流感病毒檢測知識以及冬春高發季如何做好預防

文 李娜（樂山市疾病預防控制中心）

流行性感冒病毒簡稱為流感病毒，是臨床上常見的急中性隸呼屬吸于道正傳黏染液性病疾毒病科。，流流感感病病毒毒在所病具毒有分的類遺學傳物質由8個大小不等的獨立單股負鏈RNA片段組成，總共編碼10個蛋白。

流感病毒易發生變異，其中又主要分為三種類型，分別為甲、乙、丙，甲型流感病毒相較于乙、丙更易發生抗原變異，同時會感染人及多種動物（蝙蝠、豬、馬、禽等），并且會引起大流行、中小流行。乙型流感病毒變異的幾率相對更小，病毒會感染人類，并引起局部爆發和小流行。丙型流感病毒較為穩定，可感染人類，大多數丙型流感病毒感染患者多為散發病例。對于流感病毒來說，在全世界都可能出現爆發流行，2003年冬-2004年春在亞洲地區廣泛流行的人禽流感突發公共衛生事件引起了極大的轟動，而一旦感染禽流感就急需在早期做出快速的實驗室診斷，鑒于此建立快速、有效、科學的診斷方式無論是對于病人自身還是對于社會來說都至關重要。

流感病毒檢測方式

病毒分離培養。病毒分離培養是目前臨床對流感病毒檢測的有效方式之一，由于流感病毒可以在雞胚中正常生長，因此早期常應用雞胚分離流感病毒，通常情況下采用9日齡-11日齡的雞胚，經由尿囊腔實施接種，對病毒進行有效分離，在成功接種實施后24-96h將雞胚中的尿囊液加以收集，24h內棄掉死亡的雞胚，用細胞培養液的血凝活性對病毒的增殖及存在做進一步探討、證實，如若初次無法正常分離病毒，可以盲傳2代再實施檢測。近些年來，隨著分子生物學技術的不斷發展、進步，在流感病毒檢測過程中發現雞胚分離出的流感病毒，其抗原性與原始采集標本存在一定的差異，而經由馬-達犬腎細胞分離病毒的抗原性則與原始采集標本大致相同。另外，馬-達犬腎細胞對“0”相毒株的敏感性相對于雞胚而言更高。因此，馬-達犬腎細胞已成為目前臨床上流感病毒分離中不可或缺的宿主系統之一，在臨床上被廣泛應用。馬-達犬腎細胞分離的病毒在部分國家尚未批準應用于疫苗的生產中，所以現今病毒分離工作依舊是同時應用馬-達犬腎細胞及雞胚兩套系統。但是無論是采用哪一種方式，都需要嚴格要求標本中病毒的采集、運輸以及保存工作，病毒樣品如若能在48h內實施分離，需在4℃的環境下保存，如若病毒樣品需要存放時間較長，則需要在低溫環境下凍存，溫度為-70℃，并且要求標本中病毒含量較高，必須達到馬-達犬腎細胞或是雞胚培養法所需病毒含量，病毒分離培養較為復雜，耗時不太穩定，并且在普通實驗室內不能進行，加上確診消耗時間長，所以對流感早期診斷意義不大。

血清學診斷。血清學診斷其檢測的內容主要為血清中的抗體水平。因甲型流感病毒顆粒表面HA蛋白具有一定的識別性，加上其吸附于紅細胞表面受體結構，HA蛋白抗體一旦有效結合HA蛋白受體，則會對HA蛋白及紅細胞受體結合形成干擾。基于這一實驗原理，臨床上針對甲型流感病毒鑒定主要以血細胞凝集抑制測定為主，血細胞凝集抑制法測定主要是應用已知流感病毒抗原對血清內抗體進行檢測。檢查取發病3d內及發病2-4周后兩份血清進行血凝抑制實驗，恢復期血清抗體效價相較于急性期高出4倍以上的為陽性，通常情況下，單份血清不能夠用于有效診斷。血清學診斷的意義在于利于流行病學調查及各個患者的回顧性診斷，對于流感病毒的早期診斷意義不大。

病毒抗原檢測。①酶免疫法：酶免疫法的基本原理主要是應用酶和抗體、抗原結合后，促使酶結合物形成，該檢測方式既可以不改變抗原免疫學活性，又能將酶本身所具有的酶學活性完整保留，而后再將酶相應底物加入，在酶的催化之下使原無色底物不斷水解、氧化，從而生成有色產物。②免疫熒光法：將患者鼻腔分泌物脫落細胞進行涂片，采用免疫熒光法監測可以對流感病毒抗原直接進行檢測。③免疫膠體金：現目前，臨床檢驗中應用的免疫膠體金技術主要分為膠體金快速免疫層析及快速斑點免疫滲濾法，也可以將其稱之為流感快速診斷試劑盒。

病毒核酸檢測。病毒核酸檢測的常用方式核酸雜交、多重逆轉錄-聚合酶鏈反應、逆轉錄-聚合酶鏈反應、定時定量、酶聯免疫PCR。PCR、熒光PCR、依賴性核酸序列擴增。近些年來，應用基因芯片對流感病毒實施檢測、分型是研究的熱點之一，該方式可以對多種病毒同時檢測，特別適用于流感病毒易變性及多亞型特征。但是這種檢測方式對于實驗條件具有較高的要求，核酸檢測的主要優點在于具有較高的特異性，并且檢測速度較快，方便操作。

流感病毒冬春高發季預防方式

最有效的預防流感方式為每年接種流感疫苗，不僅可以減少罹患流感的風險，還能避免發生并發癥。流感病毒基因易變異，針對這種情況應每年定期進行流感疫苗接種，除此之外，生活中應養成良好的呼吸道衛生習慣，日常勤洗手，避免觸摸口、鼻。另外，還需確保飲食均衡，保持充足的休息時間。

小結

以上便是流感病毒的相關檢測方式及日常預防方式，另外在春冬高發季還應注意避免到人群聚集場所長時間逗留。