微柱凝膠免疫檢測技術(shù)與鹽水試管檢測技術(shù)在臨床輸血治療中的應(yīng)用

黃丹云

福州市長樂區(qū)醫(yī)院血庫 (福建福州 350200)

輸血作為臨床常見的治療方式，有助于快速補(bǔ)充患者的血容量，但若血液質(zhì)量差、血型不符，則易導(dǎo)致不良輸血反應(yīng)，降低治療安全性，進(jìn)而引起醫(yī)療糾紛，因此，在行輸血治療前，應(yīng)確保血液質(zhì)量及進(jìn)行血型鑒定，并應(yīng)嚴(yán)格配對(duì)，避免發(fā)生不良輸血反應(yīng)[1]。目前，臨床進(jìn)行血型鑒定及交叉配血常用的方法包括鹽水試管檢測技術(shù)與微柱凝膠免疫檢測技術(shù)[2]。基于此，本研究比較微柱凝膠免疫檢測技術(shù)與鹽水試管檢測技術(shù)在臨床輸血治療中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年5月至2020年5月我院收治的500例輸血患者作為研究對(duì)象，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組與試驗(yàn)組，每組250例。試驗(yàn)組男130例，女120例；年齡21～75歲，平均(37.10±8.70)歲。對(duì)照組男125例，女125例；年齡22～76歲，平均(36.90±9.03)歲。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合輸血治療適應(yīng)證；均了解研究目的，同意參與研究；病歷資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有精神疾病史；不配合研究。

1.2 方法

分別抽取患者及供血者清晨空腹靜脈血4～8 ml作為血液樣本，均分成2份，其中1份進(jìn)行血型鑒定，另1份進(jìn)行交叉配血。

試驗(yàn)組采用微柱凝膠免疫檢測技術(shù)進(jìn)行血型鑒定與交叉配血。(1)血型鑒定：選擇ABO正反定型、RhD血型定型試劑卡(由湘儀集團(tuán)提供)，在18～25 ℃條件下平衡30 min，使用長沙湘智離心機(jī)儀器有限公司提供的TG16WS離心機(jī)以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心2 min，確保外觀無氣泡、干膠和雜質(zhì)后緩慢撕膜待用；取患者與供血者血液樣本，經(jīng)抗凝處理后以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心10 min后取上層血清，在18～25 ℃條件下平衡30 min，防止冷凝集；然后分別加入適量0.9%氯化鈉注射液將患者與供血者血清樣本分別配置成濃度為0.5%的紅細(xì)胞懸液，外觀檢查呈均勻淡紅色，無血塊及絮狀物后待用；對(duì)ABO正反定型、RhD血型定型試劑卡做好標(biāo)記，分別為A、B、C、D、E、F，將濃度為0.5%的紅細(xì)胞懸液分別加入A、B、C、D管中，各50 μl，并將已知A型、B型的0.5%紅細(xì)胞懸液加入E、F凝膠微管中，各50 μl，然后以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心5 min后肉眼觀察血型鑒定結(jié)果。(2)交叉配血：對(duì)微柱凝膠卡[由強(qiáng)生(上海)醫(yī)療器材有限公司提供]做好標(biāo)記，并在凝膠微管上標(biāo)記主側(cè)與次側(cè)，在主側(cè)凝膠微管內(nèi)滴注50 μl供血者紅細(xì)胞懸液與25 μl患者血清樣本，在次側(cè)凝膠微管內(nèi)滴注25 μl供血者血清樣本與 50 μl患者紅細(xì)胞懸液，待操作完成后將其置于37 ℃下孵育，在孵育15 min后以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心9 min，然后進(jìn)行結(jié)果判定。

對(duì)照組采用鹽水試管檢測技術(shù)進(jìn)行血型鑒定與交叉配血。(1)血型鑒定：將所有血液樣本經(jīng)抗凝處理后以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心10 min后取上層血清，然后加入適量0.9%氯化鈉注射液將血清樣本配置成濃度0.5%的紅細(xì)胞懸液；取小試管2支，分別標(biāo)明A、B字樣，在A試管中加入A型標(biāo)準(zhǔn)血清與患者的紅細(xì)胞懸液各50 μl，在B試管中加入B型標(biāo)準(zhǔn)血清與患者的紅細(xì)胞懸液各50 μl，混勻后均以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心1 min；取出試管后用手指輕彈試管底，使沉淀物被彈起，在良好的光源下觀察結(jié)果。(2)交叉配血：采用聚凝胺法，將供血者與患者的血液樣本以1 000 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心10 min后取上層血清，加入適量0.9%氯化鈉注射液將血清樣本配置成濃度0.5%的紅細(xì)胞懸液；取2支微管，分別標(biāo)記為主側(cè)管和次側(cè)管，在主側(cè)管中滴注30 μl供血者紅細(xì)胞懸液與 50 μl患者血清樣本，在次側(cè)管中滴注50 μl供血者血清樣本與30 μl患者紅細(xì)胞懸液，然后每管再加入0.6 ml低離子介質(zhì)溶液后混勻，靜置1 min后每管再滴注2滴聚凝胺溶液(上海翊圣生物科技有限公司)，混勻后以1 300 r/min離心速率、15 cm離心半徑離心15 s后棄去上清液，然后輕搖試管，觀察有凝集后(若無凝集必須重做)取管底0.1 ml凝集液，并加入2滴重懸液，然后輕轉(zhuǎn)試管以混勻，肉眼觀察結(jié)果。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

(1)比較兩組正反定型符合情況：管內(nèi)紅細(xì)胞部分或全部與柱內(nèi)凝膠結(jié)合(試驗(yàn)組)或紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集(對(duì)照組)為陽性，管內(nèi)紅細(xì)胞完全沉積到微柱管尖底部(試驗(yàn)組)或呈散在游離狀態(tài)(對(duì)照組)為陰性；若正反定型均為陰性則表示正反定型相符，若正反定型出現(xiàn)任一陽性表示正反定型不符，正反定型符合時(shí)可進(jìn)行下一步交叉配血操作，正反定型不符時(shí)必須將標(biāo)本復(fù)查，并進(jìn)一步查明原因，獲得準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果。(2)比較兩組交叉配血結(jié)果：微柱凝膠法的判定標(biāo)準(zhǔn)，紅細(xì)胞沉積于凝膠微管底為匹配，紅細(xì)胞聚集于凝膠微管上、中部位為不匹配；聚凝胺法的判定標(biāo)準(zhǔn)，主側(cè)管及次側(cè)管內(nèi)紅細(xì)胞凝集在1 min內(nèi)散開屬于聚凝胺引起的非特異性凝集，表示患者與供血者血型匹配，紅細(xì)胞凝集不散開屬于異體抗體所引起的免疫性凝集，表示患者與供血者血型不匹配。(3)比較兩組輸血服務(wù)質(zhì)量(按照《臨床科室輸血質(zhì)量自查評(píng)分細(xì)則》進(jìn)行評(píng)定，0～100分，分值越高代表輸血服務(wù)質(zhì)量越高)及輸血意外事件發(fā)生情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組血型鑒定結(jié)果比較

兩組正反定型符合情況比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.145，P=0.703)，見表1。

表1 兩組血型鑒定結(jié)果比較[例(%)]

2.2 兩組交叉配血結(jié)果比較

試驗(yàn)組交叉配血成功率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 兩組交叉配血結(jié)果比較[例(%)]

2.3兩組輸血服務(wù)質(zhì)量及輸血意外事件發(fā)生情況比較

試驗(yàn)組輸血服務(wù)質(zhì)量評(píng)分高于對(duì)照組，輸血意外事件發(fā)生率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 兩組輸血服務(wù)質(zhì)量及輸血意外事件發(fā)生情況比較

3 討論

臨床急診急救中常采用輸血治療，可及時(shí)為患者補(bǔ)充血容量，避免由于血液流失過多導(dǎo)致的休克等意外事件，而于輸血前采取適宜的手段進(jìn)行準(zhǔn)確的血型鑒定及交叉配血非常必要[3]。

既往臨床多采用鹽水試管檢測技術(shù)進(jìn)行血型鑒定，采用聚凝胺法進(jìn)行交叉配血，結(jié)果易受藥物等因素的影響，無法滿足臨床實(shí)際需要[4]。隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，微柱凝膠免疫檢測技術(shù)被廣泛用于血型鑒定與交叉配血中。有研究表明，與傳統(tǒng)檢測方法相比，微柱凝膠免疫檢測具有檢測步驟簡便、準(zhǔn)確率和靈敏度高、自動(dòng)化程度和標(biāo)準(zhǔn)化高、輸血安全等優(yōu)點(diǎn)[5]。本研究結(jié)果顯示，兩組正反定型符合情況比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；試驗(yàn)組交叉配血成功率及輸血服務(wù)質(zhì)量評(píng)分均高于對(duì)照組，輸血意外事件發(fā)生率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。經(jīng)分析，其原因?yàn)椋⒅z免疫檢測技術(shù)是將抗原抗體反應(yīng)與凝膠過濾層析原理相結(jié)合的血型血清型檢測技術(shù)，其本質(zhì)是紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)，在進(jìn)行微柱凝膠免疫檢測時(shí)，在裝有超細(xì)凝膠介質(zhì)的凝膠微管中紅細(xì)胞和相應(yīng)抗體結(jié)合后可形成紅細(xì)胞凝集團(tuán)塊，在一定的離心作用力下，該凝集團(tuán)塊位于凝膠介質(zhì)表面或者中間，說明配血不合，而若血清中不含有針對(duì)紅細(xì)胞膜上血型抗原的抗體，紅細(xì)胞便不能和抗體結(jié)合，在同樣的離心作用力下，紅細(xì)胞可沉降到凝膠微管底部，說明配血成功；通過上述肉眼可見的紅細(xì)胞凝集反應(yīng)便可準(zhǔn)確判定患者與供血者的配血結(jié)果，利于提高交叉配血成功率，進(jìn)而保證臨床輸血安全性和有效性，對(duì)提升輸血服務(wù)質(zhì)量、減少輸血意外事件發(fā)生具有重要意義。

綜上所述，將微柱凝膠免疫檢測技術(shù)應(yīng)用于臨床輸血治療中，可提高交叉配血成功率及輸血服務(wù)質(zhì)量，減少輸血意外事件的發(fā)生。