老年癡呆患者血清微小miR-9和M-CSF及Hcy的變化及其意義

張穎奇，徐瑩，劉琳

（沈陽積水潭醫院神經內科，遼寧 沈陽 110027）

我國屬于老年癡呆的高發國家，因此，引起了人們的廣泛關注[1]。癡呆是因大腦病變所導致的臨床綜合征之一，患者臨床特征主要表現為認知功能減退，如抽象思維、計算、推理、判斷、理解、記憶，同時可能伴人格改變、行為紊亂、妄想、幻覺[2]。血管性癡呆、阿爾茨海默癥則是臨床中較為常見的老年癡呆類型。準確識別和有效預防老年癡呆，能有效延緩病程進展，顯著改善患者預后。臨床相關研究結果顯示，老年癡呆的發生、發展，與血清微小RNA-9（miR-9）、巨噬細胞刺激集落因子（M-CSF）、同型半胱氨酸（Hcy）水平密切相關[3]。本研究旨在分析老年癡呆患者血清miR-9、M-CSF、Hcy的變化及其意義，旨在能為老年癡呆的防治提供指導，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取本院2019年2月至2020年4月收治的老年癡呆患者60例作為實驗組，另選取同期本院收治的60例非老年癡呆患者作為對照組。實驗組男33例，女27例；年齡62～81歲，平均（75.33±6.72）歲；伴高血壓36例，伴糖尿病19例，伴冠心病6例，吸煙15例。對照組男35例，女25例；年齡61～83歲，平均（75.18±6.65）歲；伴高血壓31例，伴糖尿病16例，伴冠心病4例，吸煙17例。兩組臨床資料比較差異無統計學意義，具有可比性。本研究經本院醫學倫理委員會審核批準。

納入標準：患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書；符合相關診斷標準[4]，MMSE評分為14～23分；年齡≥60歲。排除標準：精神疾病；過往存在顱腦手術、創傷病史；放化療和顱內惡性腫瘤；腦出血、腦梗死、短暫性腦缺血發作；其他原因導致的癡呆。

1.2 方法 采集兩組患者6 ml空腹靜脈血，選取部分血液標本，13 000 r/min離心10 min，收集血清標本，通過miR-9試劑盒提取miRNA，利用反轉錄試劑盒反轉錄為cDNA，保存在-80℃的冰箱內。根據PCR儀器說明書開展相關的檢測操作，選擇CFX manager 3.0軟件分析相對定量表達。選取部分血液標本2 500 r/min離心15 min，收集血清，選擇酶聯免疫吸附法檢測血清M-CSF、Hcy水平；選擇美國貝克曼AU680型全自動生化分析儀和上海東方順宇生物科技有限公司的試劑，嚴格遵循試劑說明書開展相關的檢測操作。

1.3 觀察指標 比較兩組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平檢測結果與MMSE評分，分析兩組MMSE評分與各項檢測指標的相關性。

1.4 統計學方法 采用SPSS 21.0統計軟件進行數據分析，計量資料以“±s”表示，比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平檢測結果與MMSE評分比較 實驗組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平均明顯高于對照組（P＜0.05），但MMSE評分明顯低于對照組（P＜0.05），見表1。

表1 兩組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平檢測結果與MMSE評分比較（±s）Table 1 Comparison of serum miR-9,M-CSF,Hcy levels and MMSE scores between the two groups(±s)

表1 兩組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平檢測結果與MMSE評分比較（±s）Table 1 Comparison of serum miR-9,M-CSF,Hcy levels and MMSE scores between the two groups(±s)

注：miR-9，Microrna-9；M-CSF，巨噬細胞刺激集落因子；Hcy，同型半胱氨酸；MMSE，簡易精神狀態量表

組別實驗組對照組t值P值例數60 60 miR-9（2-△△ct）8.24±1.18 5.55±0.94 13.811 5＜0.05 M-CSF（pg/ml）632.77±151.75 457.08±94.15 7.620 4＜0.05 Hcy（μmol/L）20.54±3.03 14.24±2.82 11.789 5＜0.05 MMSE評分（分）16.86±2.02 25.79±2.17 23.331 9＜0.05

2.2 兩組MMSE評分與各項檢測指標的相關性分析 老年癡呆患者的MMSE評分與血清miR-9、M-CSF、Hcy水平呈負相關（P＜0.05），見表2。

表2 MMSE評分與各項檢測指標的相關性Table 2 Correlation between MMSE score and various test indexes

3 討論

老年癡呆屬于一種認知功能障礙綜合征，發生時患者意識并無異常；其病理學特征不僅包括老年斑、神經元喪失，而且還包括神經元纖維纏結、血管淀粉樣病變等[5]。老年癡呆的發病原因復雜，相關臨床研究結果顯示，炎癥反應、神經細胞骨架改變、神經傳遞障礙、遺傳、年齡等因素與老年癡呆的發生、發展密切相關[6]。老年癡呆的發病具有隱匿性，發病初期易被忽視，當患者認知功能障礙癥狀明顯時，表示其病情已較危重，常規干預手段效果不佳。因此，準確和及早識別老年癡呆，同時進行有效的干預，能有效控制病程進展。選擇合適的生物學標志物早期診斷老年癡呆已成為現階段的研究熱點[7]。

血清微小RNA-9（miR-9）含量比較穩定，可將其作為診斷多種疾病的標志物。miR-9能調控多種基因表達，如突觸孔蛋白、神經突觸小泡磷酸酶1等，進而影響神經遞質功能、神經元活性；除此之外，miR-9還能在一定程度上調節和控制糖皮質激素感觸因子基因表達，阻礙神經元的相互運輸[8-9]。M-CSF是由星形膠質細胞與小膠質細胞合成的，通過與神經膠質細胞增生同族受體有效結合激活趨化因子，不僅能明顯增強小膠質細胞清道夫受體表達，而且還能明顯增強脂蛋白E受體，促進細胞增殖，損傷神經膠質細胞[10]。Hcy為甲硫氨酸代謝脫去甲基的衍生物之一，不但能促進氧自由基的生產，而且還能促進鈣離子超載，出現神經毒性；此外，Hcy還能增強神經元對毒性淀粉樣β蛋白的敏感性。當Hcy處于較高水平時，則會在一定程度上損傷血管內皮功能，在一定程度上影響脂質代謝，腦內小動脈發生粥樣硬化，腦血管發生缺血性損傷，認知功能出現障礙[11]。本研究結果顯示，實驗組血清miR-9、M-CSF、Hcy水平均明顯高于對照組（P＜0.05），表明，老年癡呆患者的血清miR-9、MCSF、Hcy水平明顯升高。另外，實驗組MMSE評分則明顯低于對照組（P＜0.05），老年癡呆患者的MMSE評分與血清miR-9、M-CSF、Hcy水平表現為負相關（P＜0.05）。本研究結果顯示，老年癡呆患者的MMSE評分與血清miR-9、M-CSF、Hcy水平存在顯著相關性，血清miR-9、M-CSF、Hcy水平越高，認知功能損害則越嚴重。相關臨床研究[12-13]發現，在早期診斷老年癡呆患者時，單獨檢測血清miR-9、MCSF、Hcy的診斷靈敏度、特異度分別為86.17%和78.02%、84.53%和74.09%、66.00%和75.86%；而聯合檢測的診斷靈敏度、特異度則為96.91%、92.28%；表明，聯合檢測血清miR-9、M-CSF、Hcy水平能明顯提高診斷靈敏度、特異度。

綜上所述，老年癡呆患者血清miR-9、M-CSF、Hcy水平顯著增加，且與認知功能損害密切相關，通過聯合檢測血清miR-9、M-CSF、Hcy水平，能為輔助診斷老年癡呆提供一定依據。