男男性行為HIV感染者發生病毒耐藥性變異相關危險因素研究

馬艷麗，李 鴻，周 永，郭 磊，陳 鵬

（青島市第六人民醫院，山東 青島 266033）

HIV 也就是艾滋病，從相關數據信息來看，HIV 感染患者的數量在逐年增加，而性傳播是國內HIV 患者的主要感染方式，尤其是男男性行為中的傳播率更高[1]。HIV 有著較高的病死率隨著HIV 感染者的治療時間增加，在一定程度上會使得病毒耐藥性變異，大大降低治療效果水平，增加了患者的死亡風險[2]。文中對男男性行為HIV 感染者發生病毒耐藥性變異相關危險因素進行了簡要分析，希望可以為抗HIV 藥物研發提供一點幫助。

1 資料與方法

1.1 一般資料

按照感染途徑將選擇2018年12月到2019年12月期間青島市第六人民醫院感染科收治的100 例男男性行為HIV 感染者設置為觀察組，將100 例其他途徑HIV 感染者設置為對照組，觀察組：100 例，14-56 歲，平均年齡為（35.68±6.32）歲；對照組：100 例，15-57 歲，平均年齡為（35.41±6.21）歲。

1.2 方法

1.2.1 問卷調查方面

運用自制調查問卷了解男男性行為感染者基本人口學特征情況（包括年齡、職業、婚姻狀況、文化程度、經濟狀況、確診感染時間、感染途徑、治療費用來源、家庭住址、聯系方式等信息）、行為狀況（包括感染前后性行為狀況、與同性/異性發生性行為情況、尋找性伴方式、固定/偶遇/商業性伴數量、性伴的感染和治療情況、物質濫用情況、安全套使用情況等）；運用CPCRA 問卷了解患者服藥情況（包括服藥方式、服藥劑量、藥物不良反應情況、依從性教育情況、影響服藥依從性的其他信息等）、抗病毒治療情況（包括治療方案及更換的治療方案、高效抗逆轉錄病毒治療開始及持續時間）；運用SAS 問卷、SDS 問卷、BHSS 問卷了解患者心理狀況（焦慮、抑郁、羞恥等程度）；運用體質指數(BMI)等了解患者體能狀況；運用WHOQOL-HIV-Brief 生存質量調查表了解患者生存質量情況；運用社會支持評定量表了解患者社會支持狀況。

1.2.2 實驗室檢測方面

外周血檢測：對外周血淋巴細胞計數、病毒載量、機會性感染情況（如：梅毒、肝炎、結核等）以及其他血液常規生化指標（白細胞、血小板、血紅蛋白、血肌酐、血尿素氮等）進行檢測分析；運用流式細胞儀檢測淋巴細胞計數，使用HIV 病毒載量檢測試劑盒及讀數儀檢測HIV 病毒載量。HIV 基因型耐藥檢測：先將外周血淋巴細胞(PBMCs)及血漿進行分離操作，將分離出來的PBMCs 及血漿貯存于-80℃冰箱備用；提取血漿中HIV 病毒RNA，巢式PCR 擴增HIV pol 基因區約1300bp 的目的片段（包括蛋白酶基因全長和逆轉錄酶基因前300 個氨基酸）；擴增引物：第一輪PCR：外側上游引物：5'-TTGGAAATGTGGAAAGGAAGGAC-3' HXB2 2028-2050；外側下游引物：5' -CTGTATTTCTGCTATTAAGTCTTTTGATGGG-3'HXB2 3509-3539；第二輪PCR：內側上游引物：5'-CAGAGCCAACAGCCCCACCA-3' HXB2 2147-2166；內側下游引物：5'-CTGCCAGTTCTAGCTCTGCTTC-3' HXB2 3441-3462；PCR 產物與標準Marker 對照鑒定為目標片段后進行純化及基因測序。陽性檢測：對病毒載量較低的感染者運用超速離心富集濃縮樣本的方法進行血漿中HIV 病毒RNA 的提取，取6ml 標本分裝于3 支2ml 離心管中，每管2ml，在4℃、24600 g 條件下離心l 小時，移去離心管上清液，留底部濃縮液約150μl；充分振蕩混勻后，收集合并各管濃縮液；并用移去的上清液調整終體積至2ml，制備成3 倍超濃縮標本，其他倍數的超濃縮操作依此步驟進行。檢測分析：獲得的序列用Contig Express 拼接后用BioEdit 軟件整理，Blast 鑒定基因序列亞型，Mega 軟件構建系統進化樹；并將整理好的序列提交斯坦福HIV 耐藥變異數據庫(http://hivdb.stanford.edu/hiv/)進行獲得性耐藥的檢測分析。

1.3 統計學方法

所有問卷調查信息用Epidata3.1 軟件雙人錄入，用SAS9.2 軟件建立數據集并進行基本統計分析。

2 結果

2.1 個人與社會影響因素

兩組患者社會支持評定量表、行為評分量表、合理用藥檢查評分表、心理評定量表、健康狀況評價量表、生活質量評定量表的相關信息經過分析后，社會支持：B 值為2.362、SE值為1.032、Wald 值為2.320、OR 值為1.240、P 值為0.082、95%CI 值為1.021-1.022；行為狀況：B 值為1.981、SE 值為1.114、Wald 值為2.023、OR 值為1.195、P 值為0.000、95%CI值為1.473-1.065；用藥情況：B 值為1.989、SE 值為1.033、Wald 值為1.998、OR 值為1.033、P 值為0.008、95%CI 值為1.652-1.147；心理狀況：B 值為2.541、SE 值為1.211、Wald 值為2.874、OR 值為1.356、P 值為0.014、95%CI 值為1.087-1.241；身體狀況：B 值為2.332、SE 值為1.322、Wald 值為1.985、OR 值 為1.365、P 值 為0.110、95%CI 值 為1.332-1.044；生存質量：B 值為2.360、SE 值為1.354、Wald 值為2.748、OR 值 為1.369、P 值 為0.121、95%CI 值 為1.471-1.251。可以看出HIV 患者會受到用藥情況、心理狀況、行為狀況的影響而使得耐藥性變異情況出現（P<0.05）。

2.2 細胞變化因素

兩組患者相關信息經過分析后，淋巴細胞：B 值為2.974、SE 值為1.652、Wald 值為2.854、OR 值為1.414、P 值為0.216、95%CI 值為1.362-1.215；病毒載量：B 值為2.747、SE值為1.541、Wald 值為2.584、OR 值為1.154、P 值為0.127、95%CI 值為1.478-1.521；血常規檢測：B 值為2.362、SE 值為1.587、Wald 值為2.358、OR 值為1.841、P 值為0.301、95%CI值為1.542-1.652；機會性感染：B 值為2.361、SE 值為1.582、Wald 值為2.363、OR 值為1.254、P 值為0.132、95%CI 值為1.464-1.361；擴增pol 基因：B 值為2.870、SE 值為1.473、Wald 值為2.314、OR 值為1.556、P 值為0.095、95%CI 值為1.365-1.854。可以看出HIV 患者耐藥性變異與淋巴細胞、病毒載量、血常規檢測、機會性感染、擴增pol 基因等因素無關（P>0.05）。

3 討論

由于國內免費抗病毒治療的推廣發展，HIV 感染患者逐漸接受抗病毒治療，但是很多患者在治療的過程中都發生了耐藥性情況，在很大程度上提升了患者發病幾率與死亡率，大大增加了艾滋病的治療難度[3]。

HIV 病毒進入人體后，會對人體免疫系統產生攻擊，嚴重的情況下還會引發惡性腫瘤，導致患者死亡。HIV 主要發生在青壯年群體中，隨著病情發展，患者還會出現皰疹、淤血斑、咳嗽、氣促、呼吸困難、持續性腹瀉等情況，大大降低患者生活質量與生命質量[4]。從國內目前HIV 傳播情況來看，主要是以男男性行為進行傳播的，而目前針對HIV 患者最有效的治療就是抗病毒治療，但是相關研究表明，很多HIV 患者在治療過程中經常會出現耐藥性變異，不能有效控制患者病情發展，尤其是男男性行為患者在治療過程中容易將耐藥毒株擴散給他人，如果可以找出影響男男性行為感染者發生病毒耐藥性變異相關危險因素，就可以在很大程度上促進HIV 治療研究發展。

從文中研究活動來看，男男性行為HIV 感染者發生病毒耐藥性變異情況，可能會受到藥情況、心理狀況、行為狀況等因素的影響。所以，相關研究人員在分析男男性行為感染者發生病毒耐藥性變異相關危險因素時，可以從患者的受到藥情況、心理狀況、行為狀況等情況入手，進而改進相關的抗病毒治療方案，降低患者病死率，減少HIV 對我國社會公共安全的危害[5]。