耐甲氧西林金黃色葡萄球菌致華南虎皮膚潰爛的診治

林錫潘 福建梅花山華南虎繁育研究所 福建龍巖 364000

金黃色葡萄球菌為直徑1 μm 的球狀細菌，常存在于呼吸系統及皮膚表面，屬革蘭氏陽性、溶血性、兼性厭氧菌，過氧化氫酶陽性，氧化酶陰性，可在15～45 ℃條件下生長，也可在15% 氯化鈉溶液中生長，會導致一系列化膿性感染、食物中毒及中毒休克綜合征，其化膿性感染可從輕微的皮膚性病變（如癤、癰等）發展成嚴重的繼發性炎癥感染（如肺炎、乳腺炎、靜脈炎、腦膜炎、泌尿系統炎癥等），并可感染到達組織臟器深部，引起骨髓炎、心內膜炎等[1]。

1 患虎基本情況

1.1 發病前個體情況 華南虎，雄性，2011 年6 月1 日出生，體重約130 kg。與母虎一起在半野化散放區共同生活，散放區面積約600 m2，樹木茂盛，光照較少，區內有人工虎穴、水渠。每天飼喂牛肉、解凍雞架6～7 kg。發病前采食和體表情況良好，與母虎有交配行為，無既往病史。

1.2 發病經過與治療情況 2019 年5 月中旬飼養員發現患虎鼻尖部和左臀部各有一塊皮膚潰爛，潰爛面周圍不規則，并有蹭網墻的撓癢行為，遂將患虎調回籠舍進行觀察治療。因患虎近期與母虎合區生活并有交配行為，懷疑患虎與母虎交配時，受母虎應激反應抓傷所致。5 月13 日采用磺胺間甲氧嘧啶鈉食物給藥，連續用藥5 d 后皮膚潰爛面擴大，左臀部皮膚潰爛處旁新增一處皮膚潰爛。5 月18 日改用3 g 青霉素鉀和2 g 硫酸鏈霉素溶解于12 mL 滅菌注射用水后吹針肌注，并向潰爛面噴灑消毒液（聚維酮碘、過氧乙酸等輪換使用），連續用藥5 d 后，3 處皮膚潰爛面逐漸擴大。5 月23 日改用抗真菌藥鹽酸特比萘芬溶液噴灑潰爛面，連續用藥5 d 后患虎原3 處皮膚潰爛面擴大更為嚴重，且右臀部新增3 處皮膚脫毛（見圖1）。至5 月29 日對患虎麻醉采樣時，鼻尖部潰爛面呈周圍不規則燈泡狀長20 mm×寬18 mm（見圖2），左臀部最早皮膚潰爛面呈周圍不規則等邊三角形底長60 mm×高65 mm（見圖3），檢查患虎體表無蜱蟲、虱子。

圖1

圖2

圖3

2 實驗室檢查

2.1 螨蟲檢查 刮取潰爛面與健康皮膚連接處皮膚組織鏡檢，未檢出螨蟲。

2.2 血液檢查 采集虎股內側隱靜脈血，用肝素鈉抗凝血做血常規檢查（見表1）；用非抗凝血分離血清做血清生化檢查（見表2）。血常規檢查結果表明，患虎單核細胞百分比顯著升高。血清生化檢查結果表明，患虎堿性磷酸酶顯著偏低，鈣離子降低，球蛋白略微升高。根據發病情況、實驗室檢查初診為患虎感染微生物致皮膚潰爛不愈合，且患虎近期營養不良（可能與近期用藥后采食情況較差有關）。

表1 血常規檢查結果

表2 血清生化檢查結果

2.3 細菌培養、鑒別、藥敏試驗與診斷 用醫用無菌一次性棉拭子采集兩處潰爛面分泌物數份，經細菌分離培養、顯微鏡檢查、細菌鑒別和藥敏試驗，確診為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌所致的皮膚潰爛。

2.3.1 細菌分離培養與鏡檢 將棉拭子放入含1 mL 生理鹽水的試管中進行反復攪拌，采用斜線平板劃線法在血平板上劃線，36.5 ℃培養24 h 后，見直徑2 mm 左右，淡黃色、邊緣整齊的圓形菌落，周圍有透明溶血環。對菌落涂片、革蘭氏染色后鏡檢，見紫色葡萄狀排列的球菌。根據細菌培養特征和鏡檢結果，疑似為金黃色葡萄球菌。

2.3.2 細菌鑒別 挑取分離培養的單個菌落在血瓊脂平板上劃線接種進行純培養后，再挑取單個菌落接種于胰酪胨大豆肉湯，36.5 ℃培養24 h 后，分別取0.5 mL 菌液和0.5 mL 25%新鮮兔血漿混合于新試管中，振蕩搖勻，36.5 ℃培養6 h 后，試管傾斜時出現凝塊，即血漿凝固酶試驗呈陽性。綜合細菌培養特征、鏡檢結果和血漿凝固酶試驗結果鑒定該細菌為金黃色葡萄球菌。

2.3.3 藥敏試驗 前期采用青霉素治療無效，推測該金黃色葡萄球菌有耐藥性，因此先采用紙片擴散法對該菌進行耐藥性測定。將待檢菌液均勻涂抹于MH 瓊脂平板，在平板中央處貼上苯唑西林（含藥量為1 μg）藥敏紙片，35 ℃培養24 h 后，苯唑西林抑菌圈直徑達到2 mm，由于判定標準為小于10 mm的抑菌圈代表有耐藥，因此將該菌初步鑒定為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌。同時進行多項藥敏試驗，氨芐西林、甲氧芐胺嘧啶、復方新諾明、阿莫西林、阿米卡星、鹽酸林可霉素、硫酸慶大霉素、替考拉寧、萬古霉素等均表現出對該菌的抑菌效果。

3 確定治療方案

根據藥敏試驗和血液檢查結果，以補充營養、抗菌消炎為治療原則，6 月6 日開始采用對患虎吹針肌注1.2 g 鹽酸林可霉素、24 萬U 硫酸慶大霉素、5 mL 復合維生素B，連用7 d，長期在食物中添加礦物質粉、維生素C；3 d 后患虎已無蹭墻網的撓癢行為；5 d 后皮膚潰爛處已無滲出液；7 d 后皮膚潰爛處開始結痂且潰爛面縮小；6 月21 日繼續對患虎吹針肌注1.2 g 鹽酸林可霉素、24 萬U 硫酸慶大霉素、5 mL 復合維生素B，連用7 d，皮膚潰爛處完全結痂。7 月6 日患部皮膚痊愈。

4 分析討論

4.1 感染耐藥菌的主要原因和控制建議 患虎發病前與母虎生活于一處散放區，2019 年4 月整月只有5 d 是晴天，其余都為雨霧天氣，散放區又地處深山，樹木茂盛，環境潮濕陰暗，光照嚴重不足，極有利于微生物生長繁殖，并導致動物免疫力降低，再結合患虎發病前的交配行為。患虎可能是長期在光照不足的環境中生活，免疫力低下，又在交配時被母虎過激反應抓傷，環境中的致病菌通過傷口感染機體。而母虎在同樣環境未發病，可能是因為母虎體質較好且沒有外傷缺少感染途徑，在發病前就已調離病區。華南虎是我國特有虎種，國家一級保護動物，大型猛獸。該虎未曾進行進夾籠行為訓練，獸醫不能直接觸診和靜脈給藥，因此在針對華南虎藥物保健預防上，常采取廣譜性抗生素進行預防、藥物診斷和治療。此次診療過程就是藥物診斷治療無效后轉為實驗室診斷治療。患虎發病初期皮膚潰爛面積小，根據飼養員的報告懷疑為外傷所致普通感染，開始采用食物給藥磺胺間甲氧嘧啶鈉抗菌消炎，治療后病情漸進發展，懷疑用藥途徑和方向有誤；改用吹針肌注青霉素、硫酸鏈霉素和對傷口噴灑消毒液，治療后病情加重，2 次抗生素用藥無效后，懷疑患虎感染真菌、寄生蟲、耐藥菌、病毒等；遂先對患虎傷口噴灑抗真菌藥物鹽酸特比萘芬溶液，治療后病情繼續加重不受控制，遂決定將患虎麻醉后進行體表寄生蟲檢查，同時采集血液、皮膚潰爛面滲出液、潰爛皮膚與健康皮膚連接處組織等進行實驗室診斷，經過實驗室檢查確診為感染耐甲氧西林金黃色葡萄球菌，根據藥敏試驗和血液生理生化數據制定治療方案，患虎痊愈。

有科學研究表明，由耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染引起的動物性皮膚病與既往不正規用藥有密切關系[4]，感染是微生物與宿主免疫系統相互作用的結果，在采用抗生素治療的同時，也應配合一些免疫調節藥物制劑，或中西獸醫結合治療，減少抗生素使用，從而減少抗生素耐藥性的產生[5]。

4.2 使用消毒劑殺滅環境耐藥性細菌 患虎出現耐藥性細菌感染，應做好患病動物的隔離和飼養場地環境消毒，避免耐藥菌株向人畜傳播感染。如同反復使用抗生素會產生細菌耐藥性一樣，在長時間接觸同一類消毒劑，細菌也會對該類消毒劑產生抗性[6]，所以在日常消毒上要勤換不同種類的消毒劑。每月逢5 號輪換使用戊二醛、猛多力、次氯酸鈉、聚維酮碘、次氯酸鈉、過氧乙酸等消毒劑消毒籠舍和用石灰每半年消毒散放區后，至發稿時未發現類似病例。