男性精液參數與胚胎染色體異常性流產的關系分析

張艷普，曹文麗，夏邦世，葉飛君，方建偉，蔣雁，貝佳露

精液分析是目前判斷男性生育力最基本和最主要的檢查方法，精液參數對診治男性不育有重要臨床意義[1]。影響男性精液參數的因素眾多，常見的如酒精、煙草、農藥甚至季節均會對其質量產生影響[2]，目前較多研究主要從精液質量影響因素入手，較少關于精液參數與胚胎染色體異常性流產關系的研究。胚胎染色體異常是第一代試管嬰兒（IVF）常見的流產誘發因素[3]，有相關研究數據顯示，胚胎染色體異常的流產率為10%～20%，通常發生在孕早期[4]。本研究旨在探討男性精液參數與胚胎染色體異常性流產的相關性，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2016年1月至2019年6月浙江省舟山市婦女兒童醫院收治的行常規IVF治療的不育男性患者249例，納入標準：（1）妊娠障礙原因單純為男方少、弱及畸形精子癥，男方精子濃度和活力及頂體酶活性符合常規IVF要求；（2）夫妻雙方年齡22～35歲；（3）雙方無吸煙、酗酒及其他不良生活習慣；（4）臨床資料完整無損。排除標準：（1）明顯外生殖器及輸精管異常者；（2）生殖系統感染者；（3）母體因素所致的流產者；（4）認知功能障礙及其他精神疾病者。

按妊娠結局分為正常妊娠（A組，134例）和胚胎染色體異常性流產（B組，115例），兩組年齡、配偶年齡、配偶基礎卵泡生成素（FSH）值、配偶高促性腺激素（Gn）時間及配偶體質量指數（BMI）差異均無統計學意義（均P＞0.05），有可比性，見表1。

表1 兩組一般資料比較

1.2 方法（1）男性患者禁欲2～7 d，采用手淫法收集精液標本，液化后進行常規檢查，嚴格按照《WHO人類精液檢查與處理實驗室手冊》（第5版）執行標準[5]。所有精液樣本采用西班牙Sperm Class Analyzer（SCA）系統進行濃度和活力計數，形態學評估精子涂片采用改良巴氏染色法，精子活率采用苯胺黑染色法。DNA碎片、核蛋白組型及頂體酶活性等采用商品試劑盒進行檢測。（2）女方使用長方案促排卵，在前次月經周期的第22天左右開始注射促性腺激素釋放激素激動劑，之后使用促排卵藥物，定期監測卵泡及雌激素水平，B超引導下經陰道取卵。（3）體外培養及受精后進行胚胎移植。受精后18 h觀察原核，出現2個原核和2個極體為正常受精，反之則受精失敗，選擇優質胚胎進行移植，移植后4～5周超聲檢查見胎心搏動為臨床妊娠，常規給予女方地屈孕酮等藥物口服。監測妊娠情況。

1.3 觀察指標（1）記錄體外培養及受精后兩組受精率、卵裂率、可利用胚胎率及優質胚胎率。（2）比較兩組男性處理前精液參數，包括精子濃度、精子活率、精子活力、精子正常形態率、頂體酶活性、精子-透明質酸結核率、DNA碎片率及核蛋白組異常型。

1.4 統計方法 數據采用SPSS19.0軟件分析，計量資料采用均數±標準差表示，采用 檢驗；計數資料采用2檢驗。＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 體外培養及受精數據比較 兩組受精率及卵裂率差異均無統計學意義（均＞0.05），B組可利用胚胎率和優質胚胎率均低于A組（均＜0.05），見表2。

表2 兩組體外培養及受精數據比較 例（%）

2.2 男性處理前精液參數比較 B組男性精子濃度、精子活率、精子正常形態率、頂體酶活性和精子-透明質酸結合率均低于A組，DNA碎片率、核蛋白組異常型均高于A組（均＜0.05），兩組男性精子活力差異無統計學意義（＞0.05），見表3。

表3 兩組男性處理前精液參數比較

3 討論

臨床較多生育障礙影響因素研究，主要集中在女性方面，如解剖學異常、內分泌紊亂及免疫因素等[6]。隨醫療技術的發展，越來越多學者關注到男性因素在異常流產中的影響因素。精液參數異常與較低的受精能力和潛在的DNA異常有關，特別是在單純形態畸形精子癥中。研究顯示[7]，精子異常形態率與自然流產、胚胎停止發育及胚胎畸形有密切關系，并指出畸形率高為影響妊娠的獨立危險因素。精液參數的檢測有助于預測妊娠質量，但目前該方面的研究暫缺乏足夠的臨床依據。

劉金皓等[8]通過對比不同男性精液質量對妊娠結局的影響，結果顯示精液參數正常且穩定的男性，妊娠結局較為理想，其參數與受精率、優胚率有密切關系。本研究結果顯示，兩組受精率及卵裂率差異均無統計學意義（均P＞0.05），B組可利用胚胎率和優質胚胎率均低于A組（均P＜0.05）。B組男性精子濃度、精子活率、精子正常形態率、頂體酶活性和精子-透明質酸結合率均低于A組，DNA碎片率、核蛋白組異常型均高于A組（均P＜0.05），兩組男性精子活力差異無統計學意義（P＞0.05）。說明男性精液參數一定程度上影響到妊娠質量，且與胚胎染色體異常性流產關系密切。劉闖等[9]研究顯示，精子畸形率越高，對受精率和活產率影響越顯著，因為精子形成過程中魚精蛋白PRM1/PRM2的比例發生改變，使精子形態及其他精液參數發生不良變化，影響受精過程和胚胎質量。研究表示[10]，精子DNA碎片的增加對輔助生殖結局會產生不良影響，導致胚胎質量下降，染色體異常性流產率增加。本研究結果提示臨床檢測男性精液參數對妊娠質量的預測有一定的指導作用，對部分精子活率低、精子正常形態占比小的男性需進行一定程度上的治療來提高精子質量，以提升妊娠成功率和優良率。

本研究發現，異常形態中以精子頂體功能偏低對受精率和優質胚胎率影響最為顯著，分析其原因在于頂體部位含有多種受精作用必須的水解酶，其完整性直接關系到精子能否通過卵外各層膜進入卵內完成受精[11]。且已有研究證實，精子頂體酶活性與精液濃度、正常形態密切相關，其減壓可作為評估精液質量的可靠指標[12]，表示此參數的異常同樣減少了優質胚胎率。提示臨床IVF治療時，對男性精液參數中精子頂體酶活性、完整性等功能性檢查有必要性，輔助評估其生育能力，以減少染色體異常性流產發生。

綜上所述，男性精液參數與胚胎染色體異常性流產關系密切，對預測妊娠結局有指導意義。