生脈散聯合阿托伐他汀對老年冠心病患者TLR4/MyD88/NF-κB信號通路的影響

趙 添，邢亞明，于金平，趙 地

(1.山東中醫藥大學第二附屬醫院，山東 濟南 250001；2.山東第一醫科大學第三附屬醫院，山東 濟南 250031；3.山東省濟南市章丘區中醫醫院，山東 濟南 250200)

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(Coronary heart disease，CHD)是老年人常見病、多發病，以冠狀動脈狹窄、心肌缺血為主要臨床表現。老年CHD治療重點在于改善心肌缺血狀態，他汀類藥物不僅可通過調節脂質代謝紊亂穩定斑塊，并可直接發揮抗炎作用減輕炎癥，防止血栓形成，其中阿托伐他汀已被推薦用于冠心病的一、二級預防[1-2]。但研究表明他汀類藥物耐藥現象嚴重并且易出現轉氨酶和肌酸激酶升高[3]。中西醫結合治療逐漸成為近年來臨床關注的熱點。生脈散始于金代張元素的《醫學啟源》，由人參、麥冬、五味子組成，具有養陰生津之功。有研究表明，生脈散治療CHD療效較好，但臨床鮮有生脈散治療老年CHD相關報道[4]。本研究以112例老年CHD患者作為研究對象，探討生脈散聯合阿托伐他汀治療老年CHD的臨床療效，并分析其作用機制，以供臨床應用參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集本院2018年3月至2021年3月112例CHD患者作為研究對象，采用隨機數字表法分為觀察組和對照組，每組56例。觀察組：男38例，女18例；平均年齡(70.58±4.69)歲；平均體重指數(21.17±1.65)kg/m2；平均病程(4.36±1.27)年；心功能分級中Ⅰ級24例，Ⅱ級22例，Ⅲ級10例。對照組：男44例，女12例；平均年齡(71.03±5.38)歲；平均體重指數(20.95±1.72)kg/m2；平均病程(4.40±1.30)年；心功能分級中Ⅰ級20例，Ⅱ級23例，Ⅲ級13例。兩組患者性別、年齡、體重指數、病程及心功能分級等一般資料比較，差異無統計學意義(均P>0.05)。患者對本研究內容知悉，并簽署知情同意書。本研究經醫院倫理委員會審批同意。病例納入標準：符合CHD診斷標準，中醫辨證為氣陰兩虛證[5-6]；年齡≥65歲。排除標準：合并有原發性心肌病、心臟畸形、腦梗死者；對他汀類藥物過敏者；精神意識障礙者；同時接受其他項目研究者；合并血液系統疾病者；肝腎功能不全者。排除標準：治療期間主動要求退出者；隨訪失訪者。

1.2 治療方法 兩組患者均接受冠心病常規治療：阿司匹林腸溶片(國藥準字J20171021，規格100 mg)口服，100 mg/次，1次/d；單硝酸異山梨酯片(國藥準字H20066717)口服，20 mg/次，2次/d。囑患者戒煙限酒，避免過度勞累。

1.2.1 對照組：在常規治療基礎上加用阿托伐他汀1次/d，(國藥準字H20051407，規格10 mg)，口服，1片/次，1次/d，連續治療8周。

1.2.2 觀察組：在對照組基礎上聯合生脈散加減。生脈散方藥組成：黨參30 g、麥冬20 g、五味子9 g。隨癥加減：伴胸悶、氣短乏力者，加瓜蔞、紅花、赤芍、川芎各10 g；伴胸悶、心悸不安、四肢畏寒者，加附子、桂枝、郁金各10 g；伴神疲乏力、失眠健忘、食少便溏者，加黨參、白術、茯神各10 g。以上中藥均由本院煎藥房煎制，加水煎至300 ml，分2次飯后溫服，每日1劑。患者每2周復診1次，根據四診資料調整處方，兩組患者均連續治療8周。

1.3 觀察指標 Toll樣受體4(Toll-like receptor-4，TLR-4)、髓樣分化因子MyD88(Myeloid differentiation factor 88，MyD88)及核轉錄因子-κB(Nuclear transcription factor kappa B，NF-κB)水平檢測：分別在兩組治療前后采集空腹肘靜脈血5 ml，離心后取上清備用，采用Trizol提取細胞總RNA，逆轉錄反應后進行PCR擴增，以β-actin為內參，以2-△△Ct法計算TLR4、MyD88及NF-κB mRNA相對表達量。TLR-4引物上游序列5’-TGGAAGTTGAAGGAATGGAATGTC-3’，下游序列5’-ACCAGAACTGCTACAACAGATACT-3’。 MyD88引物上游序列5’-GCACATGGGCACATACAGAC-3’，下游序列 5’-GCACATGGGCACATACAGAC-3’。 NF-κB引物上游序列5’-CTGTCCTTTCTCATCCCATCT-3’，下游序列 5’-ACACCTCAATGTCCTCTTTCTG-3’。 β-actin引物上游序列5’-AGATCAAGATCATTGCTCCTCCTG-3’， 下游序列5’-CATTTGCGGTGGACGATGGA-3’。TLR4、MyD88及NF-κB蛋白水平檢測：提取細胞總蛋白，電泳至PVDF膜，封閉2 h后，加TLR-4、MyD88及NF-κB一抗處理，以β-actin為內參，采用化學發光法顯色，顯影后記錄蛋白相對表達量。蛋白相對表達量=目的蛋白/β-actin灰度值。心功能指標：分別在兩組治療前后采用飛利浦HD5G型彩色多普勒超聲診斷系統檢測左室舒張末內徑(Left ventricular end diastolic diameter，LVDD)，采用改良Simpson法測量左室射血分數(Left ventricular ejection fraction，LVEF)。記錄6 min步行距離(6 minute walking distance，6MWD)[7]。

1.4 療效標準 根據《證候類中藥新藥臨床研究技術指導原則》[8]和《冠心病心絞痛中醫療效評價標準》[9]記錄兩組患者治療前后癥狀積分，計算減分率。減分率=[(治療前積分-治療后積分)/治療前積分]×100%。顯效為減分率≥70%；有效為30%≤減分率<70%；無效為減分率<30%。

2 結 果

2.1 兩組患者臨床療效比較 觀察組的總有效率92.86%高于對照組總有效率82.14%，差異有統計學意義(Z=-2.455，P<0.05)，見表1。

表1 兩組患者臨床療效比較[例(%)]

2.2 兩組患者治療前后TLR4、MyD88及NF-κB mRNA水平比較 見表2。治療前，兩組TLR4、MyD88及NF-κB mRNA水平比較，差異無統計學意義(均P>0.05)。治療后，兩組TLR4、MyD88及NF-κB mRNA均低于治療前，且觀察組各項水平均低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。

表2 兩組患者治療前后TLR4、MyD88及NF-κB mRNA水平比較

2.3 兩組患者治療前后TLR4、MyD88及NF-κB 蛋白水平比較 見表3。治療前，兩組TLR4、MyD88及NF-κB蛋白比較，差異無統計學意義(均P>0.05)。治療后，兩組TLR4、MyD88及NF-κB 蛋白均低于治療前，且觀察組TLR4、MyD88及NF-κB蛋白均低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。

表3 兩組患者治療前后TLR4、MyD88及NF-κB 蛋白水平比較

2.4 兩組患者治療前后心功能比較 見表4。治療前，兩組LVDD、LVEF、6MWD水平比較，差異無統計學意義(均P>0.05)。治療后，兩組LVEF和6MWD均高于治療前，LVDD低于治療前，差異有統計學意義(均P<0.05)。治療后，觀察組LVEF、6MWD高于對照組，差異有統計學意義(均P<0.05)。

表4 兩組患者治療前后心功能比較

3 討 論

中醫無CHD病名，根據CHD臨床癥狀，將其歸屬于“心悸”“胸痛”“胸痹”范疇，涉及心、脾兩臟。患者病久體虛，易氣血不足、心脾兩虛，故針對CHD患者的治療，應注重補益氣血，調補心脾[10]。多項報道顯示高脂血癥可促進動脈粥樣硬化的發生發展，是CHD的高危因素[11-12]。阿托伐他汀具有良好的調脂作用，同時可抑制TNF-α、CRP等炎癥因子表達，相關研究還證實阿托伐他汀可抑制頸動脈內膜中層厚度增加，從而減少心血管事件發生[13-14]。

冠心病患者常有心悸、氣短、疲乏、動則汗出、自汗或盜汗、心煩、口干、舌紅少苔、脈細數無力或結代等氣陰兩虛的表現。《靈樞》記載“心氣始衰，苦憂悲，血氣懈墮，故好臥”，明確指出心氣虛弱與CHD的關系，氣虛則無以行血、陰虛則脈絡不利，心氣不足無以推動血行，陰虛筋脈失養，血行瘀滯，不榮則痛，則可出現心絞痛。生脈散人參配伍麥冬，益氣養陰生津，五味子斂陰止汗，全方共奏養陰生津之功。現代藥理研究顯示，生脈散有助于提高心肌排血量，降低血管外周阻力，對保護心功能、改善預后具有重要作用[15]。因此，本研究選用益氣養陰經典方生脈散，并在此基礎上根據伴隨癥狀調整處方，辨證施治，實現個體化治療。研究結果顯示，觀察組總有效率高于對照組。另外，有研究提出，6MWD是判斷CHD療效和預后的可靠指標[16]。本研究顯示，治療后，觀察組LVEF和6MWD均優于對照組，提示生脈散有助于改善患者心功能。

有研究證實，TLR4/NF-κB炎癥信號通路系統參與心肌炎癥反應，與冠心病的發生發展密切相關[17-18]。TLR4過度表達可經MyD88途徑激活下游NF-κB，進而易位進入細胞核內，促進LOX-1等炎癥因子表達，損傷血管和硬化斑塊，導致心血管事件的發生[19]。TLR4抑制劑可通過抑制炎癥反應、減少肥大相關基因的表達抑制心室重構，故推測TLR4可能是炎癥與冠心病之間的關鍵因子[20]。本研究顯示，治療后觀察組TLR4、MyD88及NF-κB mRNA和蛋白水平均低于對照組，提示生脈散可能通過抑制TLR4/MyD88/NF-κB信號通路，減輕局部炎癥反應，保護心功能，從而提高療效。

綜上所述，生脈散聯合阿托伐他汀治療CHD療效較好，有助于保護心功能，這可能與生脈散調控TLR4/MyD88/NF-κB信號通路有關。