1例肌鈣蛋白I測定假性增高的分析及處理*

吳勇東，王元彬，曾 慧

廣東省深圳市康寧醫(yī)院/廣東省深圳市精神衛(wèi)生中心：1.檢驗科；2.精神科，廣東深圳 518000

目前，檢測肌鈣蛋白I(cTnI)的方法有多種，其中微粒子化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)因其高特異度、高靈敏度、高準確性、高穩(wěn)定性而被廣泛使用。工作中常常遇到肌鈣蛋白測定值與患者臨床表現(xiàn)、心電圖結果甚至臨床診斷不相符的情況，其主要由檢測過程中的干擾因素、生理因素及非急性冠狀動脈綜合癥因素3個方面所致[1 ]。本文就微粒子化學發(fā)光法檢測cTnI結果因受非特異反應干擾出現(xiàn)假性增高的情況進行分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 患者，女，21歲，因雙相情感障礙收入本院治療。既往史：否認肝炎、心臟病史，否認高血壓、糖尿病等慢性病史，否認手術、創(chuàng)傷、輸血史。無化學性物質、放射性物質、有毒物質接觸史，無吸毒史，無吸煙、飲酒史，無冶游史。無婚育史。否認家族性遺傳病、傳染病史。相關檢查：腹部彩超示，(1)肝回聲不均，考慮脂肪肝；(2)膽囊、膽管、脾臟、胰腺未見明顯異常聲像。因胸痛查心電圖提示“竇性心律、T波異常。”

1.2儀器與試劑 微粒子化學發(fā)光法采用進口全自動化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)及其原廠配套的試劑盒、定標液。生化指標檢測采用日立全自動生化分析儀7600，英科新創(chuàng)試劑盒及配套的定標液，美康生物試劑盒及配套的定標液。質控品：均采用英國朗道質控品。所用試劑、定標液及質控品均在有效期內使用。

1.3方法 真空采血管按要求定量采血檢測血常規(guī)、生化各項指標、心臟標志物及傳染病相關指標，采血后立即送檢，標本接收后經(jīng)3 500 r/min，離心5 min取血清檢測，無溶血、乳糜及黃疸等。開機質控在控，批量進行標本檢測。

2 結 果

微粒子化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)檢測心臟標志物兩項，cTnI結果為0.57 ng/mL(參考范圍<0.04 ng/mL),肌紅蛋白(MYO)結果為7.7 ng/mL(參考范圍<65.8 ng/mL),cTnI結果已超過廣東省深圳市康寧醫(yī)院制訂的危急值(>0.10 ng/mL)。日立生化分析儀7600檢測生化各項指標，其中心肌酶3項，包括肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶-MB(CK-MB)、乳酸脫氫酶(LDH)均在正常參考范圍內，其他結果均無明顯異常。分離血清，重新離心，復查cTnI結果為0.58 ng/mL,MYO結果為7.8 ng/mL，兩次結果無明顯變化。與臨床溝通后，6 h后重新送檢患者心臟標志物兩項，檢測cTnI結果為0.56 ng/mL,MYO結果為8.7 ng/mL，結果均無明顯變化。綜合患者臨床表現(xiàn)、后期24 h動態(tài)心電圖正常、心肌酶3項和MYO結果均不支持患者心肌炎、早期心肌損傷的診斷。為了明確診斷，將患者標本外送至其他實驗室檢測cTnI，結果為<0.01 ng/mL(免疫熒光法，參考范圍：<0.01 ng/mL)，與患者臨床實際情況相符。綜合分析，本實驗室微粒子化學發(fā)光免疫分析檢測系統(tǒng)檢測cTnI結果為假性增高。

在試劑廠家協(xié)助下，將患者標本寄送至試劑廠家處理機構進行調查實驗。該機構對標本在檢測cTnI過程中進行干擾實驗，在未添加阻斷劑的情況下，cTnI測試結果確認顯示是高值。在測試中進行如下阻斷劑添加的實驗，阻斷劑包括堿性磷酸酶突變蛋白(AP-Mutein)、嗜異性抗體阻斷劑(HBR-1)、小鼠免疫球蛋白G(Mouse IgG)和山羊免疫球蛋白G(Goat IgG)等。當標本被添加了AP-Mutein、Mouse IgG 和Goat IgG后，所測得的cTnI水平與未添加的時候相比幾乎沒有下降，而添加了HBR-1的標本的測試結果則下降了許多，干擾實驗證實標本中存在人源性干擾。該患者標本cTnI檢測受到嗜異性抗體的干擾導致結果假性增高，檢測結果應為正常，與患者臨床表現(xiàn)及其他相關檢查結果一致。

3 討 論

急性心肌梗死是冠狀動脈病變后血供急劇減少或中斷，心肌嚴重、持久缺血導致的急性心肌壞死，嚴重威脅患者生命，早期診斷、及時治療是降低患者病死率和改善預后的關鍵[2]。cTnI為心肌的一種特有成分，在健康人群血液中水平極低，幾乎無法被檢測到，但當心肌受到損傷時cTnI便會在血液中得到釋放[3]。cTnI是公認診斷急性心肌梗死的“金標準”，也是獨立于心電圖之外可用于判斷梗死灶范圍大小及預后的重要血清學指標。因此，cTnI檢測的準確性尤其重要，測定結果無論出現(xiàn)假性增高或假陰性都會影響診斷，耽誤患者的治療。

眾所周知，微粒子化學發(fā)光法基于抗原抗體反應的原理，存在著非特異反應干擾的可能性。經(jīng)常與動物有接觸或者使用過免疫球蛋白或免疫球蛋白碎片進行免疫治療或診斷步驟的患者，可能會產生抗體，如人抗小鼠抗體，該抗體會干擾免疫測定。此外，其他的嗜異性抗體，如人抗山羊抗體，可能會存在于患者的標本內，正如本文cTnI檢測結果為假性增高被證實是由患者標本內嗜異性抗體的干擾所致。

2012年12月，本實驗室引進了微粒子化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)進行心臟標志物的檢測，偶爾會出現(xiàn)由于標本因素造成cTnI檢測結果假性增高的情況，如標本里含有纖維蛋白，肉眼不能發(fā)現(xiàn)，導致cTnI檢測結果出現(xiàn)假性增高，而檢測過程中因嗜異性抗體干擾而導致測定結果假性增高的情況很少見且不容易發(fā)現(xiàn)。當心電圖無明顯異常或心電圖改變不足以診斷急性心肌梗死，且肌鈣蛋白僅略高于參考范圍上限時，可1～3 h后復查肌鈣蛋白，若相鄰兩個時間點的檢測值的變化<20%,可基本排除急性心肌梗死等急性心肌損傷；若變化≥20%,結合臨床表現(xiàn),可考慮非ST段抬高型心肌梗死的診斷[4]。此例患者cTnI水平明顯升高，而其他心肌酶指標正常，心電圖結果無明顯異常，相鄰兩個時間點復查cTnI結果亦無明顯變化，可基本排除急性心肌梗死等急性心肌損傷。檢驗科醫(yī)生與臨床醫(yī)生之間的溝通尤其重要，合理解釋cTnI檢測結果存在假性增高情況的不確定因素，醫(yī)生需參照該患者的整體臨床情況，包括：癥狀、病史、臨床檢查、心電圖及由其他測試所得的數(shù)據(jù)和其他相應的信息，不應僅憑單個cTnI測定結果就做出診斷。如有必要，可以對cTnI結果準確性作進一步驗證或者委托其他實驗室進行復查。因此，本實驗室管理制度規(guī)定一旦發(fā)現(xiàn)cTnI檢測結果增高或者難以解釋的結果，應通過分離血清，重新離心，復查標本以排除標本因素引起的假性增高，加強與臨床醫(yī)生溝通，了解患者既往史，分析患者初次胸痛發(fā)作后不同時間段cTnI檢測結果之間的變化是否跟心肌損傷后血液中cTnI的水平變化一致,對于與臨床表現(xiàn)不相符的cTnI測定結果，必須盡快將標本送至本院坪山院區(qū)使用其他方法學儀器進行復查，盡早發(fā)現(xiàn)并糾正假性增高的結果。