CA199、IL-10、CHI3L1聯合檢測在胰腺癌診斷中的價值*

賀龍梅，馬燕粉，王曉倩，蔡曉輝，劉靜文，馬運峰，王曉琴△

1.西安交通大學第一附屬醫院檢驗科，陜西西安 710061；2.陜西省中醫醫院檢驗科，陜西西安 710082；3.中國人民解放軍空軍第九八六醫院兒科，陜西西安 710054；4.西安交通大學基礎醫學院病原生物學與免疫學系，陜西西安 710082

胰腺癌是一種高度惡性且進展迅速的消化系統腫瘤，其5年生存率僅為5%。2020年美國癌癥協會發布的數據顯示，美國胰腺癌新發病例數位居男性惡性腫瘤的第10位，女性惡性腫瘤的第9位，病死率居惡性腫瘤的第3位[1]。中國國家癌癥中心最新統計數據也顯示，胰腺癌發病率位居中國城市男性惡性腫瘤的第8位，胰腺癌死亡率居北京市和上海市人群惡性腫瘤死亡率的第6位[2]。雖然現有的影像學方法極大地提高了胰腺癌診斷的特異度和靈敏度，但是受胰腺解剖學和胰腺癌生物學特征的影響，胰腺癌患者早期臨床表現不典型，易侵犯周圍組織器官以及發生遠處轉移，多數患者確診時已屬晚期，僅有約20%的患者在確診時有接受根治性手術的機會[3-5]。血清腫瘤標志物檢測簡單、快捷，已成為胰腺癌篩查的首選方法。目前胰腺癌相關腫瘤標志物有多種，但單一指標檢測均具有一定的局限性。本研究旨在探討血清糖類抗原(CA)199、白細胞介素(IL)-10及殼多糖酶3樣蛋白1(CHI3L1)聯合檢測在胰腺癌臨床診斷中的價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年9月至2019年2月西安交通大學第一附屬醫院收治的胰腺癌患者40例，將其作為胰腺癌組；另外，選取肺癌患者40例(肺癌組)作為其他腫瘤對照，胰腺炎患者40例(胰腺炎組)作為炎癥對照，西安交通大學第一附屬醫院同期體檢健康者40例作為健康對照組。所有納入研究的患者均經病理、實驗室檢查或影像學檢查(超聲、CT和磁共振等)等手段確診。健康對照組人群經體檢檢查(包括常規生化檢查、超聲檢查、心電圖、胸部X線片等)，排除有心臟、肝臟及腎臟等重要器官疾病者。各組間性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。

表1 胰腺癌組和各對照組一般資料比較(n=40，n)

1.2儀器與試劑 CA199的檢測采用羅氏E170電化學發光分析儀及其配套試劑；IL-10的檢測采用達優生物技術有限公司IL-10檢測試劑盒；CHI3L1檢測采用杭州普望生物技術有限公司試劑盒；采用美國Thermo公司的超微量分光光度計檢測吸光度(A)。

1.3方法 采集清晨空腹靜脈血5 mL于促凝管中，3 000 r/min離心10 min后分離血清，將血清分裝為3管，其中1管用于CA199的檢測，將另2管血清凍存于-80 ℃，直至所有標本收集完畢。標本收集完畢后于檢測當日將凍存的血清取出置于室溫復融，充分混勻后嚴格按照試劑盒說明書采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)分別檢測IL-10和CHI3L1。用超微量分光光度計在450 nm處讀取A值。應用軟件擬合最優標準曲線，再輸入樣本A值計算相應檢測指標水平。

1.4統計學處理 采用SPSS22.0軟件進行數據分析，計量資料以M(P25～P75)表示，組間比較采用Kruskai-Wallis秩和檢驗；采用Logistic回歸分析CA199、IL-10、CHI3L1水平對胰腺癌發生的影響;用Medcalc19.8軟件繪制各檢測指標的受試者工作特征(ROC)曲線；利用多元Logistic回歸模型，由各指標的線性組合計算預測概率P，然后用預測概率P計算聯合檢測的曲線下面積(AUC)[6]；分析AUC、靈敏度與特異度；P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1各組間血清CA199、IL-10、CHI3L1水平的比較 胰腺癌組血清CA199水平高于其他各組(P<0.05)；胰腺癌組IL-10水平高于胰腺炎組和健康對照組(P<0.05)；胰腺癌組CHI3L1水平高于肺癌組和健康對照組(P<0.05)。見表2。

表2 各組血清CA199、IL-10、CHI3L1水平比較[n=40,M(P25～P75)]

2.2各指標水平對胰腺癌發生的影響 CA199、IL-10、CHI3L1是胰腺癌發生的危險因素(P<0.05)，見表3。

表3 Logistic回歸分析各指標對胰腺癌發生的影響

2.3各項指標檢測用于胰腺癌診斷的效能 單項指標檢測中，CA199對胰腺癌的診斷特異度最高，為95.0%， AUC為0.908；IL-10對胰腺癌的診斷靈敏度最高，為87.5%，AUC為0.936；CHI3L1診斷胰腺癌的AUC為0.820。3項指標聯合檢測的特異度、靈敏度分別為97.5%、97.5%，AUC為0.996。CA199、IL-10、CHI3L1聯合檢測時，AUC優于CA199、IL-10、CHI3L1單獨檢測，見表4、圖1。

表4 單獨及聯合檢測CA199、IL-10、CHI3L1對胰腺癌的診斷效能分析

圖1 CA199、IL-10、CHI3L1單獨及聯合檢測用于胰腺癌診斷的ROC曲線

3 討 論

胰腺癌是一種惡性程度很高，診療較為困難的消化道惡性腫瘤，是預后最差的惡性腫瘤之一，而其發病率和死亡率近年來明顯上升。胰腺癌的發生機制尚不十分清楚，但家族史、肥胖、吸煙、慢性胰腺炎及糖尿病史等都被認為是胰腺癌的危險因素。受胰腺解剖學和胰腺癌生物學特征的影響，胰腺癌患者早期無明顯臨床癥狀或癥狀較輕，當有典型臨床表現時，疾病往往已進展至中后期，80%的患者確診時已因腫瘤轉移或侵襲到胰外器官而無法行根治性切除術，75%的胰腺癌患者在確診后1年內死亡，中位生存時間為4～6個月。早期診斷、早期治療能提高胰腺癌患者的5年生存率，延長患者生存時間[7-8]。如何提高胰腺癌早期檢出率是當前眾多臨床學者研究的重點。近年來，由于血清腫瘤標志物檢測具有準確、快速、微量，患者痛苦小，接受度高等優點，其作為新的診斷技術在胰腺癌的早期發現以及腫瘤的診斷、鑒別診斷與分期等方面的應用有了進一步的進展。

CA199是一種存在于細胞膜上的糖蛋白，表達于健康人的正常胰腺導管上皮細胞，通常以唾液黏蛋白存在于血清中，健康人血清中的水平相對較低[9]，是胰腺癌中最有效的生物標志物和異常糖基化的指標。CA199在胰腺癌中起著生物標志物、預測因子和啟動子的作用。作為一種生物標志物，其面臨的主要挑戰在于炎癥和非胰腺癌所造成的假陽性和Lewis陰性個體造成的假陰性。當使用CA199作為生物標志物時，應確定Lewis抗原狀態[10-11]。本研究顯示，胰腺癌患者血清CA199水平顯著高于健康對照組和胰腺炎組，特異度為95.0%，靈敏度為80.0%，AUC為0.908。這與秦牛等[11]的研究報道一致。

IL-10是腫瘤細胞的生長因子，可以維持腫瘤細胞生長和增殖，IL-10水平升高與某些癌癥有關，例如卵巢癌、黑色素瘤、淋巴瘤、骨髓瘤。值得注意的是，IL-10表達升高可能是由于多種原因引起的，其意義截然不同：IL-10可由腫瘤細胞自身表達，也可由參與宿主抗腫瘤反應的活化細胞產生，它可能是一種有效的炎性反應而不是免疫抑制指標。在霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤中，IL-10血清水平升高被認為是生存或治療反應的影響因素；血清中可檢測到的IL-10也被認為是肝細胞癌、肺癌、腎癌、胃癌或結直腸癌以及其他實體瘤臨床轉歸的陰性指標；相反，在一項彌漫性大細胞淋巴瘤的研究中，血清IL-10水平與預后無關[12]。綜上所述，IL-10在腫瘤及其預后中的作用尚不明確。迄今為止，國內外關于IL-10在胰腺癌患者血清中的變化研究較少。本研究發現，胰腺癌組患者血清IL-10水平顯著高于健康對照組和胰腺炎組，特異度為90.0%，靈敏度為87.5%，AUC為0.936，對胰腺癌具有較高的診斷價值。

CHI3L1是哺乳動物殼多糖酶家族的成員，又稱為YKL-40。其在腫瘤中的生物學機制和生理功能尚未完全闡明,CHI3L1通過促炎、促腫瘤和促血管生成因子的生成而在癌癥中發揮作用,了解CHI3L1的生物學和生理學功能對于治療炎癥性疾病以及診斷與治療腫瘤至關重要[13]。隨著研究的不斷深入，有學者發現血漿CHI3L1水平的增加與酒精性肝炎、胰腺損傷等疾病有關[14]。本課題組成員前期研究發現，CHI3L1與胰腺癌具有相關性,在胰腺癌中呈高表達，且與胰腺癌TNM分期顯著相關[15]。一直以來，胰腺癌發病的眾所周知的高危因素是胰腺炎，并且在遺傳性胰腺炎綜合征患者中，這種癌癥的終生風險可達到40%，與SPINK1和PRSS1的突變有關。這與本研究中CHI3L1血清水平在胰腺炎與胰腺癌患者中均高于健康體檢者的結果相一致。

本研究在前期研究的基礎上，初步探討了CA199、IL-10、CHI3L1 3項指標單獨檢測與聯合檢測的診斷效能。通過ROC曲線分析發現，CA199、IL-10、CHI3L1對胰腺癌患者均有一定的診斷價值，其中IL-10的診斷價值最大(AUC=0.936)。CA199、IL-10和CHI3L1在胰腺癌患者血清中呈高表達，IL-10和CHI3L1有望成為胰腺癌新的臨床診斷指標。在胰腺癌患者中聯合檢測血清CA199、IL-10及CHI3L1水平具有較高的臨床診斷價值。下一步本課題組將擴大樣本量，對IL-10和CHI3L1在胰腺癌中的作用機制進行研究，以期進一步地明確胰腺癌發生、發展的機制。