徐州地區(qū)漸尖毛蕨孢子繁殖技術(shù)初探

韓 波， 高政平

(徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院， 江蘇 徐州 221006)

隨著生態(tài)文明建設(shè)的深入，需要大量優(yōu)新園林植物資源，特別是觀賞蕨類植物，已成為當(dāng)今風(fēng)景園林建設(shè)中的新寵兒。蕨類植物因其獨(dú)特的美化、綠化、彩化和凈化等功能，令人耳目一新的格調(diào)，受到人們越來越多的青睞和欣賞[1]。蕨類植物的孢子繁殖是一種快速繁育種苗的捷徑，它具有繁殖量大、成本低廉、簡單易行等諸多優(yōu)勢，是蕨類繁殖的最主要方式[2]。關(guān)于漸尖毛蕨的研究主要集中在孢子形態(tài)學(xué)特征、遺傳多樣性和配子體發(fā)育等方面[3]。本研究采用漸尖毛蕨孢子為試驗(yàn)材料，探索其孢子萌發(fā)因素、幼孢子體形成和孢子體幼苗后期生長發(fā)育，為進(jìn)一步開發(fā)徐州地區(qū)蕨類資源、探索適合蕨類植物人工繁殖和規(guī)模化生產(chǎn)提供理論依據(jù)和技術(shù)指導(dǎo)。

漸尖毛蕨(Cyclosorusacuminatus(Houtt.) Nakai)別名金星草、小葉鳳凰尾巴草、小水花蕨、牛肋巴、黑舒筋、舒筋草，為金星蕨科植物漸尖毛蕨的根莖或全草。株高0.8～1.5 m，根莖長而橫生，葉柄長0.3～0.6 m，深禾稈色，葉片厚紙質(zhì)，披針形，長0.6～1.0 m，寬0.15～0.3 m；羽片15～20對，互生，無柄，線狀披針形，先端漸尖，基部截形，羽狀淺裂至半裂。入藥有清熱解毒，祛風(fēng)除濕，健脾之功效。孢子深褐色，兩側(cè)對稱，單裂縫，極面觀為橢圓形，赤道面觀為半圓形，外壁具顆粒，周壁兩層，外層向外隆起形成孢子紋飾，呈雞冠狀[4]；孢子囊群圓形，背生于側(cè)脈中部稍上處，囊群蓋大，圓腎形，棕色，膜質(zhì)，最后卷縮，密生柔毛。

1 孢子的收集與保存

孢子采集時間為7—11月。剪取帶有外觀呈棕褐色孢子囊未開裂的孢子囊群的羽片，放于室內(nèi)，下鋪報(bào)紙進(jìn)行自然干燥，3～5 d孢子囊開裂，約1周后，輕輕拍打干燥后的孢子葉，使孢子自然散落，用硫酸紙收集孢子。置于冰箱2～4 ℃的條件下保存。

2 播前處理

2.1 孢子處理

將漸尖毛蕨孢子用濾紙包好，用棉線扎緊，先在75%的酒精中浸泡15～20 s，然后再放入5%NaClO溶液浸泡5～8 min殺菌、消毒，用無菌水反復(fù)沖洗3～5次。在無菌培養(yǎng)皿中小心打開紙包，用少量無菌水將濾紙上的孢子沖入培養(yǎng)皿中，再將孢子懸浮液倒入已高壓滅菌的三角燒瓶中，并用少量無菌水沖洗培養(yǎng)皿后一并倒入三角瓶，用封口膜封好三角瓶備用[5]。

2.2 土壤處理

2.2.1混合基質(zhì)

漸尖毛蕨在徐州地區(qū)最適宜培養(yǎng)的是營養(yǎng)土∶沙壤土=1∶1混合基質(zhì)。苗床長寬可以結(jié)合溫室大棚尺寸而定。為了保證肥料的長效供應(yīng)，床土施肥應(yīng)采取基肥為主、化肥為輔的原則，用量為有機(jī)肥30 t·hm-2，氮肥0.3 t·hm-2，磷肥0.35 t·hm-2，鉀肥0.1 t·hm-2。基質(zhì)要嚴(yán)格過篩、加濕。

2.2.2土壤殺菌殺蟲

1) 高溫消毒法。在夏季高溫時，用麥秸或稻草15 t·hm-2，鍘成5 cm長短，均勻撒在地面上，再用石灰0.3 t·hm-2均勻施撒，翻地、藻水、鋪膜，密閉大棚溫室15～20 d，當(dāng)土壤溫度提升至60～70 ℃時能有效殺死土壤中的病菌和線蟲[6]。

2) 藥液消毒法。用50%多菌靈可濕性粉劑，加50%辛硫磷乳油或5%阿維菌素、40%辛硫磷劑噴灑于土壤表層，經(jīng)翻耕、灌水、使藥液滲入土中，能有效殺死土壤中的病菌及蟲類。

3 播種孢子

3.1 適時播種

在溫室大棚中，一年四季均可以播種。結(jié)合徐州地區(qū)的環(huán)境條件，適宜的漸尖毛蕨孢子播種時間在3月上、中旬。

3.2 播種方法

將處理過的漸尖毛蕨孢子均勻地撒播在苗床上，用噴霧器噴透水后，及時蓋上薄膜。

4 養(yǎng)護(hù)管理

4.1 光照管理

春天播種后，溫室大棚上蓋遮陽網(wǎng)，透光率40%左右，5月初揭開大棚薄膜，遮陽網(wǎng)繼續(xù)蓋上，至11月中旬揭去遮陽網(wǎng)。

4.2 水分管理

播種后最初的一段時間不必澆水，1周后揭開薄膜，每天噴霧1～2次，再蓋上薄膜，保持空氣濕度70%～90%。特別在60 d左右原葉體轉(zhuǎn)幼孢子體期間，為有效促進(jìn)精子移動，務(wù)必保證基質(zhì)和原葉體表面濕潤，應(yīng)視濕度情況加強(qiáng)噴霧，保持空氣濕度80%～100%，滿足精卵結(jié)合所需要的水分條件。

4.3 移 植

孢子在適宜的條件下萌發(fā)生長為微小的配子體稱原葉體，一般需經(jīng)60 d左右成熟，當(dāng)原葉體直徑達(dá)0.3～0.5 cm時精子器和頸卵器發(fā)育成熟，精子器產(chǎn)生精子要以水為載體進(jìn)行運(yùn)動，以達(dá)到頸卵器與卵子結(jié)合完成受精過程形成合子，進(jìn)一步發(fā)育成胚，進(jìn)一步分化出蕨類植物的根、莖、葉。當(dāng)觀察到綠色原葉體，葉片2張，長度0.5 cm開始移植，移植前可以用竹簽在苗床做穴，尺寸為直徑0.8 cm、深0.5 cm，保持適宜穴距。移栽時用鑷子輕輕夾取根部帶土漸尖毛蕨孢子體，放置于每穴中央，輕壓覆土，保持漸尖毛蕨孢子體根系與苗床基質(zhì)充分接觸。移植后隨即用小孔噴霧器進(jìn)行噴霧，每天3次，保持空氣濕度≥80%、溫度25 ℃左右，及時覆蓋薄膜，適宜光照。小苗移栽后1周，為保證其快速生長，每周澆1～2次水，每2周噴施1次N、P、K三元復(fù)合肥(17-17-17)2 000倍液，保持環(huán)境通風(fēng)良好和充足光照。

4.4 病蟲草害防治

徐州地區(qū)漸尖毛蕨繁殖過程中主要的病害有赤霉病、白粉病、銹病，蟲害有蚜蟲、地下害蟲、介殼蟲，雜草有馬唐、稗草、狗尾草、千金子及部分尖葉雜草和闊葉類雜草。具體防治方法如下：赤霉病用50%多菌靈可濕性粉劑1.5 kg·hm-2加水噴霧；白粉病、銹病用12.5%禾果利可濕性粉劑0.3～0.45 kg·hm-2，或15%粉銹寧可濕性粉劑0.75～1.5 kg·hm-2加水噴霧，間隔7～10 d噴一次，連防2～3次。蚜蟲用40%氧樂果乳油1.5 kg·hm-2加水噴霧；地下害蟲用40%辛硫磷乳油0.75～1.5 kg·hm-2拌炒香的麥麩45～60 kg，于傍晚撒于地面；介殼蟲可采取釋放瓢蟲等捕食性天敵有效生物防治，也可選用低毒的選擇性殺蟲劑“邯科140”1 000倍液、毒死蜱600倍液等化學(xué)防治。禾本科雜草的馬唐、稗草、狗尾草、千金子等，用精喹禾靈300 mL·hm-2兌水15 kg均勻噴施；對于尖葉雜草和闊葉類雜草混雜，可以選擇甜菜安寧+高效氟吡甲禾靈。在使用除草劑時注意選擇晴朗無風(fēng)天氣、盡量避開中午高溫時段用藥，嚴(yán)格按使用說明進(jìn)行用藥，不可隨意增加或減少用藥量。