陰道微生態評價系統檢測陰道分泌物診斷細菌性陰道病的價值

吳秀珍，馬菲菲，林麗華，黃紹娥

三明市第一醫院檢驗科 (福建三明 365000)

細菌性陰道病(bacteria vaginosis，BV)是由于陰道微生態平衡被破壞而導致的混合感染型疾病，在育齡期女性中發病率較高。BV可誘發多種婦科疾病和(或)產科疾病，如尿道炎、婦科腫瘤、早產、羊水感染等，嚴重威脅患者的身心健康[1]。因此，準確診斷、及時有效治療BV患者的意義重大。既往，國內外多以Amsel診斷法為基本的臨床診斷方法，該方法雖診斷價值較高，但其重復性較差，臨床推廣有一定難度。有研究報道，陰道微生態評價系統能反映陰道微環境改變，在陰道感染檢測中有較為顯著的價值[2]。由此推測，陰道微生態評價系統在BV的診斷中或有一定價值。基于此，本研究旨在分析陰道微生態評價系統檢測陰道分泌物診斷BV的價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1—12月我院檢驗科收治的60例疑似BV患者作為研究對象，年齡22～40歲，平均(30.25±3.17)歲；體質量指數(body mass index，BMI)19～28 kg/m2，平均(23.07±1.26)kg/m2。本研究方案通過三明市第一醫院醫學倫理委員會審核批準。納入標準：待檢者均簽署知情同意書；精神及意識狀態正常，可高效配合研究；待檢者有外陰不適、分泌物量及性狀改變、分泌物有異味等癥狀；心、肝、腎功能正常；有性生活史。排除標準：處于月經期；在檢查前1周內有陰道用藥史；在檢查前3 d內使用過陰道潤滑劑、陰道灌液或進行性交。

1.2 方法

陰道微生態評價系統檢測方法具體如下。(1)取材：輕置未涂潤滑劑的無菌窺陰器暴露陰道，取材前先用1支棉拭子輕輕拭去取材部位堆積的膿液，然后用另2支棉拭子取陰道側壁上1/3的陰道分泌物。(2)涂片、固定：將其中1支拭子在玻片上滾動1周作為涂片標本，并將涂片干燥、固定。(3)染色：準備革蘭染色液，由珠海貝索生物技術有限公司提供，包括龍膽紫溶液、碘溶液、脫色液、蕃紅染色液，首先加龍膽紫溶液染色10 s后水洗，甩干，再加碘溶液染色10 s后水洗，甩干，之后應用脫色液脫色10 s后水洗，甩干，最后應用蕃紅染色液復染10 s后水洗，待自然干燥后使用OLYMPUS CX22 型生物顯微鏡實施鏡檢，查找線索細胞的同時在鏡下進行Nugent評分(0～3分為正常，4～6分為臨界范圍，7分及以上為BV)。(4)陰道微生態評價：從2～8 ℃的恒溫冰箱中取出試劑盒，將其恢復至室溫后使用，在軟試管中滴取4～6滴稀釋液，然后將另1支附著有陰道分泌物的棉拭子置于軟試管內的稀釋液中，將棉拭子反復旋轉3～4次，使所附著的分泌物充分釋放，最后將棉拭子頭部緊貼軟管壁使其吸附的液體流回試管，得到所需樣本，從鋁箔袋中取出反應裝置，用吸管吸取樣本液，在反應裝置的7個反應孔內(包括1個空白對照孔)每孔滴加1滴樣本液，然后在唾液酸酶反應孔中再滴加1滴顯色液，輕輕震搖反應裝置，1 min內對照比色卡的顯色情況記錄PH，將反應裝置放于37 ℃溫度下溫育10 min，在乙酰氨基葡萄糖苷酶反應孔中再滴加1滴終止液，在30 s至60 min內記錄顯色結果。(5)結果判讀：以空白對照孔為對照孔，根據比色卡顯示的顏色反應(比色卡標識，“-”為陰性、“±”為弱陽性、“+、++、+++”為陽性)判讀各孔反應后的結果得出是否存在BV，在完成陰道微生態評價后實施Amsel診斷法，并以此結果為金標準。

1.3 評價指標

(1)診斷價值：統計陰道微生態評價系統診斷BV的結果，以Amsel診斷法結果為金標準，分析陰道微生態評價系統診斷BV的價值，其中以a表示真陽性，以b表示假陰性，以c表示假陽性，以d表示真陰性，靈敏度=a/(a+c)×100%，特異度=d/(b+d)×100%，準確度=(a+d)/(a+b+c+d)×100%，陽性預測值=a/(a+b)×100%，陰性預測值=d/(c+d)×100%。(2)一致性分析：采用Kappa法進行一致性檢驗，分析陰道微生態評價系統診斷BV結果與Amsel診斷法結果的一致性。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 Amsel診斷法結果

經Amsel診斷法確診為BV的患者共43例。

2.2 陰道微生態評價系統診斷BV結果

陰道微生態評價系統診斷BV的準確度為91.67%(55/60)、靈敏度為93.02%(40/43)、特異度為88.23%(15/17)、陽性預測值為95.24%(40/42)、陰性預測值為83.33%(15/18)；經Kappa一致性度量，陰道微生態評價系統診斷BV結果和Amsel診斷法一致性較好(Kappa=0.798，P=0.000)，見表1。

表1 陰道微生態評價系統的診斷效果(例)

3 討論

在正常情況下，陰道內存在的微生物菌群和宿主之間是相互影響、相互制約的，處于動態平衡狀態，對維持陰道自凈作用及保持宿主健康發揮著重要作用。但當機體內外因素打破該種動態平衡的狀態時，會造成微生物在種類、數量、比例上出現變化，導致陰道微生態紊亂，使加特納菌、普氏菌及阿托波等厭氧菌侵襲并在陰道內大量繁殖，進而引起BV，嚴重降低患者的生命質量[3-4]。因此，應用快速、準確的方法診斷BV患者已成為臨床關注的重點。

Amsel診斷法是將臨床表現與實驗室檢查結果相結合的診斷方法，是診斷BV的金標準，但臨床普及具有一定難度，應用具有局限性[5]。當前，微生態評價系統逐漸用于各種陰道炎癥疾病的臨床診斷中，且取得了一定的效果[6]。本研究結果顯示，陰道微生態評價系統診斷BV的準確度、靈敏度、特異度、陽性預測值及陰性預測值均較高，且經Kappa一致性度量，陰道微生態評價系統診斷BV結果和Amsel診斷法一致性較好，表明陰道微生態評價系統能準確診斷BV。分析其原因為，陰道微生態評價系統是將Nugent革蘭染色評分法與干化學酶技術相結合的診斷系統，先根據陰道內菌種情況進行評分，然后根據酶解特異性底物顯色或添加顯色液顯色評估陰道微環境改變情況。若陰道分泌物中存在過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、β-葡萄糖醛酸酶、PH及乙酰氨基葡萄糖苷酶的變化，在相應底物作用下會呈現不同的顏色改變，并且呈現的顏色深淺與所含酶的濃度成正比[7-8]。其中的唾液酸苷酶是由加德納菌、普氏菌及阿托波菌等BV致病菌產生的特異性酶，僅在BV致病菌出現后才會大量產生。因此，檢測陰道分泌物中的唾液酸苷酶可了解陰道內BV致病菌定居及繁殖的情況。利用陰道微生態評價系統檢測陰道分泌物，當唾液酸苷酶孔呈陽性(顯示淡紅色、紅色或紫紅色)，且結合Nugent革蘭染色評分≥7分時可準確診斷BV。

綜上所述，陰道微生態評價系統能準確診斷BV，且與Amsel診斷法結果的一致性較好，診斷價值較高。