濃醬兼香型白酒中甲醇和己酸檢測方法研究

馬曉斌，喬 笠，王雁秋，向雅潔

（松滋市公共檢驗(yàn)檢測中心，湖北松滋 434200）

濃醬兼香型白酒是具有濃香兼醬香獨(dú)特風(fēng)格的白酒[1]，深受消費(fèi)者喜愛。白酒在發(fā)酵的過程中會(huì)產(chǎn)生對人體有害的甲醇[2]，因此，準(zhǔn)確的檢測濃醬兼香型白酒中的甲醇含量，對于保障人體健康具有重要的意義。己酸是己酸乙酯的前體物質(zhì)，起到呈香、助香、減少酒體刺激以及緩沖平衡的作用[3]，對濃醬兼香型白酒的風(fēng)味有較大的影響。

孟雄飛等[4]建立氣相色譜法同時(shí)檢測酒中的甲醇、乙酸乙酯、己酸乙酯等10種成分的方法，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)均在0.9990 以上，加標(biāo)回收率在82.3%～118.6%，具有較高的準(zhǔn)確度和精密度。季方等[5]利用CP-Wax 57CB 色譜柱型，采用氣相色譜法對濃香型白酒中己酸檢測方法進(jìn)行研究，己酸加標(biāo)回收率96.1%～102.9%。韓旭等[6]建立白酒中同時(shí)檢測己酸乙酯和己酸的毛細(xì)管氣相色譜分析方法，己酸乙酯和己酸加標(biāo)回收率分別為99.12%～103.22%和98.52%～101.23%。目前，同時(shí)檢測濃醬兼香型白酒中的甲醇和己酸的方法尚未見報(bào)道。本研究結(jié)合GB 5009.266—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中甲醇的測定》[7]和《濃香型白酒》報(bào)批稿中己酸的測定，優(yōu)化檢測條件，最終得到同時(shí)檢測濃醬兼香型白酒中甲醇和己酸的檢測方法。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

白酒樣品：湖北白云邊股份酒業(yè)有限公司濃醬兼香型白酒。

試劑及耗材：甲醇（Dr.Ehrenstorfer 純度99.9%），叔戊醇（Dr.Ehrenstorfer，純度99.9%），己酸（山東西亞化學(xué)試劑有限公司，純度99.9%），2-乙基丁酸（山東西亞化學(xué)試劑有限公司，純度99.9%）。

儀器設(shè)備：安捷倫7890B 氣相色譜儀配備FID檢測器；梅特勒-托利多ME403 電子天平；漩渦混合器。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

1.2.1 混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的制備

準(zhǔn)確稱取甲醇和己酸各0.5 g，置于100 mL 容量瓶中，用60 %乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，作為混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

1.2.2 混合內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

準(zhǔn)確稱取叔戊醇和2-乙基丁酸各2 g，置于100 mL 容量瓶中，用60%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，作為混合內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2.3 樣品溶液的制備

準(zhǔn)確吸取白酒樣品10.0 mL 置于離心管中，加入內(nèi)標(biāo)混合溶液0.10 mL，混勻，作為樣品溶液。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制

準(zhǔn)確吸取混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 mL、2 mL、4 mL、5 mL、8 mL，置于50 mL 容量瓶中，分別加入混合內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5 mL，用60%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻制備成100 mg/L、200 mg/L、400 mg/L、500 mg/L、800 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。

1.2.5 色譜條件

色譜柱：ZB-WAX plus(60 m×0.25 mm×0.25 μm)；載氣流量：1.0 mL/min；升溫程序：初溫40 ℃保持1 min，3 ℃/min 升至130 ℃，10 ℃/min 升至200 ℃保持5 min；檢測器溫度：250 ℃；氫氣流速：40 mL/min ；空氣流速：400 mL/min；進(jìn)樣口溫度：200 ℃，進(jìn)樣量：1 μL，分流比：30∶1。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件優(yōu)化

試驗(yàn)研究了不同分流比（20∶1、30∶1、40∶1）和第二階段升溫速率（2 ℃/min、3 ℃/min、4 ℃/min）組合色譜條件對被測組分分離度的影響。綜合考慮分析時(shí)間和分離度兩個(gè)條件，分流比30∶1 和第二階段升溫速率3 ℃/min 為最佳色譜條件?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)溶液和濃醬兼香型白酒樣品溶液色譜圖分別見圖1和圖2。

圖1 混合標(biāo)樣色譜圖

圖2 濃醬兼香型白酒樣品色譜圖

2.2 校準(zhǔn)曲線

圖3 所示混合標(biāo)準(zhǔn)曲線中甲醇標(biāo)準(zhǔn)曲線，以甲醇濃度為橫坐標(biāo)，以甲醇峰面積與叔戊醇峰面積比值為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，甲醇回歸方程y=0.00232x-0.00542，R2=0.99998，R2≥0.99，滿足檢測要求。以己酸濃度為橫坐標(biāo)，以己酸和2-乙基丁酸峰面積比值為縱坐標(biāo)繪制己酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖4所示。己酸回歸方程y=0.00624x-0.01289，R2=0.99743，R2≥0.99，滿足分析要求。

圖3 甲醇標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜

圖4 己酸標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜

2.3 精密度試驗(yàn)和加標(biāo)回收試驗(yàn)

濃醬兼香型白酒樣品在統(tǒng)一條件下重復(fù)測定6次，計(jì)算甲醇和己酸在不同加標(biāo)濃度下相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）和加標(biāo)回收率。所得結(jié)果見表1。該法的甲醇標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.0%～1.9%之間，己酸標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.6 %～1.1 %之間，結(jié)果表明，本方法具有良好的精密度。甲醇平均加標(biāo)回收率分別為100.456 %、99.963 %、100.571 %，己酸平均加標(biāo)回收率分別為100.976%、96.331%、99.531%,表明本方法的回收率令人滿意。

表1 精密度檢驗(yàn)(n=6)和加標(biāo)回收率結(jié)果

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)采用內(nèi)標(biāo)法對濃醬兼香型白酒中的甲醇和己酸進(jìn)行分析，該方法能同時(shí)準(zhǔn)確的測定甲醇和己酸含量，操作簡單，相關(guān)性系數(shù)(R2)、精密度（n=6）和回收率滿足檢測要求，可以用于濃醬兼香型白酒中的甲醇和己酸含量的檢測。