)，但第5天差異不顯著；相對于ETECO101組，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組顯著增加了感染后24 h肉雞脾臟指數(P<0.01)；相對于ETECO101組，各給藥組均顯著增加了感染后24 h肉雞法氏囊指數(P<0.01)。

圖4 穿心蓮內酯干混懸劑對ETECO101感染肉雞免疫器官指數的影響(n=6)

2.6 穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞血清生化指標的影響

采用全自動生化分析儀測定血清TP、ALB、GLB、UREA、GLU和CREA含量，結果見表4。從血清生化分析來看，相對于空白組，感染后24 h ETECO101組肉雞血清中TP(P<0.01)、ALB(P<0.01)、GLB(P<0.05)和GLU(P<0.01)含量顯著降低，UREA(P<0.01)含量顯著上升，對CREA水平影響不大。相對于ETECO101組，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組顯著增加了血清中TP(P<0.01)和ALB(P<0.01)含量，粘菌素組增加TP(P<0.01)和ALB(P<0.05)含量的效果次之，100 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組顯著增加TP含量(P<0.01)，但不增加ALB含量。200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組和粘菌素組顯著降低了血清中UREA(P<0.01)含量。

表4 穿心蓮內酯干混懸劑對ETECO101感染肉雞血清生化指標的影響(n=6)

相對于空白組，感染后第5天ETECO101組肉雞血清中TP(P<0.01)、ALB(P<0.01)和GLB(P<0.01)含量顯著升高，而UREA(P<0.01)、GLU(P<0.01)和CREA(P<0.01)含量顯著下降。相對于ETECO101組，各給藥組顯著降低了血清中GLB(P<0.01)含量，顯著增加了血清中UREA(P<0.01)含量，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組顯著增加了血清中GLU(P<0.01)含量。

2.7 穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞血清丙二醛(MDA)含量的影響

穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞血清MDA含量的影響(圖5)，相對于空白組，ETECO101組顯著地增加了感染后24 h(P<0.01)和第5天肉雞血清MDA的含量(P<0.05)；相對于ETECO101組，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組顯著地降低了感染后24 h(P<0.01)和第5天(P<0.05)肉雞血清MDA的含量；粘菌素組顯著地降低了感染后24 h 肉雞血清MDA的含量(P<0.01)。

圖5 穿心蓮內酯干混懸劑對ETECO101感染肉雞血清MDA含量的影響(n=6)

2.8 穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞血清超氧化物歧化酶(SOD)活力的影響

穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞血清SOD活力的影響(圖6)，相對于空白組，ETECO101組顯著降低了感染后第5天肉雞血清SOD活力(P<0.01)，但感染后24 h差異不顯著；相對于ETECO101組，粘菌素組顯著升高了感染后24 h肉雞血清SOD活力(P<0.01)，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組升高效果次之(P<0.05)；各給藥組均顯著升高了感染后第5天肉雞血清SOD活力(P<0.01)。

圖6 穿心蓮內酯干混懸劑對ETECO101感染肉雞血清SOD活力的影響(n=6)

2.9 穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力的影響

穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞血清GSH-Px活力的影響見圖7。相對于空白組，ETECO101組顯著降低了感染后24 h肉雞血清GSH-Px活力(P<0.01)，但感染后第5天差異不顯著；相對于ETECO101組，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組顯著升高了感染后24 h肉雞血清GSH-Px活力(P<0.001)；粘菌素組顯著升高了感染后第5天肉雞血清GSH-Px活力(P<0.01)，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組升高效果次之(P<0.05)。

圖7 穿心蓮內酯干混懸劑對ETECO101感染肉雞血清GSH-Px活力的影響(n=6)

2.10 穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞腸道組織形態的影響

穿心蓮內酯干混懸劑對肉雞空腸組織形態的影響見圖8及表5，相對于空白組，ETECO101組顯著降低了感染后24 h肉雞空腸絨毛高度(P<0.05)和絨毛高度與隱窩深度的比例(P<0.01)，顯著增加了肉雞空腸隱窩深度(P<0.05)；相對于ETECO101組，100和200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組和粘菌素組顯著增加了感染后24 h肉雞空腸絨毛高度(P<0.05)，降低了隱窩深度(P<0.05)；各給藥組均顯著增加了絨毛高度與隱窩深度的比例(P<0.01)。相對于空白組，ETECO101組顯著降低了感染后第5天肉雞空腸絨毛高度(P<0.05)和絨毛高度與隱窩深度的比例(P<0.01)，顯著增加了肉雞空腸隱窩深度(P<0.05)；相對于ETECO101組，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組顯著增加了感染后第5天肉雞空腸絨毛高度(P<0.05)和絨毛高度與隱窩深度的比例(P<0.01)，降低了隱窩深度(P<0.05)；粘菌素組顯著增加了感染后第5天肉雞空腸絨毛高度(P<0.01)和絨毛高度與隱窩深度的比例(P<0.05)，降低了隱窩深度(P<0.05)。

表5 穿心蓮內酯干混懸劑對ETECO101感染肉雞空腸組織形態的影響(n=6)

圖8 穿心蓮內酯干混懸劑對ETECO101感染肉雞第5天空腸形態結構的影響(100×)

3 討 論

穿心蓮內酯是清熱解毒中藥穿心蓮的主要藥效成分，穿心蓮內酯及其水溶性鹽“穿琥寧”、“炎琥寧”、“蓮必治”、“喜炎平”等多種制劑在醫學臨床上廣泛用于呼吸道及消化道感染及炎癥性疾病的治療[24]。獸醫上只批準了穿心蓮內酯原料藥，沒有任何批準使用的制劑。本研究針對養雞業通常采用飲水給藥的投藥途徑，研制出適用于飲水給藥的穿心蓮內酯干混懸劑，全面考察了該制劑對產腸毒素性大腸桿菌ETECO101感染肉雞的治療效果。結果表明，穿心蓮內酯干混懸劑飲水給藥能顯著提高大腸桿菌感染肉雞的存活率，減輕感染雞只的臨床病癥及腹瀉。

生長性能是衡量藥物對雞只保護效果的重要指標。臨床上腸毒素性大腸桿菌會引起肉雞嚴重的腸道損傷和死亡，降低肉雞的體重、采食量和飼料轉化效率[25]。本試驗發現，ETECO101感染導致肉雞體重和采食量下降。產腸毒素性大腸桿菌感染肉雞后在腸道中大量增殖，釋放出毒素，致使腸黏膜脫落，屏障功能被破壞，肉雞對營養物質的吸收和轉化下降[26]。本試驗證明，飲水中添加穿心蓮內酯干混懸劑，能夠有效地增加感染肉雞的采食量和體重。張霞等[27]研究表明,穿心蓮內酯可直接破壞內毒素結構，并抑制其所介導釋放的大量炎性因子的活性而起到拮抗內毒素的作用。鄭晨等[28]研究還發現，穿心蓮內酯可顯著改善內毒素導致的機體發熱。而本研究前期藥敏試驗發現，穿心蓮內酯對于產腸毒素性大腸桿菌無直接抑菌作用，其作用可能是通過抑制大腸桿菌釋放的內毒素，從而抑制大腸桿菌在肉雞腸道中的定植，改善肉雞腹瀉。

免疫器官指數在一定程度上反映了機體免疫功能的強弱，是評價家禽免疫力的重要指標，包括胸腺指數、脾臟指數、法氏囊指數[29]。王俊峰等[30]研究發現，日糧中添加乳酸菌制劑可以提高肉雞法氏囊指數，但是對于后期法氏囊指數無顯著改變。本研究發現，肉雞感染ETECO101 24 h后，法氏囊指數顯著下降，飲水中添加穿心蓮內酯干混懸劑能夠顯著增加肉雞法氏囊指數，感染后期隨著機體免疫力地增強，穿心蓮內酯干混懸劑對于肉雞免疫器官指數的改善效果不明顯。說明當病原體入侵機體后，機體的抵抗力顯著下降，而穿心蓮內酯可以通過調節機體，增強其免疫力，在一定程度上抵抗病原體的入侵。

正常情況下，機體自由基的產生和清除保持平衡，但在病原體入侵的情況下，體內自由基增加，氧化能力超過抗氧化能力而發生氧化應激，從而直接引起生物膜脂質過氧化、細胞內蛋白及酶變性最后導致細胞死亡或凋亡，造成組織損傷和疾病發生[31]。MDA是脂質過氧化反應產物，其含量可以體現氧自由基的含量和脂質過氧化程度。SOD和GSH-Px通過清除超氧陰離子(O2-)而保護細胞免受損傷，它們活性的高低間接反映機體清除自由基的能力，也就是機體抗氧化的能力[29]。何思蓉等[32]研究表明，穿心蓮內酯能在中樞神經和外周血管中產生抗氧化作用而達到對機體的保護作用。其抗氧化作用主要可以歸結為抑制自由基生成，防止脂質過氧化，從而降低自由基毒性[33]。本試驗發現，肉雞感染產腸毒素性大腸桿菌ETECO101后，發生氧化應激，感染細菌后24 h肉雞血清中MDA含量上升，血清GSH-Px活力下降，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組顯著降低了感染細菌后24 h肉齡肉雞血清中MDA含量，升高了SOD和GSH-Px活力。肉雞感染產腸毒素性大腸桿菌ETECO101后第5天血清中MDA含量上升，SOD活力顯著下降，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組可以顯著降低了肉雞血清中MDA含量，升高SOD活力。說明穿心蓮內酯可以通過降低血清MDA含量，升高SOD和GSH-Px活力來改善肉雞血清的氧化應激狀態。

小腸不僅是主要的消化吸收器官，而且還起到保護性屏障的作用，以防止腸腔內抗原、微生物和毒素滲透進入內部環境。然而，腸病原體如腸毒素性大腸桿菌，容易在小腸中定殖并釋放出腸毒素，從而引起嚴重的腹瀉并損害腸屏障完整性[34]。小腸的黏膜結構與功能完整性是保證機體能夠充分吸收營養物質的前提。衡量腸黏膜功能的重要指標包括絨毛高度、隱窩深度和絨毛高度與隱窩深度的比值[35]。從本試驗可以看出，當肉雞受到產腸毒性大腸桿菌ETECO101刺激后，腸絨毛變短、隱窩深度加深、絨毛高度與隱窩深度的比值下降。飲水中添加穿心蓮內酯干混懸劑可以通過增加絨毛高度和降低隱窩深度，減少細菌感染對腸黏膜結構的損傷，增加肉雞的營養吸收，另外，200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組改善腸道形態的效果優于100 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組。

4 結 論

穿心蓮內酯干混懸劑可以減少產腸毒素性大腸桿菌ETECO101感染肉雞導致的雞死亡，改善感染肉雞的生長性能，降低感染肉雞血清中MDA含量和提高血清SOD和GSH-Px活力，并抑制感染導致的雞腸道損傷。200 mg·L-1穿心蓮內酯干混懸劑組效果優于100 mg·L-1劑量組。