子宮內膜異位癥患者血清及腹腔沖洗液中FABP4和瘦素的測定

姬笑影，任琛琛，楊 立，陳雁南，李飛燕，朱遠航

鄭州大學第三附屬醫院婦產科 鄭州 450052

子宮內膜異位癥(endometriosis，EMT)是婦科常見的慢性炎癥性疾病，受此影響的婦女多伴有慢性盆腔痛、經期和性交疼痛以及不孕癥等癥狀，臨床上對本病早期診斷和治療十分重要。有文獻報道EMT患者BMI偏低[1]，血脂代謝較差[2]。脂肪組織可分泌大量的脂肪因子、趨化因子等，參與穩定腹腔內環境，介導腹腔內炎癥反應，影響機體對胰島素的敏感性[3]，可能與EMT的發生發展有關。脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白(adipocyte-fatty acid binding protein，FABP4)和瘦素是重要的脂肪因子，參與機體的糖脂代謝和炎癥反應，除了存在于脂肪組織中，還可分泌入血。我們研究了EMT患者血清及腹腔沖洗液中FABP4和瘦素水平的變化及其臨床意義，以期為EMT的診斷和治療提供幫助。

1 對象與方法

1.1 研究對象選取2019年11月至2020年8月就診于鄭州大學第三附屬醫院婦科，行手術治療且資料齊全患者。因不孕癥、卵巢囊腫等于我院行手術治療并且最終病理確診非EMT的患者為對照組(n=36)；因卵巢囊腫于我院行手術治療并且最終病理確診EMT的患者為EMT組(n=32)。排除妊娠期或者哺乳女性，其他雌激素依賴性疾病(子宮內膜息肉、子宮肌瘤、子宮內膜增生等)的患者，合并糖尿病、高脂血癥、惡性腫瘤等原發性疾病者，依從性差者。入選者對該研究均知情同意。

1.2 病情程度評價EMT病情程度評價采用r-AFS評分，Ⅰ～Ⅱ期為輕度，Ⅲ～Ⅳ期為重度。疼痛程度分級采用語言評價量表法[4]：無痛為0級；1級(輕度)，雖有疼痛但可以忍受，能正常生活，睡眠不受干擾；2級(中度)，疼痛明顯，不能忍受，要求服用止痛藥，睡眠受到干擾；3級(重度)，疼痛劇烈，不能忍受，需要止痛劑，睡眠受到嚴重干擾，可伴有自主神經功能紊亂或被動體位。

1.3 觀測指標入組患者均于入院時專人記錄年齡、孕次、痛經情況、身高、體重、腰圍、臀圍，計算BMI、腰臀比；收集CA125、空腹血糖、C反應蛋白、血脂、膽固醇水平等資料，均由本院檢驗科嚴格按照檢驗步驟檢測。

1.4 血清及腹腔沖洗液中FABP4和瘦素的測定術前空腹狀態采集5 mL外周靜脈血，1 000 r/min離心20 min后留取血清，置于-80 ℃下保存待測。手術時進入腹腔采用頭高腳低位，用10 mL無菌生理鹽水對子宮、卵巢、腸管等進行沖洗,回收直腸子宮陷凹、膀胱子宮陷凹液體，回收率>85%，1 000 r/min離心20 min后留取上清，置于-80 ℃下保存待測。

血清及腹腔沖洗液中FABP4和瘦素測定采用ELISA法，兩種試劑盒均購自上海酶聯生物科技有限公司，測試儀器為Rayto RT-6100酶標儀。檢測方法嚴格參照試劑盒說明書進行。

1.5 統計學處理采用SPSS 24.0進行統計學分析。兩組間年齡、身高、體重、BMI、腰圍、臀圍、腰臀比、甘油三酯、膽固醇的比較采用兩獨立樣本t檢驗；月經周期、月經經期、孕次、CA125、空腹血糖、C反應蛋白不服從正態分布，使用中位數(四分位數)表示，兩組間的比較采用秩和檢驗。輕度EMT組、重度EMT組、對照組及痛經程度1級、2級、3級患者FABP4和瘦素水平的比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用SNK-q檢驗。采用Pearson相關分析所有患者血清FABP4、瘦素與腹腔沖洗液中水平的關系；采用Spearman秩相關分析痛經患者FABP4、瘦素水平與痛經程度的關系。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 兩組患者臨床特征比較兩組患者的年齡、身高、體重、BMI、腰圍、臀圍、腰臀比、月經周期、月經經期、孕次、空腹血糖、C反應蛋白差異均無統計學意義，EMT組血清CA125、膽固醇水平高于對照組，甘油三酯水平低于對照組(表1)。

表1 兩組患者臨床特征比較

2.2 輕度EMT、重度EMT及對照組患者FABP4和瘦素水平比較結果見表2。輕度EMT患者血清、腹腔沖洗液FABP4水平均低于重度EMT患者，腹腔沖洗液瘦素水平高于重度EMT患者。

表2 3組患者FABP4和瘦素水平比較 μg/L

2.3 所有患者血清FABP4、瘦素水平與腹腔沖洗液中水平的相關性所有患者血清FABP4與腹腔沖洗液FABP4水平呈正相關(r=0.304，P=0.012)；而血清瘦素與腹腔沖洗液瘦素水平無相關性(r=-0.890，P=0.469)。

2.4 痛經患者FABP4、瘦素水平與痛經程度的關系3級痛經患者血清FABP4水平高于1級痛經患者(表3)。痛經患者血清FABP4和腹腔沖洗液瘦素水平與痛經嚴重程度正相關(rs=0.471、0.393，P=0.004、0.018)。

表3 不同級別痛經患者FABP4和瘦素水平比較 μg/L

3 討論

EMT是婦科常見的良性疾病，患病率可達10%～15%[5]。但其發病機制尚不明確，有研究[2]發現脂肪組織可通過其分泌的脂肪因子參與子宮內膜細胞黏附、增殖、侵襲、血管形成的各個過程，可為異位內膜細胞的存活提供物質材料、能量以及適宜環境。本研究中EMT和非EMT患者的身高、體重、BMI、腰圍、臀圍、腰臀比差異均無統計學意義，而EMT患者甘油三酯水平低于非EMT患者，膽固醇水平高于非EMT患者，提示EMT患者存在脂質代謝紊亂和脂肪動員加強。FABP4和瘦素作為脂質代謝的重要調節因子，可能與EMT的發生發展有關。

本研究發現EMT患者血清及腹腔沖洗液中FABP4水平高于非EMT患者，且r-AFS重度組高于輕度組，說明FABP4在EMT的發病和進展中起到了一定作用。血清與腹腔沖洗液中FABP4水平正相關，提示其可能在腹腔中營造了利于異位子宮內膜細胞存活和生長的環境。研究[6]發現異位表達的miR-455可降低過氧化氫誘導的細胞內活性氧和丙二醛水平，FABP4作為miR-455的直接下游目標，通過氧化應激而引起慢性炎癥反應，為異位病灶創造良好的生存環境；FABP4可使脂質分子穿過細胞膜，它將前列環素轉運到細胞核后，前列環素激活過氧化物酶體增殖物激活受體δ(PPAR-δ)，核PPAR-δ通過激活細胞表面前列環素受體抑制細胞凋亡[7]，利于腹腔中異位子宮內膜細胞存活。

本研究結果顯示EMT患者腹腔沖洗液瘦素水平高于非EMT患者，但重度組低于輕度組，故推測腹腔液中瘦素水平可能與EMT的發病關系密切。有研究[8-9]發現瘦素可調節EMT模型中的細胞生長、血管生成和炎癥反應。瘦素依賴于瘦素受體的JAK2/STAT3信號通路上調MMP-2來促進子宮內膜異位細胞的遷移和侵襲[10]。

我們還發現血清FABP4、腹腔沖洗液瘦素水平與痛經程度正相關。在EMT嚙齒類動物模型中，在病變處注射聚乙二醇化瘦素受體拮抗劑或JAK2抑制劑，可顯著減輕模型動物的疼痛。因此，針對瘦素信號的干預，特別是與降低雌激素水平的干預相結合，可能對治療EMT疼痛有效[11]。

總之，FABP4和瘦素在EMT的發生發展中可能發揮了重要作用，該研究結果可為疾病的診斷和治療提供了新思路。