細(xì)胞角蛋白5/6、P63蛋白、細(xì)胞角蛋白7、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1免疫組織化學(xué)染色指標(biāo)在非小細(xì)胞肺癌鑒別診斷中的應(yīng)用

李飛妹 王武明 趙 龍

1.江西省胸科醫(yī)院病理科，江西南昌 330000；2.江西省胸科醫(yī)院胸外科，江西南昌 330000

目前，肺癌已成為臨床中較為常見的一種惡性腫瘤類疾病，該病患者的臨床發(fā)病率與死亡率水平在我國始終居于首位[1]。肺癌的病理類型不同，其治療時所選擇的方法及對藥物的靈敏度也會存在一定差異。對肺癌疾病實(shí)施準(zhǔn)確的病理學(xué)分型可以為該病治療方案的確定及藥物的選擇提供更加可靠的依據(jù)[2-3]。采用經(jīng)皮肺穿刺活檢、經(jīng)纖維支氣管鏡活檢、刷檢等方式對肺癌疾病進(jìn)行檢查，標(biāo)本取材量少、組織擠壓壞死發(fā)生的可能性大，這使得病情的病理學(xué)分型存在較大困難，進(jìn)而使疾病的臨床診斷受到不利影響。因此，通過分子標(biāo)志物檢測方式對肺鱗癌和肺腺癌進(jìn)行準(zhǔn)確區(qū)分，可以為病情的診斷提供可靠依據(jù)[4-5]。本研究旨在探討非小細(xì)胞肺癌患者采用細(xì)胞角蛋白5/6、P63蛋白、細(xì)胞角蛋白7、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1 四項(xiàng)免疫組織化學(xué)染色指標(biāo)檢測方式對病情進(jìn)行鑒別診斷的臨床效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年10月至2020年10月在江西省胸科醫(yī)院治療后證實(shí)為非小細(xì)胞肺癌、慢性阻塞性肺疾病患者的肺部病變組織支氣管鏡活檢切片各40 例，再抽取上述肺病患者的肺部正常組織支氣管鏡活檢切片40 例，分別將其定義為研究1 組、研究2 組、對照組。研究1 組中，男31 例，女9 例；年齡42～76歲，平均（56.3±2.7）歲；患病時間1～13 個月，平均（4.1±0.5）個月。研究2 組中，男33 例，女7 例；年齡40～73歲，平均（56.0±2.5）歲；患病時間1～17 個月，平均（4.4±0.6）個月。兩組的一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。研究對象知情同意本研究，且經(jīng)過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合各自疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②病情穩(wěn)定；③自愿參與研究；④溝通理解能力正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在其他合并癥；②存在治療禁忌證；③病情危重。

1.2 方法

將標(biāo)本在濃度為10%的中性甲醛溶液中進(jìn)行固定，選擇石蠟實(shí)施包埋，然后進(jìn)行HE 染色處理。采用免疫組織化學(xué)染色法對三組研究對象的細(xì)胞角蛋白5/6、P63 蛋白、細(xì)胞角蛋白7、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1 四項(xiàng)指標(biāo)的陽性表達(dá)情況進(jìn)行測定，比較檢測結(jié)果。其中甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1 的陽性染色部位在細(xì)胞核當(dāng)中，細(xì)胞角蛋白7 陽性染色的部位在細(xì)胞膜/細(xì)胞漿當(dāng)中，P63 蛋白的陽性染色部位在細(xì)胞核上，細(xì)胞角蛋白5/6 的陽性染色部位在細(xì)胞膜/細(xì)胞漿。

1.3 陽性判定標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)胞核表現(xiàn)為棕黃色，可以認(rèn)定為甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1 陽性表達(dá)；細(xì)胞膜表現(xiàn)為棕黃色，可以認(rèn)定為細(xì)胞角蛋白7 陽性表達(dá)；細(xì)胞核表現(xiàn)為黃色，可以認(rèn)定為P63 蛋白陽性表達(dá)；細(xì)胞膜表現(xiàn)為黃色，可以認(rèn)定為細(xì)胞角蛋白5/6 陽性表達(dá)[6]。

1.4 觀察指標(biāo)

比較三組研究對象細(xì)胞角蛋白5/6、P63 蛋白、細(xì)胞角蛋白7、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1 四項(xiàng)指標(biāo)的陽性表達(dá)情況。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 18.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用頻數(shù)或百分率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

研究1 組的細(xì)胞角蛋白5/6、P63 蛋白、細(xì)胞角蛋白7、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1 四項(xiàng)指標(biāo)的陽性表達(dá)率高于研究2 組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；研究2 組的細(xì)胞角蛋白5/6、P63 蛋白、細(xì)胞角蛋白7、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1 四項(xiàng)指標(biāo)的陽性表達(dá)率高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）（表1）。

表1 三組研究對象細(xì)胞角蛋白5/6、P63 蛋白、細(xì)胞角蛋白7、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1 指標(biāo)陽性表達(dá)情況的比較[n（%）]

3 討論

臨床及相關(guān)領(lǐng)域的研究結(jié)果顯示，肺癌疾病的病理學(xué)類型和臨床治療及預(yù)后的關(guān)系非常密切，隨著近年來相關(guān)靶向治療藥物的不斷開發(fā)和廣泛利用，肺癌疾病的治療方法也在不斷增多并改進(jìn)。對肺癌患者的病情實(shí)施準(zhǔn)確的組織病理學(xué)分型十分重要，主要是由于病理學(xué)分型不僅僅屬于獨(dú)立預(yù)后因素的一種，同時還是決定治療方案及效果的一個關(guān)鍵[7-8]。就該病患者的預(yù)后而言，相關(guān)報道指出，非小細(xì)胞肺癌患者接受外科手術(shù)治療，Ⅰ期患者在5年內(nèi)的生存率水平可以達(dá)到57%～67%，Ⅱ期患者在5年內(nèi)的生存率水平可以達(dá)到39%～55%。鱗狀細(xì)胞癌與處于同期的腺癌相比較而言，預(yù)后效果往往更加理想[9-10]。采用經(jīng)皮肺穿刺活檢、經(jīng)纖維支氣管鏡活檢、刷檢等方式對肺癌疾病進(jìn)行檢查，標(biāo)本取材量少，組織擠壓壞死發(fā)生的可能性大，這使病情的病理學(xué)分型存在較大困難，進(jìn)而使疾病的臨床診斷受到不利影響。因此，通過分子標(biāo)志物檢測方式對肺鱗癌和肺腺癌進(jìn)行準(zhǔn)確的區(qū)分，可以為病情的診斷提供可靠的依據(jù)。就該類疾病的臨床治療方法而言，小細(xì)胞肺癌與非小細(xì)胞肺癌在治療方式方面存在著較大不同[11]。對小細(xì)胞肺癌患者進(jìn)行治療時，通常建議選擇全身化療和放療兩種方式；而手術(shù)及分子靶向治療則主要針對性非小細(xì)胞肺癌患者，可使疾病治愈機(jī)會和生存率水平明顯提高。所以當(dāng)組織分化程度相對較差的肺活檢的標(biāo)本鑒別存在較大困難時，免疫組化染色可以提供更加理想的幫助[12]。

目前，肺癌已經(jīng)成為臨床中較為常見的一種惡性腫瘤類疾病，該病患者的臨床發(fā)病率與死亡率水平在我國始終居于首位。肺癌的病理類型不同，其治療時所選擇的方法及對藥物的靈敏度也會存在一定差異。對肺癌疾病實(shí)施準(zhǔn)確的病理學(xué)分型可以為該病治療方案的確定及藥物的選擇提供更加可靠的依據(jù)。甲狀腺的轉(zhuǎn)錄因子1 屬于肺組織與甲狀腺存在特異性的一種分子標(biāo)志物，且甲狀腺的轉(zhuǎn)錄因子1 能夠?qū)μ幱谂咛ルA段的一些腦組織、甲狀腺、肺基因的表達(dá)進(jìn)行有效控制。甲狀腺的轉(zhuǎn)錄因子1 對肺組織可以產(chǎn)生特異性較高的表達(dá)，其已經(jīng)成為臨床對肺原發(fā)腺癌和轉(zhuǎn)移性腺癌進(jìn)行鑒別過程中較為常用的一種標(biāo)志物，且小細(xì)胞癌中甲狀腺的轉(zhuǎn)錄因子1 檢測結(jié)果往往顯示為陽性表達(dá)，這為疾病的病理學(xué)診斷提供重要線索[13]。在正常組織中，細(xì)胞角蛋白5/6 會在鱗狀上皮、導(dǎo)管上皮基底細(xì)胞、肌上皮細(xì)胞、間皮細(xì)胞的位置進(jìn)行表達(dá)，腺上皮位置的表達(dá)通常為陰性。因此，該項(xiàng)指標(biāo)對肺鱗癌進(jìn)行診斷的靈敏度和特異度水平較高。國內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域所進(jìn)行的研究結(jié)果顯示，細(xì)胞角蛋白5/6 在肺鱗癌中的靈敏度能夠達(dá)到70%～100%[14]。細(xì)胞角蛋白7 是分子量為54 kD 的一種堿性細(xì)胞角蛋白類物質(zhì)，在大多數(shù)正常組織的腺上皮和移行上皮位置分布。卵巢癌、乳腺癌、肺腺癌的細(xì)胞角蛋白7 檢測結(jié)果均會顯示陽性，而胃腸道腺癌、卵巢黏液性腺癌細(xì)胞角蛋白7 的檢測結(jié)果則通常為陰性。P63 蛋白屬于P53 家族中的1 個新成員，其可以在大多數(shù)的鱗狀細(xì)胞癌中進(jìn)行表達(dá)，為肺鱗狀細(xì)胞癌病情嚴(yán)重程度惡性進(jìn)展評估中的1 個非常重要的標(biāo)志物[15]。

本研究結(jié)果顯示，由40 例非小細(xì)胞肺癌患者組成的研究1 組的細(xì)胞角蛋白5/6、P63 蛋白、細(xì)胞角蛋白7、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1 四項(xiàng)指標(biāo)檢測的陽性表達(dá)率均在85%以上，高于由慢性阻塞性肺疾病患者組成的研究2 組，更高于健康肺組織組成的對照組，提示細(xì)胞角蛋白5/6、P63 蛋白、細(xì)胞角蛋白7、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1四項(xiàng)指標(biāo)檢測在非小細(xì)胞肺癌病情鑒別診斷和治療效果評價方面發(fā)揮重要作用。今后可以將其作為該病診斷的常規(guī)指標(biāo)在臨床中廣泛應(yīng)用，使更多患者的病情能夠在短時間內(nèi)確診，為其爭取更多的有效治療時間。

綜上所述，非小細(xì)胞肺癌患者采用細(xì)胞角蛋白5/6、P63 蛋白、細(xì)胞角蛋白7、甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子1 四項(xiàng)免疫組織化學(xué)染色指標(biāo)的陽性表達(dá)率高于慢性阻塞性肺疾病患者及健康人群，臨床中可以將其作為非小細(xì)胞肺癌患者病情篩查和診斷的重要依據(jù)。