類風濕性關節炎患者血清GM-CSF含量檢測及其與炎性介質、抗體水平的相關性分析

劉登海 山東省鄆城縣人民醫院檢驗科 274700

類風濕性關節炎(RA)是以炎性滑膜炎為主要表現的系統性疾病，病因未明、呈慢性病程，多累及手足等小關節，隨病情進展可出現關節畸形、功能喪失，嚴重影響患者生活質量[1]。早期診斷并判斷嚴重程度對于RA治療方案確定、預期治療效果獲取等均有重要意義，故選擇高效敏感的血清學指標成為當下臨床研究的重點。粒細胞集落刺激因子(GM-CSF)是具有增殖、活化中性粒細胞系造血細胞功能的糖蛋白，既往研究證實RA患者關節液中存在大量高表達的GM-CSF，推測其表達異常參與了RA的發生發展[2]。為了明確GM-CSF在RA診斷、病情判斷中的價值，本次檢測RA患者及正常人群的血清GM-CSF含量，進一步探討GM-CSF含量與病情相關指標水平的內在聯系，現匯報如下。

1 資料與方法

1.1 病例資料 選擇2018年9月—2021年2月在本院接受住院治療的類風濕性關節炎患者98例作為觀察組，另選取同期在本院進行體檢的健康志愿者50例作為正常對照組，研究對象本人/家屬簽署知情同意書。正常對照組中男26例，女24例，年齡45～71歲，平均年齡(56.82±9.17)歲；觀察組中男50例，女48例，年齡46～73歲，平均年齡(55.79±9.63)歲。在性別、年齡分布中兩組差異不顯著(P>0.05)，具有可比性，研究獲醫院倫理委員會批準。

1.2 診斷標準 (1)每日晨僵≥1h，持續時間≥6周；(2)受累關節數目≥3個，持續時間≥6周；(3)腕關節、掌指關節、近端指關節受累，持續時間≥6周；(4)對稱性關節炎，持續時間≥6周；(5)伴類風濕皮下結節；(6)X線檢查可見骨關節改變；(7)血清類風濕因子含量異常升高，達陽性標準。上述7點中符合4條及以上，且排除其他原因所致關節炎者，即可確診RA。

1.3 入選標準 入組標準：(1)首次確診RA；(2)院外未接受自主其他藥物治療；(3)全程配合相關實驗室檢查、臨床數據獲取完整。排除標準：(1)合并其他原因所致全身感染性疾??；(2)合并系統性紅斑狼瘡、強直性脊柱炎等其他自身免疫性疾病；(3)合并惡性腫瘤性疾病。

1.4 檢測指標 入院即刻，抽取兩組患者的空腹肘靜脈血5.0ml，置入肝素化抗凝的無菌EP管中，3 500r/min離心10～15min，留取上層血清并凍存于-80℃低溫環境中備用。采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清中GM-CSF的含量；采用ELISA測定血清中炎癥介質白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-17(IL-17)、白介素-22(IL-22)的含量；采用雙抗體夾心ELISA法測定血清中抗RA33抗體、抗CCP(環瓜氨酸肽)抗體、抗角蛋白抗體(AKA)的含量。

2 結果

2.1 血清GM-CSF含量 正常對照組血清中GM-CSF含量為(30.82±6.19)ng/L，觀察組患者血清中GM-CSF含量為(173.29±22.51)ng/L。觀察組患者血清中GM-CSF的含量顯著高于正常對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2 炎癥介質 入院即刻，觀察組患者血清中炎癥介質IL-1β、IL-6、IL-17、IL-22的含量均顯著高于正常對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組血清中炎癥介質含量比較

2.3 RA相關抗體 入院即刻，觀察組患者血清中抗RA33抗體、抗CCP抗體、AKA的水平均顯著高于正常對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組血清中RA相關抗體水平比較

2.4 相關性分析 經Pearson檢驗發現，RA患者血清中GM-CSF的含量與炎癥介質IL-1β、IL-6、IL-17、IL-22的含量呈正相關，與RA相關抗體抗RA33抗體、抗CCP抗體、AKA的水平呈正相關(P<0.05)。見表3。

表3 RA患者血清中GM-CSF含量與炎癥介質、抗體水平相關關系

3 討論

較多研究證實，單核/巨噬細胞在滑膜組織中的浸潤是導致RA關節炎癥發生、關節功能障礙的主要原因，GM-CSF是單核細胞活化的重要因子，其作用后細胞呈多形性并出現貼壁現象(單核細胞向巨噬細胞分化)[3]，推測GM-CSF是RA發生及進展的原因之一，但具體相關關系目前尚未有明確報道。本次研究檢測RA患者、健康志愿者的血清GM-CSF含量并發現：與正常對照組比較，觀察組患者血清中GM-CSF的含量大幅增加，說明RA患者存在循環血中GM-CSF的異常高表達、GM-CSF參與RA的發生發展。

受累關節局部及全身炎癥反應是RA的主要病理表現，單核/巨噬細胞活化后可分泌多種炎癥因子，持續參與滑膜破壞及骨關節侵蝕，換言之RA患者全身炎癥反應程度可客觀反映RA整體病情嚴重程度[4]。IL-1β、IL-6均是臨床最多見的促炎因子，其水平可間接反映機體單核/巨噬細胞的激活狀態，已經有研究證實其大量分泌可損傷關節軟骨組織，同時可刺激B淋巴細胞合成自身抗體、促進類風濕因子形成[5-6]。IL-17是Th17細胞分泌的重要因子，可誘導促炎因子、趨化因子、基質金屬蛋白酶分泌，同時協同活化T細胞[7]。IL-22是Th17細胞分泌的另一因子，已經有研究在銀屑病患者關節液中發現其含量大幅增高，且抗IL-22治療有助于緩解炎癥反應，說明IL-22也具有促炎作用[8]。本次研究首先對比兩組研究對象血清中上述炎癥介質含量的差異，發現：與正常對照組比較，觀察組患者血清中IL-1β、IL-6、IL-17、IL-22的含量較高，這與既往研究結果吻合。進一步經Pearson檢驗發現，RA患者血清中GM-CSF的含量與IL-1β、IL-6、IL-17、IL-22含量呈正相關，證實高表達的GM-CSF可加重RA患者全身炎癥反應程度，GM-CSF含量可客觀反映RA患者的炎癥程度。

RA屬于自身免疫性疾病，其血清中自身抗體的檢出是鑒別RA與反應性關節炎、骨關節炎的重要標志[9]?？筊A33抗體、抗CCP抗體、AKA均是RA最為敏感、特異的抗體，抗RA33抗體多在RA早期出現；抗CCP抗體滴度較高是RA患者骨關節破壞嚴重的標志；AKA的出現可早于RA發病前，且隨訪后大部分最終進展至RA[10]。自身抗體滴度與RA病情嚴重程度緊密相關，本次研究發現：與正常對照組比較，觀察組患者血清中抗RA33抗體、抗CCP抗體、AKA的水平較高，說明RA患者存在上述抗體的異常高表達，是RA的特異性標志。進一步采用Pearson檢驗發現，RA患者血清中GM-CSF的含量與抗RA33抗體、抗CCP抗體、AKA水平呈正相關，說明高表達的GM-CSF可加重RA患者的自身免疫反應，再次說明GM-CSF含量與RA病情的一致性。

綜上所述，RA患者血清GM-CSF含量異常增高，且GM-CSF具體含量可客觀反映RA患者的全身炎癥反應程度、抗體滴度，可作為RA病情判斷的可靠指標，值得在日后臨床實踐中推廣應用。