炎癥性腸病患兒HP 感染與GAS、chemerin 和CHE 的關(guān)系

林仁德 彭瓊 馮廣斌

炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease，IBD）作為一類腸道炎癥性疾患，其發(fā)病多累及直腸、結(jié)腸，甚至可累及整個(gè)消化道，患者除常見(jiàn)的腹瀉、腹痛癥狀表現(xiàn)外，亦可出現(xiàn)貧血、發(fā)熱、營(yíng)養(yǎng)不良等全身癥狀表現(xiàn)［1-2］。IBD 發(fā)病機(jī)制目前尚無(wú)統(tǒng)一的定論，但大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為腸道黏膜免疫功能異常所引發(fā)的免疫炎癥反應(yīng)屬于其發(fā)病的重要因素，此外該病還與環(huán)境、遺傳、感染等諸多因素有關(guān)［3-4］。幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，HP）最早成功分離于慢性活動(dòng)性胃炎患者胃黏膜組織活檢中，屬于目前已知的唯一可在人體胃內(nèi)生存的微生物［5］。多數(shù)患者在感染HP 早期并未伴隨明顯感染癥狀，部分感染患者可出現(xiàn)腹痛、腹脹等急性胃炎癥狀，若不及時(shí)治療，可遷延數(shù)年甚至終生。相關(guān)研究顯示，HP 感染后所釋放的毒力因子以及引發(fā)的炎癥反應(yīng)均可加劇胃腸道黏膜損傷［6-7］，而其在胃黏膜局部引發(fā)的免疫炎癥反應(yīng)亦可引起胃外促炎因子釋放，加重腸道炎癥反應(yīng)程度。HP 感染早期診斷尚存在一定難度，胃泌素（gastrin，GAS）、脂肪細(xì)胞因子（chemerin）、膽堿酯酶（cholinesterase，CHE）均被指出可在HP 感染發(fā)生后出現(xiàn)水平波動(dòng)［8-9］。本次研究將探究IBD 患兒HP 感染與血清GAS、chemerin、CHE 水平的關(guān)系，現(xiàn)將所得成果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年6 月至2020 年12 月期間于潁上縣人民醫(yī)院就診的106 例IBD 患兒臨床資料，根據(jù)患兒HP 感染情況分為感染組22 例與未感染組84 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患兒均符合《炎癥性腸病的診斷和治療進(jìn)展》中IBD 相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［10］；②均接受本次研究所涉及指標(biāo)的檢查；③感染組均經(jīng)14C 尿素呼氣試驗(yàn)檢查確認(rèn)感染HP 者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并急性感染性結(jié)腸炎者；②存在肝腎等重要臟器功能障礙者；③臨床資料保存不完整者。感染組22 例患者中，男13 例，女9 例，平均年齡（7.32±2.10）歲，疾病活動(dòng)度［11］：輕度活動(dòng)14 例，中度活動(dòng)6 例，重度活動(dòng)2 例；未感染組84 例患者中，男48 例，女36 例，平均年齡（7.23±2.18）歲，疾病活動(dòng)度：輕度活動(dòng)56 例，中度活動(dòng)22 例，重度活動(dòng)6 例。兩組性別、年齡、疾病活動(dòng)度比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），均衡可比。本研究符合赫爾辛人體試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患兒監(jiān)護(hù)人均簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

收集IBD 患兒清晨空腹外周靜脈血3 mL，經(jīng)3 000 r/min 離心10 min，離心半徑10 cm，分離血清，置于-60℃?zhèn)錂z，采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）對(duì)血清GAS、chemerin 水平進(jìn)行測(cè)定，采用全自動(dòng)生化儀及其相關(guān)試劑盒（上海酶聯(lián)生物科技有限公司）測(cè)定血清CHE 水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組血清GAS、chemerin、CHE 水平比較

感染組血清GAS、chemerin 水平顯著高于未感染組，CHE 水平顯著低于未感染組，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清GAS、chemerin、CHE 水平比較（±s）Table 1 Comparison of levels of serum GAS，chemerin and CHE between the two groups（±s）

表1 兩組血清GAS、chemerin、CHE 水平比較（±s）Table 1 Comparison of levels of serum GAS，chemerin and CHE between the two groups（±s）

組別感染組未感染組t 值P 值n 22 84 GAS（pg/mL）157.29±27.39 130.36±15.42 6.086＜0.001 chemerin（μg/L）129.86±10.36 114.36±10.56 6.152＜0.001 CHE（U/L）4 851.29±824.62 7 065.95±1 429.67 6.953＜0.001

2.2 血清GAS、chemerin、CHE 水平與IBD 患兒HP 感染的相關(guān)性分析

Logistic 回歸分析顯示，血清GAS、chemerin、CHE 水平與IBD 患兒HP 感染具有顯著相關(guān)性（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 血清GAS、chemerin、CHE 水平與IBD 患兒HP 感染的相關(guān)性分析Table 2 Correlation between levels of serum GAS，chemerin and CHE and HP infection in children with IBD

2.3 血清GAS、chemerin、CHE 水平診斷IBD 患兒HP 感染的效能分析

血清GAS、chemerin、CHE 水平診斷IBD 患兒HP 感 染 的ROC 曲 線AUC 分 別 為0.788、0.857、0.917，截?cái)嘀捣謩e為152.52 pg/mL、119.89 μg/L、6233.64 U/L，診斷效能良好（P＜0.05）。見(jiàn)表3、圖1。

圖1 血清GAS、chemerin、CHE 水平診斷IBD 患兒HP感染的ROC 曲線Figure 1 ROC curves of levels of serum GAS，chemerin and CHE in the diagnosis of HP infection in children with IBD

表3 ROC 曲線參數(shù)Table 3 ROC curve parameters

3 討論

IBD 患者發(fā)病后除伴隨腸道黏膜損傷外，亦可能出現(xiàn)腸道功能衰竭、惡性腫瘤等一系列嚴(yán)重并發(fā)癥，大致發(fā)病過(guò)程為具備易感因素者在多種致病因素影響下出現(xiàn)腸道菌群的紊亂變化，使腸道特異性免疫及天然免疫反應(yīng)異常激活，從而使腸粘膜屏障遭受嚴(yán)重?fù)p傷，并出現(xiàn)免疫炎癥反應(yīng)加劇、炎性增生及潰瘍不愈等現(xiàn)象，部分患者病情加重則與HP 感染有關(guān)［12］，但其HP 感染特異性癥狀并不顯著，易引起臨床漏診，故探究IBD 患者HP感染相關(guān)血清學(xué)指標(biāo)變化極為必要。

GAS 作為一類重要胃腸激素，主要由胃竇G 細(xì)胞分泌，可促進(jìn)胃酸分泌，同時(shí)可與乙酰膽堿、組胺協(xié)同作用，調(diào)節(jié)胃腸道功能［13］。Chemerin 炎性趨化作用較強(qiáng)，可增加機(jī)體炎性因子分泌。本研究選取106 例IBD 患兒，分析其HP 感染情況，結(jié)果顯示HP感染22 例，未感染84 例。比較兩組血清血清GAS、chemerin 水平，發(fā)現(xiàn)感染組的上述指標(biāo)顯著高于未感染組。分析其中原因，可能是由于HP 感染可產(chǎn)生大量尿素氮，促進(jìn)胃內(nèi)尿素水解，使胃表pH 升高，導(dǎo)致胃酸對(duì)GAS 分泌的生理抑制作用減弱，同時(shí)胃內(nèi)氨可促進(jìn)胺的形成，刺激G 細(xì)胞分泌GAS。陳瑾等［14］指出，胃潰瘍HP 感染患者的血清GAS 水平顯著高于未感染組。還有研究顯示，HP 感染可導(dǎo)致胃腸激素分泌紊亂，引發(fā)促胃液素釋放肽刺激GAS水平上升，在HP 根除治療后其血清GAS 可逐步恢復(fù)正常水平［15］。IBD 患兒HP 感染伴腸黏膜固有層炎性浸潤(rùn)，chemerin 可參與促進(jìn)免疫效應(yīng)細(xì)胞向炎癥部位的遷移，進(jìn)一步增強(qiáng)炎癥反應(yīng)。另外，GAS水平升高可促進(jìn)中性粒細(xì)胞生成各類蛋白酶，使chemerin 前體異常活化，引起血清chemerin 水平上升。本研究證明觀察組患者的chemerin 水平明顯升高，可為臨床IBD 患者HP 感染的診斷提供參考。本研究還發(fā)現(xiàn)，血清GAS、chemerin 水平與IBD 患兒HP 感染具有顯著相關(guān)性，且對(duì)IBD 患兒HP 感染有良好的診斷價(jià)值，說(shuō)明血清GAS、chemerin 水平可作為HP 檢測(cè)呼氣試驗(yàn)輔助手段。

CHE 作為一類以多種同工酶形式存在于機(jī)體的糖蛋白，可有效反映肝功能，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)其水平變化與機(jī)體炎癥反應(yīng)密切相關(guān)［16］。本研究中感染組血清CHE 水平較未感染組明顯更低，這與相關(guān)研究結(jié)論相符［17］。Logistic 回歸分析顯示，血清CHE 水平與IBD 患兒HP 感染具有顯著相關(guān)性，提示IBD 患兒感染HP 可伴隨血清CHE 水平的下降。ROC 曲線進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，血清CHE 診斷IBD 患兒HP 感染的曲線AUC 為0.917，提示在CHE 水平達(dá)到相應(yīng)臨界值后其對(duì)IBD 患兒HP 感染的診斷效能良好。分析原因，HP 感染后，患兒機(jī)體內(nèi)多種細(xì)胞因子水平上升，局部炎癥反應(yīng)加劇，而膽堿抗炎通路屬于機(jī)體固有免疫的神經(jīng)環(huán)路，可參與IBD 患兒免疫炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展，使CHE 與單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞表面的特異性尼古丁-乙酰膽堿受體相結(jié)合，進(jìn)而下調(diào)轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)，并促進(jìn)T 淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞趨化、動(dòng)員，共同參與抑制炎癥反應(yīng)，使CHE 大量消耗，表現(xiàn)出血清表達(dá)水平的下降。此外，研究表明，血清CHE水平與危重感染者的急性生理學(xué)與慢性健康狀況評(píng)分系統(tǒng)Ⅱ呈負(fù)相關(guān)，是影響患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，進(jìn)一步為本研究提供支持［18］。

本文證實(shí)炎癥性腸病患兒HP 感染與GAS、chemerin 和CHE 具有相關(guān)性，但研究也存在不足之處，如樣本量納入偏少，感染與未感染患者例數(shù)存在不平衡情況，后續(xù)將擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步驗(yàn)證結(jié)論。

綜上所述，發(fā)生HP 感染的IBD 患兒在血清GAS、chemerin、CHE 表達(dá)方面與未感染患兒存在差異，其上述指標(biāo)水平與感染狀況具有顯著相關(guān)性，可用于診斷該病患兒HP 感染，且具備較佳效能。