組蛋白去乙酰化酶及去甲基化酶抑制劑在胃腸道腫瘤的研究進展

陳俊豪，丁杰，李顯，岑祥瑩，張林，吳明，樊斐，曾家興

【提要】 組蛋白甲基化及乙酰化修飾的平衡失調與多種腫瘤的發生、發展、侵襲、轉移密切相關，多種胃腸道腫瘤中發現組蛋白去乙酰化酶(HDAC)及組蛋白賴氨酸特異性去甲基酶1(LSD1)異常增高。相應的，一些組蛋白去乙酰化酶抑制劑(HDACi)和LSD1抑制劑已在胃腸道腫瘤的研究中取得進展，如異羥肟酸類HDACi在胃腸道抗腫瘤研究中取得良好療效，但因其特異選擇性低，易產生耐藥性和嚴重副作用，在臨床的進一步研究中受到限制；苯甲酰胺類HDACi在特異選擇性有所提高，并且能夠通過抑制腫瘤細胞分化、誘導免疫自噬、抑制細胞周期蛋白產生抑瘤作用，但其由于活性低而受到限制；環肽類HDACi特異性進一步增加，但只是出于研究的基礎階段。相應的，LSD1抑制劑，如苯環丙胺類、多肽類、小分子化合物抑制劑均在細胞層面有著良好的抑瘤作用，也在后期的整體實驗均顯示出耐藥性和嚴重副作用。這提示著單一的HDACi和LSD1抑制劑的抑瘤效應均不佳，由于HDAC常和LSD1形成復合體發揮轉錄調節作用，因此，雙靶點抑制劑可能是有效的，后期的雙靶點抑制劑，比如Duan YC等人報道了TCP和SAHA的組合產生的環戊二烯衍生物，Anastas JN報道的Corin，的確呈現出更加顯著的抑瘤成效，本文就HDAC、LSD1抑制劑及二者的雙重抑制劑在胃腸道腫瘤的研究進展進行綜述。

胃癌新發病例排在惡性腫瘤的第5位[1]，而結直腸癌是世界第三大惡性腫瘤和第四大癌癥死亡原因，且無論是發病例數還是死亡率均呈上升趨勢[2]。組蛋白乙酰化及甲基化修飾的失衡在腫瘤的發生與發展中起著重要的作用[3]，組蛋白去乙酰化酶(histonedeacetylase，HDAC)及組蛋白賴氨酸特異性去甲基酶1(lysine specific demethylase 1, LSD1)在胃癌[4-5]、結腸癌[6-7]中均存在異常高表達，組蛋白去乙酰化酶抑制劑(histone deacetylase inhibitor，HDACi)或LSD1抑制劑已被證實具有強效的單藥抗癌作用，但易產生耐藥性和嚴重副作用，常不能有效殺滅癌細胞。

由于HDAC和LSD1常形成復合體而發揮轉錄調節作用[8]，從2011年起，多項研究證實聯用HDAC和LSD1抑制劑致細胞凋亡的能力比單一用藥更強，但聯合用藥有時不能避免藥物的相互影響而帶來不良反應，科研工作者便結合藥效活性基團拼接理念設計合成的雙靶點抑制劑彌補了上述的不足，而且同樣顯示出優越的抑瘤成果。因此本文綜述了目前報道的LSD1、HDAC的抑制劑及其各自的作用機制，為雙靶點抑制劑的研究與開展提供基礎。

1 組蛋白去乙酰化酶抑制劑

HDAC將賴氨酸上的乙酰基去除，從而抑制基因轉錄。根據作用位置及活化中心將18個亞型的HDAC分為4類，Ⅰ類(HDAC1、2、3和8)分布在細胞核內，主要抑制基因的轉錄；Ⅱ類HDAC(HDAC4、5、6、7、9和10)分布在細胞質和細胞核中，其可能負責信息的傳遞，Ⅳ類同Ⅰ、Ⅱ相似，其功能均依賴于Zn2+，因此多數HDACi發揮作用的實質則是Zn2+鰲合基團，根據Zn2+鰲合基團的類型將HDACi分為三類：①異羥肟酸類，SAHA、TSA、Belinostat及panobinostat；②苯甲酰胺類，mocetinostat、chidamide、entinostat、LMK-235、MPT0G157；③環肽類，FK228，而Ⅲ類(Sirt l～7)其以NAD+為催化活性位點，與ADP核糖基轉移酶結合調節細胞的周期活動，不依賴于Zn2+，故上述三類HDACi對Ⅲ類HDAC無效[9]。

1.1 異羥肟酸類HDACi

異羥肟酸基團發揮作用的實質是依賴于Zn2+，所以此類抑制劑對I、II和Ⅳ類HDAC均有抑制效果，是研究較為透徹、應用較廣泛的一類廣譜HDACi。

1.1.1 伏立諾他(vorinostat,SAHA) SAHA屬于快速型HDACi，因其可直接在疏水通道的底部與Zn2+螯合基團結合，不需要大量的蛋白質重排和內部配體的氫鍵斷裂。

Lu H等[10]的研究證實，SAHA和MG132協同抑制胃癌MGC-803和MKN28細胞的增殖、糖酵解和線粒體氧化，誘導細胞周期停滯和凋亡，在胃癌異型種植模型鼠中，通過提高血清ALT和AST以及降低血紅蛋白水平、白細胞和中性粒細胞數量來抑制腫瘤的增殖和誘導凋亡。γH2ax是一種脫氧核糖核酸損傷的標記物，SAHA與阿霉素聯用顯著增強了胱天蛋白酶3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly-ADP ribose polymerase, PARP-1)的裂解，同時增加了γH2AX的磷酸化，還使腺苷酸依賴性蛋白激酶(AMPK)的Ser485磷酸化及其靶mTOR和下游核糖體蛋白S6磷酸化降低，最終使胃腺癌細胞對阿霉素的細胞毒性作用敏感[11]。

B7同系物1(B7 homolog 1, B7-H1)的過表達是胃癌免疫逃避的重要機制，干擾素γ(IFN-γ)被認為是B7-H1表達背后的主要驅動力，HDAC1/3表達水平與B7-H1顯著正相關，胃癌組織中B7-H1和HDAC1-3表達較高，SAHA使B7-H1基因啟動子組蛋白H3K9乙酰化水平的上調，抑制B7-H1表達，進而損害了干擾素-γ驅動的B7-H1調控的免疫逃逸，進而抑制腫瘤生長[5]。SAHA不僅能通過增加腫瘤細胞對化療藥物的敏感性及降低細胞的免疫逃逸，還能直接通過誘導細胞凋亡和周期停滯影響腫瘤的增殖。其實質是SAHA聯合地西他濱能顯著上調促凋亡蛋白Bax、p53和細胞色素c的蛋白表達及下調抗凋亡Bcl-2蛋白的表達，并增加前蛋白酶8和9的分裂[12]。紫外線輻射抗性相關基因(UVRAG)負責調節自噬的起始步驟和修復脫氧核糖核酸的損傷，用SAHA處理的結直腸癌細胞中，UVRAG表達增加，進而增強了脫氧核糖核酸損傷介導的細胞死亡和自噬的激活[13]。Ruzzolini J等[14]的研究證實，SAHA聯用碳酸酐酶抑制劑SLC-0111協同增加組蛋白H4和p53乙酰化水平，表現出更強的抑制結直腸癌細胞的活力和集落形成能力。

1.1.2 曲古菌素A(trichostatin-A, TSA) TSA與SAHA結構相似，同SAHA一樣，同樣TSA也能增加胃腺癌細胞對阿霉素的敏感性[12]。腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand, TRAIL)與受體(TRAIL-R/DR)結合后發揮誘導腫瘤細胞凋亡的作用，但一些癌細胞對TRAIL介導的凋亡產生了抵抗，Li L等[15]的研究發現TSA以胱天蛋白酶依賴的方式增強TRAIL的誘導胃癌細胞凋亡，此外，DR5的上調和抗凋亡蛋白(XIAP、Mcl-1和Bcl-2)的下調也協同了細胞凋亡。

結直腸癌細胞中丁酸氧化的減少，丁酸鹽的增多降低了調節短鏈脂肪酸氧化的短鏈酰基CoA脫氫酶的表達，進而降低了癌細胞自身的氧化，TSA能抑制丁酸鹽降解，進而影響結直腸癌細胞的氧化[16]。核苷轉運蛋白2(concentrative nucleoside transporter 2, CNT2)介導天然核苷和核苷類藥物的攝取，因此決定了核苷和核苷類抗癌藥物的療效，結直腸癌中，HDAC7顯著上調，導致組蛋白在CNT2啟動子區發生去乙酰化，進而降低了CNT2的表達并濃縮了染色質結構，在HCT15和HT29細胞中，TSA得應用逆轉了上述現象使細胞攝取核苷類抗癌藥物的量增加[17]。結直腸癌轉移復發和耐藥性是發病率和死亡率的主要原因。結腸癌起始細胞(colon cancer initiating cells, CCIC)被認為對這兩個過程都有貢獻。Sikandar S發現TSA損害CCIC克隆形成能力，導致細胞周期停滯和細胞死亡[18]。

1.1.3 貝利司他(PXD101, Belinostat)及帕比司他(LBH589, panobinostat) 人孕烷X受體(human pregnane X receptor, hPXR)的激活與化療耐藥性的誘導有關，hPXR拮抗劑是一種有效的腫瘤的治療藥物，Belinostat不僅抑制人結腸腺癌LS174T細胞中的hPXR基因及多藥耐藥蛋白1基因的表達，還抑制它們的蛋白活性，進而有效減輕人結腸腺癌細胞的化療耐藥性[19]。

LBH589對多種胃癌細胞、結腸癌細胞系均有高效的HDAC抑制活性，并能夠抑制細胞的增殖、侵襲、轉移能力。WNT/β-連環蛋白途徑的突變存在于大多數結直腸癌中，LBH589誘導具有這種突變的結直腸癌細胞凋亡[20]。116-LM細胞是結直腸癌HCT116細胞系產生的侵襲能力更高的轉移性細胞，116-LM細胞中YAP(Yes-associated protein)及其mRNA水平上調，YAP與EMT基因表達正相關，LBH589通過抑制YAP及其基因表達，進而使EMT標記的表達減少，阻礙116-LM細胞的遷移和侵襲[21]。

1.2 苯甲酰胺類HDACi

苯甲酰胺類是一類含有N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺藥效基團的新型HDACi，具有較強的HDAC選擇性，其活性基團發揮作用的靶點也是Zn2+。

1.2.1 mocetinostat(MGCD0103)及LMK-235(CS-1820) Sikandar S等[18]發現MGCD0103同TSA一樣顯著地損害CCIC克隆形成能力，抑制CCIC的活性，導致結直腸癌細胞周期停滯和細胞死亡，并且還顯著抑制非CCIC結直腸癌細胞異種移植物的形成。

LMK-235又名N-[[6-(羥基氨基)-6-氧代己基]氧基]-3,5-二甲基-苯甲酰胺，是HDAC4和HDAC5的選擇性抑制劑。CDX2與腫瘤轉移以及BRAF、錯配修復缺陷和CpG島甲基化表型負相關。Graule J等[22]通過染色質免疫沉淀發現結直腸癌SW620、COLO205細胞CDX2基因啟動子區的HDAC5高表達，進而大約20%的結直腸癌病例中CDX2低表達，而聯用LMK-235和地西他濱(脫氧核糖核酸甲基轉移酶抑制劑)能有效誘導CDX2的表達。

1.2.2 MPT0G157及恩替諾特(entinostat, MS-275) Huang YC等[23]報道的吲哚-3-乙基氨磺酰基苯丙烯酰胺化合物中N-羥基-3-{ 4-[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基)-乙基氨磺酰基]-苯基}-丙烯酰胺(MPT0G157)誘導的細胞凋亡和抑制HDACs活性比PXD101和SAHA更強。MPT0G157可增加熱休克蛋白90的乙酰化，促進缺氧誘導因子-1α降解，隨后下調血管內皮生長因子的表達，進而顯著抑制人結直腸癌HCT116細胞生長。

entinostat是一種HDAC1、2和3的抑制劑，免疫療法已在實體癌患者的亞群中顯示出臨床療效，使用能影響免疫系統不同分支和/或腫瘤微環境的藥物可能會增加臨床反應。NKG2D(natural killer group 2 member D, NKG2D)是NK細胞上活化受體之一，可激活NK細胞和T細胞，殺傷有NKG2D配體表達的腫瘤細胞，Entinostat通過上調NKG2D及其配體來增強對免疫細胞對結腸癌細胞的殺傷[24]。在顆粒酶B水平最低的情況下，IL-15超原細胞因子N-803加疫苗誘導外周CD8+T細胞活化和產生細胞因子的能力減弱，在加入entinostat后，腫瘤刺激相關基因的表達增加，顆粒酶B活化CD8+T細胞浸潤的能力及T細胞對多種腫瘤相關抗原的反應增強，而調節性T細胞及V結構域免疫球蛋白抑制因子表達減少，進而顯著地控制結腸癌細胞的生長和浸潤[7]。

1.2.3 西達本胺(chidamide) chidamide是我國自主研發的選擇性的HDAC1、2、3和10抑制劑，2017年被批準用于治療晚期外周T細胞淋巴瘤和乳腺癌的Ⅲ期臨床試驗。chidamide衍生物對人結腸癌細胞(HCT116)也表現出良好的抗增殖效應，且對人正常細胞基本無細胞毒性[25]。

在人結腸癌LoVo細胞異種移植物的裸鼠中，chidamide能夠提高組蛋白H3的乙酰化水平，上調裂解半胱天冬酶-3和多腺苷二磷酸核糖聚合酶的表達，增加了腫瘤細胞中p53、磷酸化p53、p21和γH2AX水平，抑制細胞周期蛋白依賴激酶4(CDK4)的表達，下調磷酸化AKT、mTOR、Raf和絲裂原活化蛋白激酶的表達，從而在細胞周期的G1期阻滯結腸癌細胞并促進凋亡；與5-氟尿嘧啶聯用后，能協同增強作用上述信號通路和抑瘤的能力[26]。

1.3 環肽類HDACi

1.3.1 羅米地辛(romidepsin, FK228)

2012年，美國FDA批準主要作用于I類HDAC的抑制劑FK228用于治療T細胞淋巴瘤，此藥物進入細胞內被谷胱甘肽還原活化后與活性位點zn2+相互作用，從而阻止HDAC與底物的結合。脫氧核糖核酸甲基轉移酶抑制劑5-Aza-CdR和FK228在處理細胞兩種胃癌細胞(SNU-638和SNU-719)都表現出協同效應，能夠抑制胃癌細胞的活力[27]。

1.4 其他類HDACi

NAD+依賴性蛋白脫乙酰酶SIRT1通過去乙酰化抑制p53功能，促進腫瘤生長，并且其表達增加與癌癥進展相關，β-萘酚(如sirtinol、cambinol)是有效的第Ⅲ類HDAC抑制劑，其能顯著誘導包括胃癌及結直腸癌在內的多種癌細胞的生長；Ghosh Ananga報道了一種基于喹喔啉的SIRT1抑制劑4bb，其表現出比sirtinol更有效的抑制作用。在體外，通過阻止p53去乙酰化、增加Bax表達和誘導胱天蛋白酶-3裂解誘導結腸癌細胞凋亡，而不影響正常胃細胞的生存能力[28]。

Dong J等[12]合成的化合物TC24，能夠選擇性地抑制HDAC6的活性，使胃癌細胞中的Bcl-2、cdc2和細胞周期蛋白B1降低誘導細胞周期停滯，使Bax和PARP分解增多誘導細胞凋亡，同時，TC24通過降低缺氧誘導因子-1α和血管內皮生長因子的表達抑制腫瘤血管生成，最終強烈抑制胃癌細胞的增殖，但對胃正常GES-1細胞沒有明顯的毒素作用。

HDAC8在結腸癌過度表達，Biswas Subhankar等人合成了槲皮素和3-羥基黃酮的類似物，其中，QMJ-2和QMJ-5對結腸癌HCT116細胞的HDAC8顯著抑制，并通過誘導激活胱天蛋白酶-3/7裂解促進細胞凋亡[29]。

RGFP966是HDAC3的特異性抑制劑，PCI34051是HDAC8的特異性抑制劑，RGFP966和PCI34051在干預結腸癌DLD-1細胞后增加了DR4的表達，而RGFP966在結腸癌WiDr細胞上誘導了更多的DR5表達，重組人可溶性腫瘤壞死因子相關誘導配體蛋白(recombinant human TNF-related apoptosis-inducing ligand, rhTRAIL)是基于TRAIL開發的蛋白類似物，rhTRAIL 4C7是其中的一種，RGFP966與rhTRAIL 4C7及脫氫表雄酮的聯合治療協同增加了結腸癌細胞凋亡[30]。

2 組蛋白賴氨酸特異性去甲基酶1

組蛋白賴氨酸甲基化(histone lysine methylation)是發生其N端H3和H4賴氨酸(K)殘基上的甲基化，在形成和維持異染色質的結構、DNA修復、染色質的失活和轉錄等方面起到作用。組蛋白賴氨酸甲基化過程主要由組蛋白賴氨酸甲基轉移酶和組蛋白賴氨酸去甲基化酶維持動態平衡。組蛋白賴氨酸去甲基化酶中的LSD1是一種黃素腺嘌呤二核苷酸(flavin adenine dinulcleotide, FAD)依賴的去甲基酶，能特異性地去除組蛋白H3K4和H3K9的單雙甲基化修飾，調控靶基因的表達，H3K4的甲基化與基因的激活有關，而H3K9的甲基化因年齡的不同表現出不同的作用[6,31]。

2.1 LSD1相關抑制劑

目前在消化道腫瘤中有研究的LSD1抑制劑有苯環丙胺類、多肽類、小分子化合物和其他類。

2.1.1 苯環丙胺類LSD1抑制劑 由于LSD1與單胺氧化酶(MAO)結構高度相似，因此MAO也被用于抑制LSD1。其中，不可逆性抑制劑包括苯環丙胺(tranylcypromine, TCP)、巴吉林(pargyline)、GSK2879552等，通過阻礙LSD1與FAD的共價結合從而抑制LSD1活性。我們課題組發現苯環丙胺可直接阻礙結腸癌SW260細胞的增殖與侵襲[32]。后期，我們課題組采用MTT細胞增殖實驗檢測巴吉林干預結腸癌SW620細胞后，在24 h、48 h、72 h時，各組細胞生長抑制明顯高于對照組。并且，Transwell實驗證實巴吉林處理SW620細胞后其侵襲性降低[33]。 Ferrari-Amorotti G等[34]利用苯環丙胺和細胞穿膜肽TAT-SNAG干擾LSD1與Slug的反應，減輕Slug依賴的E-鈣黏蛋白啟動子活性抑制，從而抑制了癌細胞的轉移。此外，單用苯環丙胺還能加強E-鈣黏蛋白啟動子活性，可能是內源性Slug蛋白受抑制所致。

結直腸癌中LSD1和tetraspanin 8 (TSPAN8)的基因水平明顯高于相應的鄰近非腫瘤組織，LSD1能降低TSPAN8啟動子上H3K9的甲基化，進而上調其表達，應用苯環丙胺能有效抑制LSD1和TSPAN8的表達，進而下調細胞的增殖和遷移[35]。反式-2-苯基環丙胺(trans-2-phenylcyclopropylamine, PCPA)是苯環丙胺的前藥，Ota Y團隊將PCPA和抗癌藥物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil, 5-FU)的結合形成綴合物，體外試驗證明，PCPA-5-FU綴合物1在抑制LSD1時釋放5-FU，抗癌藥物的功效增強，還減少了副作用，對結腸癌HCT116細胞具有抗增殖作用[36]。

通過將TCP與羥基苯甲酸連接，設計并合成了新型的雜化物15a、b和19a-l，均顯示出對LSD1高效的抑制能力，其中，化合物19a-l抑制活性明顯高于對其他的單胺氧化酶類抑制劑，并且還有較強的選擇性，此外，化合物19a-l在細胞水平上呈劑量依賴性地增加H3K4me2的表達，在體外選擇性抑制結腸細胞增殖，但不抑制非腫瘤結腸細胞[37]。

2.1.2 多胺、多肽類LSD1抑制劑 Huang Y等[38]發現的雙胍-聚胺類LSD1抑制劑中的化合物2d促進H3K4me1/2甲基化修飾，在1 μM時能顯著地抑制結腸癌HCT116細胞的增殖。多肽類LSD1抑制劑CBB1003能夠誘導β-catenin/TCF信號傳導通路失活，同時抑制LSD1及其富含亮氨酸重復序列的G蛋白偶聯受體(LGR)、c-Myc等表達，從而顯著抑制結直腸腫瘤細胞的增殖和集落形成[39]。Sun K等[40]人基于苯丙氨酰基鑒定了一系列的LSD1抑制劑，化合物4q是最有效的一種，化合物4q可誘導CD86和H3K4me2的積累，滅活LSD1抑制胃癌細胞增殖。

2.1.3 小分子化合物LSD1抑制劑 Ma LY等[41]設計并合成的一系列新型嘧啶-硫脲雜化物，并且此藥物無論是細胞實驗還是動物體內實驗均能有效地選擇性的抑制LSD1和顯著地抑制胃癌細胞的遷移和侵襲。

Wang S團隊基于[1,2,4]三唑并[1,5-a]嘧啶設計合成的化合物6I-m對LSD1表現出顯著的抑制，并且該化合物對胃癌MGC-803細胞比5-氟尿嘧啶更有效的生長抑制作用[42]。Zheng YC的團隊設計合成的1，2，3-三唑-二硫代氨基甲酸酯雜化物，其中化合物26在LSD1過度表達的胃癌MGC-803和HGC-27細胞中表現出最特異和最強的LSD1抑制作用，并呈現出強效的選擇性細胞毒性，顯著抑制細胞的遷移和侵襲[4]。而Sun XD的團隊構建的以三唑-二硫代氨基甲酸為支架的化合物，在中顯示出對LSD1的抑制作用，并通過逆轉上皮間質轉化抑制該MGC-803細胞遷移和侵襲[43]。

2.1.4 其他類LSD1抑制劑 DNA損傷誘導轉錄因子4(DNAdamage-inducibletranscript4, DDIT4)是LSD1的下游靶點，也是mTORC1抑制劑，Li Y團隊發現ZY0511通過抑制LSD1改變組蛋白H3K4啟動子甲基化水平上調DDIT4的表達，從而抑制mTORC1活性，最終顯著抑制小鼠體內結腸癌HCT116和HeLa異種移植物的生長[44]。

L05也被證實是一種有效的、選擇性的和可逆的LSD1抑制劑，并且顯示出對結腸直腸細胞遷移的顯著抑制[45]。Xi JY等[46]報道的一系列4-(4-芐氧基)苯氧基哌啶化合物，其化合物10 d在體外對LSD1表現出有效且可逆的抑制活性，并能抑制HCT-116結腸癌細胞的遷移。

3 LSD1/HDAC雙重抑制劑

Duan YC等[8]人報道了TCP和SAHA的組合產生的環戊二烯衍生物，其中化合物7對HDAC1/2表現出較強的抑制活性，IC 50值為0.81～5.48 mm，比SAHA (IC 50值為2.39～8.75 mm)更有效；并且化合物7能增加H3乙酰化和H3賴氨酸4/9甲基化，降低線粒體膜電位，并誘導胃癌細胞MGC-803和結腸癌SW-620細胞凋亡。

彌漫性橋腦膠質瘤的H3K27甲基化修飾常發生突變進行了CRISPR篩選，Anastas JN等[47]的研究證明敲除LSD1表達序列的DIPG細胞對HDACi敏感。Corin是基于巴吉林和MS-275合成的雙功能LSD1和HDAC抑制劑，其通過雙重抑制HDAC和LSD1的作用誘導彌漫性橋腦膠質瘤細胞死亡、細胞周期停滯和細胞分化表型，并驅動與DIPG患者存活時間延長相關的轉錄變化；同樣在對黑素瘤WM902B細胞中，相比與巴吉林和MS-275，濃度為1 mm的Corin可導致95%的增殖抑制，在異體種植的小鼠中，腹腔注射Corin 30 mg·kg-1·d-128 d后，其通過H3K4的乙酰化、H3K4二甲基化，進而使p21、CHOP和MXD1表達增加，Ki67表達降低抑制腫瘤的生長，其抑制率高達61%，并且無相關毒性[46]，但遺憾的是，此藥未在胃癌及結直腸癌上有所研究，不知是此藥物對結直腸癌效果不佳的原因的，還是研究者未開展在結腸癌細胞研究中。

4 總結與展望

綜上所述，在胃癌及結直腸癌中HDAC和LSD1抑制劑主要通過影響細胞因子信號、細胞周期、DNA損傷與修復，抗血管新生效應，誘導自噬及凋亡發揮抑癌作用。由于多數LSD1抑制劑發揮作用的機制是針對FAD，而大多的HDACi與Zn2+結合發揮作用的同時還能與其他金屬酶結合，因此兩者均缺乏絕對的特異性，所以導致藥物的細胞毒性大、不良反應多，如何挖掘和利用上述藥物，使作用最大化、最優化和最合理化，是一個急需破解的問題，無論是Duan YC等人報道了TCP和SAHA的組合產生的環戊二烯衍生物，還是Anastas JN報道的Corin，均證實雙靶點抑制劑比單一靶點抑制劑有著明顯的抑瘤高效性，同時還避免了單一用藥的副作用，這提示著雙靶點抑制劑可觀的優勢，似乎也提示著研究的突破口，基于雙靶點抑制劑的良好效能，我們可以預想的是雙重抑制劑甚至多靶點抑制劑在未來腫瘤的臨床應用前景將是光芒的，必將造福于人類健康。