微生物實驗室的風險評估及風險控制措施

隨著科技的不斷發展和人們對高質量生活水平的需求增長，許多新興的產業和物種不斷產生，在滿足條件的同時一個隱形的殺手—生物安全問題日益凸顯。因此，微生物實驗室的風險評估和風險控制具有相當重要的意義。

為確保參與微生物實驗人員身體健康，環境不受污染，能夠正常開展微生物實驗，確保出具的數據準確、有效，需要對微生物實驗室所有實驗活動進行風險識別和分析評估，并提出相應的控制措施[1]。實驗室應建立并維持風險評估和風險控制程序，以持續進行危險識別、風險評估和實施必要的控制措施。

生物因子危害及風險控制措施

生物因子危害

實驗室使用的菌種基本包括大腸埃希氏菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、單核增生李斯特氏菌、銅綠假單胞菌、副溶血性弧菌、產氣莢膜梭菌、糞鏈球菌等，存在一定的風險，包括菌種保存不當、未按照規定要求進行菌株傳代、操作時菌液濺灑、廢棄物處理不當等。

風險控制措施

菌種保存不當：菌種保存應設置生物安全員專人負責保管，保存菌種的低溫冰箱設置雙人雙鎖。每次拿放菌種需要做相應的登記，由實驗室人員和生物安全員雙方簽字確認。

菌株傳代：菌株傳代應有完善的作業指導書和菌株傳代記錄，標準儲備菌株應在規定的時間內轉種傳代，并做相應的確認試驗，記錄相關原始數據存檔保存。

菌液濺灑：實驗室應具備防菌液濺灑措施，出現菌懸液濺灑時用消毒液進行處理，防止對人員和環境造成傷害和污染。

廢棄物處理不當：對于實驗室用過的帶菌的、污染過的培養基、試劑條、槍頭、接種環、玻璃器皿等廢棄物要采用相應的消毒劑滅菌或者121℃，30min 以上高溫高壓滅菌，廢棄物的處理應有相應的制度和廢棄物處置記錄。

人員風險及風險控制措施

人員風險由于微生物檢測人員專業知識欠缺，操作不規范導致實驗數據的不準確，甚至生物安全事故的發生。

風險控制措施參與微生物檢測的人員應具備微生物相關專業知識，學歷、工作經驗應符合檢驗檢測要求，實驗室人員應熟悉生物檢測安全操作知識和消毒滅菌知識。

生物安全柜風險及風險控制措施

生物安全柜[2]風險生物安全柜未按規定要求校準，參數不達標；未按照設備操作規程和使用說明進行操作維護可能使生物安全柜喪失功能，無法保證生物安全。

風險控制措施應設置專門的設備管理員負責設備的定期校準和維護；制作生物安全柜操作規程，由專業老師培訓指導，考核通過方可上崗作業。

高壓滅菌器風險及風險控制措施

高壓滅菌器風險高壓滅菌器未按規定要求校準，參數不達標，未按照設備操作規程和使用說明進行操作、維護，可能使滅菌效果降低或喪失。未定期做高壓滅菌器效果鑒定可能滅菌效果不達標導致滅菌不徹底，易引起空白長菌，樣品污染導致實驗失敗。高壓滅菌器內溫度過高，容易造成蒸汽燙傷。

風險控制措施設置專門的設備管理員負責設備的定期校準和維護。參加高壓滅菌器的專業培訓，持證上崗。

建立高壓滅菌器效果鑒定作業程序[3]，包括監測方法和監測頻率。并記錄相關數據。

化學法監測是指將滅菌指示條放入待滅菌的物品中，經一個滅菌周期后，顏色和性狀符合規定要求則為合格，反之則不合格。

培養后指示管不變色（呈紫色），表示滅菌通過。培養后指示管變色（呈黃色），表示滅菌不通過。同時培養的對照管應為陽性（呈黃色）。

待高壓滅菌器內壓力降至0、溫度降至規定要求再拿取物品，可帶上防高溫手袋避免燙傷。

電熱鼓風干燥箱風險及風險控制措施

電熱鼓風干燥箱風險滅菌時間不夠，滅菌不徹底可能導致培養皿污染空白長菌。高溫設備使用不當可能導致燒傷、燙傷等危害。

風險控制措施制作電熱鼓風干燥箱作業指導書，包含規范的操作流程和滅菌時間，避免安全事故的發生。

紫外燈風險及風險控制措施

紫外燈風險紫外燈未定期更換，超過使用壽命，可能導致滅菌效果不達標。操作時未關閉紫外燈，長期紫外燈光照可能導致操作人員皮膚受損。

風險控制措施完善紫外燈使用記錄，定期更換，加強人員監督力度。制作安全使用警示標識貼在紫外燈開關明顯位置，提醒操作人員，操作前關閉紫外燈。

生物安全實驗室風險及風險控制措施

生物安全實驗室風險布局不合理，無菌室、陽性對照室、培養間未獨立開可能造成交叉污染。未安裝壓差表，可能無法保證生物安全實驗室潔凈度。

風險控制措施生物安全實驗室[4]應設置無菌室、陽性對照室、培養間等功能間，能有效降低感染率。生物安全實驗室應安裝壓差表，通過壓力差控制氣流方向，保證生物安全實驗室潔凈度。

洗眼器風險及風險控制措施

洗眼器風險未安裝洗眼器，當發生有害物質噴濺眼睛或者面部時不能起到有效的保護措施。

風險控制措施在實驗室的適當位置安裝洗眼器，當發生有害物質噴濺眼睛或者面部時第一時間提供水沖洗，降低傷害。

培養基使用風險及風險控制措施

培養基使用風險培養基未按規定進行驗收，可能原料不合格導致菌種生長異常影響實驗結果；培養基未按要求的環境條件儲存，造成培養基受潮結塊可能影響產品質量；培養基未按標準要求滅菌，導致培養基滅菌不徹底或者營養物質受損影響菌種生長。

風險控制措施制作培養基驗收[5]記錄，包括外觀驗收、內容物檢查、產品質量指標驗收（包含所用的標準菌株的信息）；培養基、試劑應按照相應的儲存環境保存，并在儲存柜里放置溫濕度表，每天監測溫濕度變化，保證儲存環境符合培養基、試劑的儲存要求；培養基應按照規定的壓力、溫度、時間要求滅菌。

玻璃器皿、酒精燈風險及風險控制措施

玻璃器皿、酒精燈風險玻璃器皿破損，可能造成操作員手被劃傷；有裂紋的玻璃器皿高溫加熱可能炸裂造成安全事故。未規范使用酒精燈導致酒精濺灑遇明火燃燒造成火災。

風險控制措施避免使用有缺口的玻璃儀器、操作前檢查玻璃器皿有無破損裂紋。操作時注意安全，避免劃傷。加熱玻璃器皿時拿取應戴上隔熱手套。酒精燈的使用應注意酒精濺灑，一旦濺灑燃燒可用濕布撲滅。燈內酒精不易裝得太滿，避免外溢。

無菌室潔凈度風險及風險控制措施

無菌室潔凈度風險未定期做無菌室潔凈度驗證，潔凈度不達標，導致樣品污染。

風險控制措施制作無菌室潔凈度驗證作業指導書，包括驗證的方法及頻次并做好相應的記錄,定期做無菌室潔凈度驗證[6]，如大于所設定的風險值則應分析原因，并采取適當措施。

結論

生物安全問題已經受到普遍的關注，隨著科學技術的發展，越來越多的科學研究、醫療機構、企業生產等行業涉及到生物安全問題。微生物實驗室的風險評估和風險控制是一個持續進行的過程，以上分析的風險因素可能存在評估不全面、不到位、防控措施待改進等缺點，我們將在以后的評估中不斷完善改進。