河南農(nóng)村成年男性和絕經(jīng)女性血清黃體酮濃度與肥胖的關(guān)聯(lián)性分析

劉月婷，黃金嬌，孫家琦，劉 歡，劉道瀚，聶璐婷，毛振興，霍文倩

1)鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生學(xué)教研室 鄭州 450001 2)鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院衛(wèi)生統(tǒng)計學(xué)教研室 鄭州 450001

肥胖是一種多因素引起的慢性代謝性疾病，在全球廣泛流行且患病率呈現(xiàn)快速上升趨勢。我國成人肥胖率由2006年的8.4%增長到2015年的14.5%[1]。在資源有限的農(nóng)村地區(qū)，也存在同樣的肥胖流行趨勢[2]。肥胖是心血管疾病、糖尿病、腫瘤等眾多慢性病的重要危險因素，其不僅增加慢性病死亡風(fēng)險，還會顯著提高社會的疾病負(fù)擔(dān)[3]。目前有多種指標(biāo)可對肥胖進(jìn)行衡量，如BMI、腰圍(waist circumference,WC)、腰臀比(waist-to-hip ratio,WHR)和腰身比(waist-to-height ratio,WHtR)等[4]。女性體內(nèi)黃體酮濃度與月經(jīng)周期及絕經(jīng)狀態(tài)有關(guān)，男性體內(nèi)的黃體酮主要是由腎上腺產(chǎn)生。黃體酮可與脂肪組織中的黃體酮受體結(jié)合，通過直接調(diào)節(jié)脂蛋白脂肪酶，引起脂質(zhì)儲存和脂肪組織積累[5]。然而，針對男性和女性體內(nèi)黃體酮水平與肥胖關(guān)聯(lián)性的流行病學(xué)研究結(jié)果存在差異。Esfahlan等[6]和Clark等[7]發(fā)現(xiàn)孕酮和醋酸甲羥孕酮的使用與肥胖呈正相關(guān)，而Blanchette等[8]和Goh等[9]則報告黃體酮水平與男性和孕婦的肥胖呈負(fù)相關(guān)。本研究運用橫斷面研究，排除體內(nèi)孕激素濃度受月經(jīng)周期和激素藥物影響的人群，以4 862名來自河南農(nóng)村隊列的、體內(nèi)天然黃體酮濃度較穩(wěn)定的絕經(jīng)女性與成年男性對調(diào)查對象，分析血清黃體酮濃度與不同肥胖指標(biāo)(BMI、WC、WHR和WHtR)的關(guān)聯(lián)性，為肥胖的早發(fā)現(xiàn)、早干預(yù)以及早預(yù)防提供科學(xué)依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象研究對象均來自河南農(nóng)村隊列研究(注冊號ChiCTR-OOC-15006699)中2016年駐馬店市遂平縣的基線人群(n=6 670)。研究對象的納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡18～79歲；男性或絕經(jīng)女性；河南農(nóng)村常住人口；能夠規(guī)范地簽署知情同意書；本人或其家人朋友能準(zhǔn)確提供信息，并且能確保信息的完整性和真實性。排除血清標(biāo)本缺失者、血清量不足以檢測孕激素者、激素替代療法參與者。共納入4 862名研究對象，其中男2 574人，女2 288人。該研究獲鄭州大學(xué)生命科學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，調(diào)查前被調(diào)查者均簽署了知情同意書。

1.2 研究對象一般信息采集由經(jīng)過統(tǒng)一培訓(xùn)的調(diào)查員通過面對面訪談采集。問卷調(diào)查內(nèi)容包括人口學(xué)特征、行為因素、飲食習(xí)慣、經(jīng)濟狀況、疾病史與家族史、女性的月經(jīng)與生育史等。其中文化程度分為從未上學(xué)、小學(xué)、初中及以上?；橐鰻顩r分為結(jié)婚/同居、其他(喪偶/離婚/分居/未婚)。人均月收入分為<500、500～、≥1 000 元。目前吸煙指至少每天吸1支煙且維持狀態(tài)半年以上。目前飲酒指最近1 a內(nèi)飲酒超過12次。較多蔬菜水果攝入指攝入的蔬菜水果總量≥500 g/d。高脂飲食指食用紅肉和白肉(不包含魚肉)總量≥75 g/d。體力活動按照國際體力活動量表[10]分為輕、中、重3種程度。

1.3 血清黃體酮濃度的測定研究對象空腹至少8 h后，抽取靜脈血，在調(diào)查現(xiàn)場進(jìn)行離心分裝，包括全血、血清、血細(xì)胞、血漿、白細(xì)胞，于-80 ℃冰箱儲存待測。將150 μL血清分裝至1.5 mL EP管中，-80 ℃冰箱中保存待測。在融化后的血清中加入700 μL乙腈和45 μL混合同位素內(nèi)標(biāo)(黃體酮-D9)，振蕩器振蕩7 min使蛋白充分沉淀，4 ℃、12 000 r/min 離心 7 min，取上清置于1.5 mL EP管中，使用氮吹儀揮干溶劑與水，再加入150 μL體積分?jǐn)?shù)50%甲醇復(fù)溶，2 000 r/min振蕩7 min，4 ℃、12 000 r/min離心7 min，取上清置于250 μL進(jìn)樣瓶中。采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測樣品中黃體酮濃度。以來源隊列人群血清黃體酮濃度的三分位數(shù)為界，將血清黃體酮水平分為低(T1)、中(T2)、高(T3)3級。

1.4 肥胖指標(biāo)的測量及肥胖判定標(biāo)準(zhǔn)測量身高、體重、WC、臀圍，靜息血壓、心率等。計算BMI、WHR、WHtR。BMI≥28.0 kg/m2，男性WC≥90 cm/女性WC≥80 cm，男性WHR≥90%/女性WHR≥85%，WHtR≥50%；滿足任一項，即可視為肥胖[11-14]。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS 21.0與SAS 9.1完成數(shù)據(jù)分析。采用線性回歸模型評價血清黃體酮濃度與肥胖指標(biāo)(BMI、WC、WHR、WHtR)之間的關(guān)聯(lián)性。采用Logistic回歸模型評價血清黃體酮濃度與肥胖之間的關(guān)聯(lián)性。繪制限制性立方樣條圖，分析血清黃體酮濃度與肥胖指標(biāo)的劑量反應(yīng)關(guān)系。檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 研究對象的一般信息見表1。

表1 研究對象的一般信息

2.2 研究對象血清黃體酮濃度和肥胖指標(biāo)測量結(jié)果見表2。

表2 研究對象血清黃體酮濃度和肥胖指標(biāo)測量結(jié)果

2.3 河南農(nóng)村成年男性和絕經(jīng)女性血清黃體酮濃度與肥胖指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性分析以不同肥胖指標(biāo)為因變量，分別以血清黃體酮濃度和血清黃體酮水平(低、中、高)為自變量，按照不調(diào)整混雜因素(模型1)，調(diào)整年齡、文化程度、婚姻狀況、人均月收入、吸煙情況、飲酒情況、較多蔬菜水果攝入、高脂飲食、體力活動(模型2)，建立線性回歸模型。結(jié)果(表3)顯示，河南農(nóng)村成年男性和絕經(jīng)女性血清黃體酮濃度與不同肥胖指標(biāo)(BMI、WC、WHR、WHtR)均正關(guān)聯(lián)。

表3 河南農(nóng)村成年男性和絕經(jīng)女性血清黃體酮濃度與不同肥胖指標(biāo)關(guān)聯(lián)性分析的線性回歸系數(shù)β(95%CI)

2.4 河南農(nóng)村成年男性和絕經(jīng)女性血清黃體酮濃度與肥胖的關(guān)聯(lián)性分析以不同肥胖指標(biāo)定義的肥胖為因變量，分別以血清黃體酮濃度和血清黃體酮水平(低、中、高)為自變量，按照不調(diào)整和調(diào)整混雜因素(同2.3)建立Logistic回歸模型。結(jié)果(表4)顯示，河南農(nóng)村成年男性和絕經(jīng)女性血清黃體酮濃度與由BMI、WC、WHR、WHtR定義的肥胖風(fēng)險相關(guān)，T3人群肥胖發(fā)生風(fēng)險高于T1人群。

表4 河南農(nóng)村成年男性和絕經(jīng)女性血清黃體酮濃度與肥胖關(guān)聯(lián)性分析的Logistic回歸的OR(95%CI)

2.5 河南農(nóng)村成年男性和絕經(jīng)女性血清黃體酮濃度與肥胖風(fēng)險的劑量反應(yīng)關(guān)系以上、下四分位數(shù)及中位數(shù)為節(jié)點，各段函數(shù)中X按照一次方納入，繪制的限制性立方樣條圖見圖1。對于男性，無論肥胖是由何種指標(biāo)定義，血清黃體酮濃度與肥胖存在劑量反應(yīng)關(guān)系。對于女性，只有當(dāng)肥胖由WHtR定義時，血清黃體酮濃度與肥胖才存在線性劑量反應(yīng)關(guān)系。

圖1 河南農(nóng)村成年男性(上排)和絕經(jīng)女性(下排)血清黃體酮濃度與肥胖的劑量反應(yīng)關(guān)系

3 討論

本研究結(jié)果顯示，在河南農(nóng)村人群中，成年男性和絕經(jīng)女性人群的BMI、WC、WHR和WHtR隨著血清黃體酮濃度的升高而增大，多個指標(biāo)定義的肥胖風(fēng)險與血清黃體酮濃度升高相關(guān)聯(lián)，在調(diào)整多種混雜因素如年齡、文化程度、婚姻狀況等后，該關(guān)聯(lián)依舊存在。

黃體酮作為主要的孕激素，主要由卵巢、胎盤和腎上腺合成。由于受月經(jīng)期、排卵期和孕期的影響，絕經(jīng)前女性體內(nèi)的黃體酮水平會有很大的波動。成年男性和絕經(jīng)女性體內(nèi)的黃體酮水平較穩(wěn)定。成年男性血清黃體酮濃度正常為0.38～0.95 nmol/L，絕經(jīng)女性為<3.2 nmol/L。因此本研究以河南農(nóng)村成年男性和絕經(jīng)女性為研究對象，分析體內(nèi)黃體酮水平與肥胖的關(guān)聯(lián)。一項評估長期服用醋酸甲羥孕酮避孕藥效應(yīng)的研究[7]顯示，藥物使用與女性體重增加有關(guān)。此外，接受復(fù)雜非典型增生或子宮內(nèi)膜癌生育保留治療的婦女在治療期間，無論是使用口服孕激素還是實施宮內(nèi)孕激素，體重均增加[11]。在一項包括70名乳腺癌的病例對照研究中發(fā)現(xiàn)，肥胖患者的血清孕酮水平高于非肥胖者[12]。以上研究均表明體內(nèi)黃體酮水平與肥胖呈正相關(guān)。然而，在另外兩項研究[8-9]中發(fā)現(xiàn)，肥胖男性和早孕期孕婦體內(nèi)黃體酮水平與體重、BMI、腰圍存在負(fù)相關(guān)。本研究與這些研究結(jié)果相反。本研究在發(fā)展中國家農(nóng)村地區(qū)的成年男性與絕經(jīng)女性人群中開展，而文獻(xiàn)[8-9]的研究分別是在加拿大拉瓦爾醫(yī)院和新加坡婦產(chǎn)醫(yī)院進(jìn)行，研究對象年齡、種族、飲食習(xí)慣、生活方式及經(jīng)濟條件等因素的不同可能造成了結(jié)果不同。

有研究[11-12]證實，部分黃體酮受體存在于人體脂肪組織中，黃體酮可以由此增強脂蛋白脂肪酶活性，促進(jìn)脂質(zhì)的儲存。其次，黃體酮還可以與雌激素協(xié)同作用，通過改變cAMP 級聯(lián)減少脂肪的分解，通過影響磷酸肌醇級聯(lián)促進(jìn)脂質(zhì)的生成。雌激素受體還可誘導(dǎo)部分脂肪組織中的黃體酮受體，誘導(dǎo)程度與該組織中的雌激素受體成正比。棕色脂肪組織中解偶聯(lián)蛋白1 mRNA的表達(dá)可被黃體酮所誘導(dǎo)，從而影響脂肪組織的產(chǎn)熱反應(yīng)。此外，有研究[13]指出在黃體期，黃體酮可能通過增加由消極情緒狀態(tài)刺激的暴食和飲食來增加體重。然而，也有研究[14]認(rèn)為黃體酮聯(lián)用雌激素可以增加脂肪分解，皮下脂肪庫中的脂肪受影響最大。因此，對于黃體酮與肥胖的關(guān)聯(lián)方向還需進(jìn)一步深入研究。

本研究的樣本量較大，黃體酮檢測方法準(zhǔn)確，質(zhì)量控制較好，但研究結(jié)果仍存在一些局限性。首先，現(xiàn)況研究無法明確高黃體酮水平升高是肥胖的原因還是結(jié)果，因此還需要前瞻性隊列研究或人群干預(yù)試驗來驗證。其次，研究對象只局限于河南農(nóng)村地區(qū)，缺乏種族和地區(qū)的普遍性。再者，黃體酮是腎上腺皮質(zhì)激素、雌激素、雄激素等生物合成的重要中間體，內(nèi)分泌系統(tǒng)中各激素的調(diào)節(jié)可互相影響，所以肥胖可能與多種激素有關(guān)。今后可以通過相關(guān)的動物實驗，盡量消除其他激素的影響，深入探討血清黃體酮濃度與肥胖的關(guān)系。由于肥胖是一種病因復(fù)雜的疾病，未來還可以探討與黃體酮相關(guān)的基因、mRNA、蛋白質(zhì)以及孕激素受體在肥胖發(fā)展過程中的作用。