果蔬農(nóng)殘快速檢測技術(shù)在實(shí)踐工作中的應(yīng)用探討

曾春花 陳錫成 鐘家艷 許紹峰 韋良英

(1.防城港市防城區(qū)農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊(duì)，廣西 防城港 538021；2.防城港市防城區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，廣西 防城港 538021）

水果蔬菜是人民大眾日常生活的必需品。隨著我國人民物質(zhì)生活水平的不斷提高和社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題日益突出，尤其是蔬果中的農(nóng)藥殘留量超標(biāo)問題，直接影響人民大眾的身體健康和農(nóng)產(chǎn)品在市場的競爭力，并已成為國家和公眾高度重視和關(guān)注的問題。水果、蔬菜的農(nóng)藥殘留的檢測方法直接關(guān)系到水果、蔬菜果蔬行業(yè)食品質(zhì)量安全監(jiān)管的成效。因此，做好果蔬農(nóng)殘檢測和監(jiān)管工作，是保護(hù)人民生命安全，增強(qiáng)農(nóng)產(chǎn)品市場競爭力的重要措施。

1.目前農(nóng)藥殘留檢測方法

農(nóng)藥殘留檢測方法大致可分為三大類：生物測定法、化學(xué)分析法、兼生物及化學(xué)的免疫分析法和生化檢測法。

1.1 農(nóng)藥殘留的生物測定技術(shù)

利用指示生物的生理生化反應(yīng)來判斷農(nóng)藥殘留及其污染情況，該方法一般作為引起中毒農(nóng)產(chǎn)品現(xiàn)場檢測。

1.2 農(nóng)藥殘留的化學(xué)檢測

農(nóng)藥殘留的化學(xué)檢測方法有分光光度法、極譜法、原子吸收光譜法、薄層層析法、氣相色譜法、液相色譜法、色質(zhì)聯(lián)用法等，這些分析方法有的靈敏度不高，有的需要昂貴的儀器，還有的需要特殊的設(shè)備，這對廣泛、大量的開展水果蔬菜農(nóng)殘檢測有一定的局限性。

1.3 農(nóng)藥殘留的生化檢測

有機(jī)磷與氨基甲酸酯農(nóng)藥共為神經(jīng)系統(tǒng)乙酰膽堿脂酶抑制物，因此可以利用農(nóng)藥靶標(biāo)酶-乙酰膽用堿酯酶（AChE）受抑制的程度來檢測有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。該方法具有快速方便、前處理簡單、儀器相對簡單等特點(diǎn)，適用于現(xiàn)場的定性和半定量測定，目前已開發(fā)出了相應(yīng)的各種速測卡和速測儀。由于蔬菜、水果類鮮食農(nóng)產(chǎn)品保存時(shí)間相對較短的特點(diǎn)，目前常用的方法是生化檢測法中的快速檢測技術(shù)——酶抑制法。

2.速測儀法（酶抑制分光光度法）特點(diǎn)和應(yīng)用情況

2.1 酶抑制法是指根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶活性的抑制作用，通過計(jì)算待測樣品對乙酰膽堿酯酶活性的抑制率定性判斷其中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥及其存在總量的一種快速初篩方法。目前已被列為國家推薦標(biāo)準(zhǔn)（GB/T5009.199-2003）的酶抑制率法具有快速，操作簡便，成本低廉等特點(diǎn)，已成為對果蔬中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留進(jìn)行現(xiàn)場快速定性初篩檢測的主流技術(shù)之一。

2.2 目前我區(qū)廣泛使用的農(nóng)藥殘留檢測方法主要有兩大類：色譜檢測法和速測儀法。色譜檢測法用作農(nóng)殘定量分析，可為農(nóng)藥殘留執(zhí)法提供依據(jù)，主要分布在省級和地市級相關(guān)部門，個(gè)別縣市也具有一定的檢測能力。速測儀法只能作農(nóng)殘定性分析，但它具有短時(shí)間內(nèi)能夠檢測大量樣本、檢測成本低，對于檢測人員技術(shù)水平要求低，易于在基層推廣等特點(diǎn)，是目前我國控制高毒農(nóng)藥殘留的一種有效方法，廣泛用于蔬菜、水果生產(chǎn)基地和批發(fā)市場等，主要用來防止有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留嚴(yán)重超標(biāo)的蔬菜和水果流入市場。

3.速測儀法（酶抑制法）使用過程中應(yīng)注意的幾個(gè)問題

3.1 速測儀法的優(yōu)缺點(diǎn)：

3.1.1 優(yōu)點(diǎn)：在于簡單方便，快捷、成本低廉。整個(gè)檢測過程只需30 分鐘左右，它可以作為傳統(tǒng)儀器分析方法的有益補(bǔ)充，針對市場、基地果蔬農(nóng)藥殘留量進(jìn)行快速篩選監(jiān)測，保證上市蔬果食用的相對安全性。

3.1.2 缺點(diǎn)：酶試劑易失活，導(dǎo)致反應(yīng)不穩(wěn)定，檢測結(jié)果誤差較大，重復(fù)性不好，實(shí)際應(yīng)用中的確認(rèn)率大約為60%～70%左右；存在檢測盲區(qū)，只能檢測有機(jī)磷和氨基甲酸酯兩類農(nóng)藥，不能檢測有機(jī)氯類、菊酯和其它類別的劇毒農(nóng)藥；不適合檢測蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄等容易出現(xiàn)假陽性的農(nóng)產(chǎn)品；需要對檢測人員進(jìn)行專門培訓(xùn)，否則將會對出現(xiàn)的問題無法正確處理或判斷，得出錯(cuò)誤的結(jié)果。

3.2 快速檢測法的“檢測盲區(qū)”假陽性的產(chǎn)生和避免方法

3.2.1 農(nóng)藥殘留快速檢測法的“檢測盲區(qū)”假陽性的產(chǎn)生：一方面，由于各蔬菜品種間（蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄、胡蘿卜、橘子、辣椒）等含有對酶有影響次生物質(zhì)容易產(chǎn)生假陽性，對檢測抑制率有不同干擾和影響，使一般的快速檢測方法難以區(qū)分與農(nóng)殘抑制作用的比例關(guān)系容易造成誤判（假陽性）；另一方面，因色素的干擾可能影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。當(dāng)待測樣品的色素（如：葉綠素、胡蘿卜素等）含量較高會使測得的透過率非常低，從而造成對吸光度隨時(shí)間變化值計(jì)算的錯(cuò)誤，影響檢測結(jié)果的可靠性。

3.2.2 針對果蔬快速檢測法出現(xiàn)假陽性的情況，可利用檢測平臺系統(tǒng)中的《果蔬農(nóng)藥殘留比對數(shù)據(jù)庫》（即標(biāo)椎對照庫），初步解決了應(yīng)用“酶抑制率法+分光光度法”檢測有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留時(shí)存在的部分“檢測盲區(qū)”，在一定程度上避免了檢測結(jié)果的假陽性，并實(shí)現(xiàn)了檢測過程中對吸收光譜的自動校準(zhǔn)。在實(shí)際工作中如果準(zhǔn)備檢測《果蔬農(nóng)藥殘留比對數(shù)據(jù)庫》的樣品時(shí)，先在“比對數(shù)據(jù)庫”（即標(biāo)椎對照庫）選擇相應(yīng)的果蔬名稱裝入對應(yīng)檢測的通道進(jìn)行檢測，可以有效避免產(chǎn)生假陽性。若被測樣本的酶抑制率＜50%為安全果蔬：若被測樣本的酶抑制率≥50%為農(nóng)藥殘留的毒性超標(biāo)，建議重復(fù)一次，如果再超標(biāo)可送有關(guān)部門進(jìn)一步做定量檢測。

3.3 規(guī)范操作，科學(xué)使用和保存檢測試劑

3.3.1 規(guī)范操作。采用酶抑制法進(jìn)行果蔬農(nóng)殘檢測時(shí)，配制試劑建議使用蒸餾水或純凈水，不能直接用自來水配制，如用含有雜質(zhì)的水配制試劑會影響檢測結(jié)果；要選取有代表性的蔬果進(jìn)行檢測，注意不能用水沖洗所需檢測的蔬菜水果樣品的可食部分，如樣品沾有泥土或水時(shí)，可用濾紙或干凈毛巾擦，再切碎，用四分法稱量；所要稱量的物品必須放在稱量容器中或稱量紙上，不能直接把物品放在稱量盤上；樣品加入底物后應(yīng)立即上儀器檢測，盡量縮短操作時(shí)間，否則空白值變小。嚴(yán)格控制檢測環(huán)境溫、濕度，尤其是溫度應(yīng)控制在20～25 ℃，確保酶的活性。

3.3.2 嚴(yán)格控制試劑保存條件。包裝好未配制的“農(nóng)藥殘留快速檢測試劑”必須在冰箱的冷凍層保存，使用時(shí)再溶解。夏季時(shí)節(jié)，酶、底物、顯色劑易變質(zhì)失效，應(yīng)對配制過的溶液分裝，即取即用。配制好的酶液和底物在4℃的儲藏箱內(nèi)可保存1 周，過期使用會影響檢測結(jié)果。

4.小結(jié)

我國農(nóng)藥的施用量和產(chǎn)量占世界第一。如何監(jiān)管控制好水果蔬菜農(nóng)藥殘留量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一就是對果蔬中農(nóng)藥殘留量及時(shí)、準(zhǔn)確的分析檢測。因此，在縣鄉(xiāng)級基層負(fù)責(zé)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管檢測的工作人員需要進(jìn)行專門的檢測業(yè)務(wù)技術(shù)培訓(xùn)，熟悉檢測技術(shù)規(guī)程，提高檢測人員的業(yè)務(wù)水平，以便對所轄區(qū)域的果蔬開展風(fēng)險(xiǎn)（例行）監(jiān)測，并確保監(jiān)測品種和范圍對本地主要食用農(nóng)產(chǎn)品、基地和生產(chǎn)、收儲、銷售環(huán)節(jié)全覆蓋。只有如此，才能確保廣大人民群眾“舌尖上的安全”。