江 斌 福建省農業科學院畜牧獸醫研究所 福州 350013
陳曉華 福州市華翔農業發展有限公司 福州 350503
雞滑液囊支原體病,又稱雞傳染性滑膜炎,是由雞滑液囊支原體(MS)引起雞和火雞的一種傳染病。該病廣泛分布于世界各地,并呈逐步上升趨勢,在我國各地養雞場中也存在不同程度感染,不僅造成雞只飼料利用率降低、生長發育受阻、病死率和淘汰率增加,而且還會導致產蛋雞和種雞產蛋率下降、蛋殼質量變差。目前該病已成為制約我國養雞業健康發展的一種重要疫病。該文就雞滑液囊支原體病的病原、流行特點、臨床癥狀、病理變化、診斷以及防治措施等進行綜述,以期為該病防控提供參考。
雞滑液囊支原體隸屬于支原體科支原體屬,大小為250~500 nm,無細胞壁,常呈球狀或球桿狀等多種形態,革蘭氏染色陰性,只有一個血清型[1],有學者采用VlhA 基因序列分析,將其分為A-I 共9 個基因型,其中引起呼吸道癥狀的基因型有C、E、F 和I 型,引起蛋殼異常和產蛋下降的基因型有E、F 和C 型,引起滑液囊炎癥的基因型主要是A 型[2]。滑液囊支原體可發酵葡萄糖、麥芽糖,產酸不產氣,不發酵乳糖、衛茅醇、楊苷和蕈糖。培養滑液囊支原體的培養基以改良Frey 為主,同時需添加一定的脂肪酸和膽固醇,37 ℃溫箱中培養3~10 d 后在培養基上可鏡檢到煎蛋狀的菌落,該菌落表面光滑、圓形、邊緣整齊、細小而透明,直徑為0.2~0.3 mm。滑液囊支原體必需依賴宿主組織(如呼吸道、氣囊、滑膜囊)才能存活,對外界環境抵抗力較差,離開雞體容易失去活力。該病原一般在pH 7.0~8.0 時生長較好,低于6.5 時會被抑制或死亡;對紫外線、高溫敏感;不耐干燥;對常規消毒劑敏感。
滑液囊支原體的自然宿主為雞、火雞和珍珠雞,而鴨、鵝、鴿子等禽類也會感染,哺乳動物不易感。各種日齡雞均可感染,日齡越小易感性越強,在臨床上急性感染的常見于4~16 周齡雞,表現消瘦、軟腳、關節腫大等。此外產蛋期的蛋雞和種雞還會持續慢性感染(隱性感染),主要表現產蛋率低下以及蛋殼質量差。該病的傳染源是患雞、隱性帶菌雞以及污染的環境。傳播途徑有水平傳播和垂直傳播,其中以經種蛋垂直傳播為主,水平傳播包括空氣氣溶膠傳播、密切接觸傳播以及經飲水、飼料、雞籠等接觸傳播。目前,國外養禽業發達國家和地區主要采取種源凈化來控制該病,并取得較好的凈化效果。目前我國種雞場滑液囊支原體病感染狀況比較嚴重,也造成商品代肉雞、蛋雞群感染率居高不下,據Xue 等[3](2017)調查表明,463 個雞場中有375 個場的MS 抗體陽性,陽性率達80.99%。
3.1 侵害滑膜或漿膜系統 滑液囊支原體通過自身蛋白與雞滑膜或漿膜系統(如氣囊、胸骨膜、關節膜)細胞表面受體結合,破壞正常滑膜或漿膜系統的完整,干擾正常細胞功能,并產生有毒物質侵入滑膜系統細胞內,致使細胞出現炎癥病變,從而導致雞體出現相應的關節腫大或胸骨囊腫等癥狀。
3.2 掠取宿主細胞營養 滑液囊支原體在雞體持續感染中,不斷從雞體細胞掠取大量營養物質作為其生長繁殖的前體,如維生素、氨基酸、膽固醇、脂肪酸等,致使患雞出現消瘦、衰竭、發育不良等癥狀。
3.3 逃避免疫應答 滑液囊支原體的可變脂蛋白和血凝素蛋白具有逃避宿主免疫應答的特性。滑液囊支原體感染雞體過程中會在轉錄水平上對血凝素蛋白的表達進行調控,嚴重干擾了雞體正常的免疫應答,從而達到免疫逃避。滑液囊支原體在雞體的滑膜或漿膜中持續感染后,相應的抗體無法進入滑膜或漿膜中去中和病原體,結果導致雞感染后呈現病原和抗體并存現象,同時也可解釋疫苗免疫對已感染雞無免疫保護作用。
3.4 影響蛋雞和種雞鈣的代謝 在滑液囊支原體感染的蛋雞和種雞中,母雞輸卵管和子宮的鈣物質代謝受影響,導致蛋殼強度顯著降低、蛋端變粗糙,對母雞產蛋性能也有較大影響[2]。
雞接觸感染后潛伏期為11~21 d,而對于經種蛋傳播的潛伏期會短些。感染后的小雞或青年雞初期表現為雞冠蒼白、跛行、精神不振、生長遲緩。隨著病情發展,患雞羽毛粗亂,排含大量尿酸鹽的黃綠色稀糞,體況進一步消瘦,軟腳明顯,有的出現跗關節著地或癱瘓,跗關節和跖關節腫脹明顯,胸骨突出,皮下水腫,嚴重者出現衰竭死亡,發病率10%~50%,死淘率10%~20%。有的病例還出現啰音、張口呼吸等呼吸道癥狀。產蛋或種雞開產后,相應的軟腳、關節腫大、胸骨囊腫癥狀會逐漸減少,但產蛋率上升緩慢,總體產蛋率偏低,此外所產雞蛋中約有2%~8%會出現白殼蛋、薄殼蛋以及蛋端異常等,影響雞蛋品質,時間會持續1~3 個月。
發病初期無明顯病變。中后期可見病死雞的跗關節、趾關節及腳墊腫脹明顯,切開腫脹部位會流出較多淡黃色膠凍樣黏液,胸部皮下水腫,胸骨滑液囊腫大。隨著病情加重,關節腫大更明顯,胸骨突出,關節和胸骨囊內出現干酪樣滲出物,有時在關節周圍的腱鞘與肌肉間也出現干酪樣物質。氣囊渾濁,嚴重時氣囊表面出現干酪樣滲出物。腎臟腫大且有大量尿酸鹽沉積。病死雞胴體消瘦。
6.1 病原分離 采集病死雞的咽喉拭子、氣管拭子、爪墊和關節滲出液、胸骨囊滲出液等采用改良的Frey 氏培養基加10%滅活血清及0.01%NAD 進行培養。一般來說,在發病早中期易于分離,而在發病中后期或持續帶菌期較難分離。所采集樣本需用干冰保存,并要求在24 h 內入實驗室進行培養。樣本要先在液體培養基中盲傳3~6 代后再轉接到固體培養基,培養5~7 d 后可在顯微鏡下觀察到煎蛋樣典型菌落。該方法分離周期長、培養條件要求高、分離難度大,一般適用于科學研究及疫苗生產,在疾病診斷中應用較少。
6.2 聚合酶鏈反應試驗(PCR)針對滑液囊支原體的16sRNA 建立的PCR 檢測方法以及針對滑液囊支原體血凝素基因建立的PCR 檢測技術具有敏感、特異、準確以及快速特點,在臨床上廣泛應用于滑液囊支原體病的診斷。
6.3 血清學診斷 常見的血清學診斷方法有平板凝集法(SPA)、酶聯吸附試驗(ELISA)以及血凝抑制試驗(HI)。SPA 法由于操作簡單、不需要專用儀器設備,在生產實踐中得到廣泛應用,但也易出現交叉反應、非特異性問題導致出現假陽性現象以及人為判斷誤差等缺點[5]。ELISA 法較為準確,目前應用較廣泛,但需要酶標儀設備。HI 法具有特異性和準確性優點,主要用于檢測血樣中IgG 抗體,但不適合早期診斷,同時目前市場上缺乏相應商業化抗原。針對血清學診斷,在生產實踐中需采集發病時及發病后(間隔15 d 以上)雙份血樣,并進行對比檢測。在發病后抗體滴度上升明顯或感染比例增加時,方能診斷該病。此外,血清學診斷所采集的血液樣本要求比較多(一般要求30 份以上)。
6.4 直接染色檢驗 無菌取病死雞關節腔滲出物涂片,姬姆薩氏染色后在油鏡下鏡檢,若檢出大量球形或球桿形紫色菌體及少量鏈狀排列的菌體也可診斷。此外,在顯微鏡下還可檢出大量白細胞及一些粉紅色網狀物質[5]。
7.1 種雞凈化 雞滑液囊支原體病的主要傳播途徑是經種蛋傳播。種雞場的疫病凈化是防控該病的首要措施。要做好凈化,確保所孵出的雞苗不帶菌,就必須從曾祖代種雞場開始,再到祖代和父母代種雞場,每個世代的種雞場都要做好種雞凈化工作。在種雞場凈化過程中,不允許種雞使用滑液囊支原體活疫苗或滅活疫苗,否則會干擾和影響種雞場的凈化檢測。一般來說,種雞場在開產前要抽取10%比例雞群的血樣進行SPA 法血清學檢測,要求所測樣本均為陰性,若有陽性樣本,則需全群逐只抽血檢測,并淘汰所有陽性雞和可疑雞只,之后每隔3 個月重復檢測,最終才可以確定為無MS 感染雞群。種雞凈化是一項費時費力費財的長遠工程,必需持之以恒。
7.2 生物安全措施 首先要加強雞群的飼養管理,降低飼養密度,加強舍內衛生消毒工作,特別強調雞舍、雞籠、用具的徹底消毒和干燥。其次,要采用"全進全出"飼養模式,避免不同日齡雞群混養,防止病原交叉感染。第三,雞群所采用的各類活疫苗均須是用SPF 雞胚研制的,防止雞場因疫苗污染MS 病原而造成雞群感染。
7.3 藥物防治 治療滑液囊支原體病的藥物很多,包括延胡索酸泰妙菌素、鹽酸沃尼妙林、酒石酸泰萬菌素、泰樂菌素、替米考星、鹽酸多西環素、土霉素、鹽酸大觀霉素、鹽酸四環素、恩諾沙星、硫酸卡那霉素、硫酸鏈霉素、氟苯尼考等,不同的雞場由于存在耐藥性不同呈現出對各種藥物的敏感性也有差異。目前在臨床上常見的治療方案有延胡索酸泰妙菌素+鹽酸多西環素、酒石酸泰萬菌素+鹽酸多西環素、恩諾沙星+替米考星等,治療5~7 d 為一個療程。盡管上述藥物對滑液囊支原體都有不同程度的殺滅效果,但這些藥物均不易通過血液循環到達氣囊、關節囊等靶器官,造成不能根除體內的滑液囊支原體。所以臨床上在該病高發期間每間隔20 d 需反復使用治療藥物3~4 個療程。對已出現明顯病癥的患雞(如軟腳、關節腫大)還需采用肌肉注射相應的治療藥物,如選用硫酸卡那霉素+轉移因子、鹽酸林可霉素+鹽酸大觀霉素、青霉素鈉+硫酸鏈霉素,每天注射1 針,連續注射2~3 d。隨著MS 耐藥性的不斷增加以及畜產品藥物殘留問題持續受到人們的關注,藥物治療在防治雞滑液囊支原體病上的應用越來越受到限制。
7.4 疫苗接種 疫苗接種是減少和預防雞滑液囊支原體病的有效方法。預防滑液囊支原體病的疫苗有2 類。一類是活疫苗,目前澳大利亞已研發出一種滑液囊支原體活疫苗,其安全性和有效性均得到證實,已在澳大利亞及我國部分場推廣應用,該疫苗主要用于商品肉雞和蛋雞,且要求在育雛早期使用,對已感染滑液囊支原體病的雞群效果不佳。另一類是滅活疫苗,目前國內外已研發出MS 的油佐劑滅活疫苗,該苗可用于商品肉雞、蛋雞及父母代種雞(非凈化場),理想的免疫程序是先免疫活疫苗,之后再免疫滅活疫苗,父母代種雞場開產前再用滅活疫苗加強免疫。對于已感染MS 雞只,免疫滅活疫苗的效果也不十分理想,但對阻止MS 的水平傳播以及改善產蛋雞生產性能和蛋殼質量有所幫助[2]。
目前,該病在我國廣大肉雞場和蛋雞場普遍存在,不僅會造成肉雞、后備蛋雞出現消瘦死亡,而且會導致蛋雞及種雞出現產蛋率低下、蛋殼質量變差等,對養禽業發展危害很大。防控雞滑液囊支原體病是一項長期而系統的工作,其中種雞凈化是根本,良好的飼養管理及生物安全措施是基礎,藥物治療是當下必不可少的措施,疫苗接種是重要的預防途徑。只有做好種源凈化、加強飼養管理、遵循科學的防治方法,才能有效地防控好雞滑液囊支原體病。