芭蕉根質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究*

劉理燕，文雨霜，賀亞都，沈艷珍，馬 雪，李月婷，李勇軍△

（1.貴州醫(yī)科大學(xué)民族藥與中藥開發(fā)應(yīng)用教育部工程研究中心·省部共建藥用植物功效與利用國家重點實驗室，貴州 貴陽 550004；2.貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴州 貴陽 550004；3.貴州維康子帆藥業(yè)股份有限公司，貴州 貴陽 550004；4.貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省藥物制劑重點實驗室，貴州 貴陽 550004）

芭蕉根是芭蕉科植物芭蕉Musa basjooSied.et Zucc.的干燥根莖，廣泛分布于亞熱帶地區(qū)，在貴州、廣西、云南、四川、臺灣、海南均有分布［1-2］。作為貴州省少數(shù)民族習(xí)用藥材，主要用于治療水腫、天行熱病、消渴、腳氣、血淋、驚風(fēng)、黃疸、血崩、癰腫療瘡等，具有利尿、止渴、解毒、清熱功效［3-4］。目前主要針對芭蕉根的抗氧化、鎮(zhèn)痛、抑制α-葡萄糖苷酶、抗金黃色葡萄球菌活性，以及促成骨細胞增殖、礦化、分化的活性成分進行藥理學(xué)研究［5-8］。從芭蕉根中分離得到了黃酮類、皂苷類、香豆素類、多糖、蒽醌類、phenalenone類化學(xué)成分，其中phenalenone類是主要化學(xué)成分［9-14］，但本課題組在化學(xué)成分研究中未發(fā)現(xiàn)含量較高的成分。芭蕉根藥材已開發(fā)出腫痛舒噴霧劑、骨康膠囊等制劑［15］，原藥材作為中藥制劑基礎(chǔ)物質(zhì)，其質(zhì)量決定制劑的質(zhì)量，目前其質(zhì)量控制研究主要集中于指紋圖譜及大類成分含量測定［16-18］。本研究中通過對芭蕉根進行性狀、顯微及薄層鑒別，測定水分、灰分及浸出物含量，以完善芭蕉根藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為其開發(fā)利用提供參考。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

50I型顯微鏡（日本尼康公司），配有DS-Fi2型顯微成像系統(tǒng)；WP-ΜP-Ⅱ-20型超純水機（四川沃特爾水處理設(shè)備有限公司）；REPROSTAR3型薄層數(shù)碼成像系統(tǒng)（瑞士Camag公司）；EL204型電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司，精度為萬分之一）；DK-98-Ⅱ型水浴鍋（天津市泰斯特儀器有限公司）；KQ-300E型超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司，頻率為40 kHz，功率為300 W）；薄層層析硅膠G板［青島鼎康硅膠有限公司（廠家A），批號為20180108；青島海洋化工有限公司（廠家B），批號為20180115；煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司（廠家C），批號為20180101］。

1.2 試藥

芭蕉根對照藥材（中國食品藥品檢定研究院，批號為121264-200502）；所有試劑均為分析純；原植物及樣品均由貴陽中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥實驗室孫慶文教授鑒定為正品，藥材信息見表1，標(biāo)本存放于貴州醫(yī)科大學(xué)貴州省藥物制劑重點實驗室。

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀鑒別

芭蕉根呈圓柱形，具有棕色鱗片，直徑10～20 cm。切片不規(guī)則，長、寬5～15 cm，厚0.5～1.5 cm，表面棕黃色，凹凸不平，可見明顯纖維束，質(zhì)韌，不易折斷，斷面不整齊，纖維狀。氣香，味淡。

2.2 顯微鑒別

本品粉末呈灰褐色。淀粉粒極多，直徑6～105μm，多為單粒，復(fù)粒少見，海螺狀、腎形、類多邊形或不規(guī)則形，臍點點狀、短縫狀或人字形，層紋明顯；導(dǎo)管為螺紋及網(wǎng)紋；草酸鈣針結(jié)晶束或散在。

2.3 薄層色譜鑒別

取芭蕉根粉末1 g，加石油醚（60～90℃）30 mL，超聲處理15 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取芭蕉根對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。照2015年版《中國藥典（四部）》通則0502薄層色譜法試驗，吸取上述2種溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（20∶1，V/V）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品溶液色譜圖中，在與對照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上，分別顯相同顏色的斑點。色譜圖見圖1。

圖1 12批芭蕉根藥材薄層色譜圖（日光與365 nm）Fig.1 TLC chromatograms of 12 batches of Radix Musae（sunlight and 365 nm）

2.4 水分、總灰分及浸出物含量測定

水分照2015年版《中國藥典（四部）》通則0832第二法烘干法測定；總灰分照2015年版《中國藥典（四部）》通則2302灰分測定法測定；浸出物照2015年版《中國藥典（四部）》通則2201浸出物測定法中熱浸法測定，溶劑為50%乙醇。結(jié)果見表2。根據(jù)測定結(jié)果，初步擬訂芭蕉根水分不得過15.0%，總灰分不得過9.0%，浸出物含量不得少于5.5%。

表2 芭蕉根水分、總灰分、浸出物含量測定結(jié)果（%，n=2）Tab.2 Results of content determination of moisture，total ash and extract content of Radix Musae（%，n=2）

圖3 不同相對濕度薄層色譜圖（日光與365 nm）Fig.3 TLC chromatograms of different relative humidities（sunlight and 365 nm）

2.5 耐用性試驗

選擇3個廠家的薄層色譜硅膠G板、不同相對濕度（30%，50%，70%）、不同溫度（10，25，35℃），以及分別放置（0，1，2，3 d）的穩(wěn)定性，色譜圖見圖2至圖5。

圖2 不同廠家薄層色譜硅膠G板薄層色譜圖（日光與365 nm）Fig.2 TLC chromatograms of TLC silica gel G plate with different manufacturers（sunlight and 365 nm）

圖5 穩(wěn)定性考察薄層色譜圖（日光與365 nm）Fig.5 TLC chromatograms of the stability test（sunlight and 365 nm）

3 討論

查閱文獻［9-11］，在薄層色譜鑒別試驗中，分別考察供試品溶液制備的提取溶劑、提取方法、展開劑等，曾采用甲醇超聲處理芭蕉根藥材，展開劑為石油醚-丙酮（7∶4，V/V）時多數(shù)藥材斑點對應(yīng)較好，但放置時間較長時藥材斑點明顯減弱。考察了不同廠家、溫度、相對濕度、放置時間，結(jié)果顯示薄層色譜法可鑒別芭蕉根藥材，方法穩(wěn)定，重復(fù)性好。錢海兵等［19］研究了芭蕉根不同提取物的抗炎鎮(zhèn)痛作用，其80%乙醇提取物及水提取物的鎮(zhèn)痛活性較好，而以水或乙醇作為浸出物的提取溶劑時，發(fā)現(xiàn)以水作為溶劑時過濾困難，以乙醇作為溶劑時浸出物較低。因此，選用50%乙醇作為浸出物的提取溶劑有利于藥材質(zhì)量的控制。

經(jīng)過對芭蕉根化學(xué)成分的系統(tǒng)研究，未見明顯含量較高的指標(biāo)性成分；采用高效液相色譜法，配有蒸發(fā)光散射檢測器、陣列二極管檢測器等對可測定成分進行檢測，也未發(fā)現(xiàn)明顯可測成分，難以選擇芭蕉根中的指標(biāo)性成分。因此，芭蕉根藥材的含量測定有待進一步研究。

綜上所述，本研究中建立的性狀鑒別、顯微鑒別、薄層色譜法等定性檢查方法操作簡便，重復(fù)性好，可用于芭蕉根藥材的質(zhì)量控制。