美花鐵線蓮莖乙醇提取物正丁醇萃取部位化學(xué)成分的提取和鑒定

王嘯洋 衛(wèi)柯 陸云陽(yáng) 佟菲 張艷華 湯海峰

毛茛科(Ranuneulaeeae)鐵線蓮屬(Clematis)植物在全世界有370余種，中國(guó)約產(chǎn)170種(含變種)，全國(guó)各地均有分布，以西南和華中地區(qū)居多[1-10]。該屬在中國(guó)民間作為藥用的有77種[11]，其中川木通(小木通或繡球藤的干燥藤莖)[12]和威靈仙(威靈仙、棉團(tuán)鐵線蓮或東北鐵線蓮的干燥根莖)[12]為《中國(guó)藥典》2020版收錄品種，其他常見的藥用品種有百部仙靈(圓錐鐵線蓮)、黑腳威靈仙(柱果鐵線蓮)、大木通(鈍齒鐵線蓮)、小木通(毛蕊鐵線蓮)等，多具有祛風(fēng)除濕、消腫止痛、舒筋活血、利尿通淋、痛經(jīng)下乳等功效[13]。現(xiàn)代藥學(xué)研究表明，本屬植物含有三萜皂苷、黃酮、香豆素、木脂素、生物堿等化學(xué)成分，具有抗腫瘤、抗炎、鎮(zhèn)痛、抑菌等藥理作用[14-15]。課題組前期已對(duì)多種鐵線蓮屬植物進(jìn)行了化學(xué)成分和藥理作用研究，分離鑒定了三萜皂苷、黃酮、木脂素等多種成分，其中部分化合物顯示顯著抗腫瘤、抗炎、抗心肌缺血等藥理活性[16-21]。美花鐵線蓮(Clematispotaninii)分布于西藏、云南、四川、甘肅、陜西等地，以莖入藥，有祛風(fēng)濕、清肺熱、止痢、消食等功效[1]。在前期研究基礎(chǔ)上[20]，本文繼續(xù)報(bào)道對(duì)該植物莖乙醇提取物正丁醇萃取部位化學(xué)成分的研究工作，為該植物的進(jìn)一步開發(fā)研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

液相色譜儀為Dionex P680型(美國(guó)Dionex公司)，配YMC-Pack R&D ODS-A半制備液相色譜柱(20 × 250 mm，5 μm，日本YMC公司)；質(zhì)譜儀為Micromass Quattro(美國(guó)Waters公司)；氣相色譜儀為Finnigan Voyager(美國(guó)Finnigan公司)，配L-Chirasil-Val氣相色譜柱(25 m × 0.32 mm，0.25 μm，美國(guó)Agilent公司)；旋光儀為Perkin-Elmer 341型(美國(guó)Perkin-Elmer公司)；核磁共振(nuclear magnetic resonance，NMR)儀為Bruker AVANCE-500型(瑞士Bruker公司)。柱色譜與薄層色譜硅膠(青島海洋化工廠)，反相柱色譜硅膠(ODS-A，日本YMC公司)，Sephadex LH-20凝膠柱色譜填料(瑞典GE公司)，色譜純甲醇(天津科密歐化學(xué)試劑公司)，其他分析純?cè)噭?天津富宇精細(xì)化工公司)，水為純凈水。

藥材于2015年8月采自陜西省秦嶺太白山區(qū)域，經(jīng)陜西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院生藥教研室王繼濤教授鑒定為毛茛科鐵線蓮屬美花鐵線蓮Clematispotaninii的莖，標(biāo)本(20150813)存于空軍軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)系中藥與天然藥物學(xué)教研室。

1.2 提取與分離

取美花鐵線蓮的干燥莖7.5 kg，粉碎成粗粉，加入3倍量70%乙醇加熱回流提取3次(每次2小時(shí))，合并提取液，減壓濃縮得481 g浸膏，浸膏用5 L水分散，依次用等體積石油醚和水飽和正丁醇萃取4次，得正丁醇萃取物170 g。正丁醇萃取物用硅膠柱色譜進(jìn)行分離，三氯甲烷—甲醇—水(50∶1∶0 ～ 65∶35∶5)梯度洗脫，經(jīng)薄層色譜檢識(shí)合并，得到Fr.1～Fr.4四個(gè)流份。

Fr.1(4.5 g)用硅膠柱色譜分離，三氯甲烷—甲醇—水(9∶1∶0.02 ～ 8∶2∶0.08)梯度洗脫，得Fr.1.1～Fr.1.6，F(xiàn)r.1.2和Fr.1.4經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜(三氯甲烷—甲醇 = 1∶1)分離得Fr.1.2.1～Fr.1.2.8和Fr.1.4.1～Fr.1.4.6；Fr.1.2.3～Fr.1.2.5合并后經(jīng)重結(jié)晶得到化合物1(56.0 mg)，F(xiàn)r.1.4.3～Fr.1.4.5合并后經(jīng)重結(jié)晶得到化合物2(134.0 mg)。

Fr.2(14.2 g)用硅膠柱色譜分離，三氯甲烷—甲醇—水(9∶1∶0.02～8∶2∶0.08)梯度洗脫，得Fr.2.1～Fr.2.5，F(xiàn)r.2.4經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜(三氯甲烷—甲醇=1∶1)分離得Fr.2.4.1～Fr.2.4.8，從Fr.2.4.3～Fr.2.4.6合并液中析出白色粉末狀物質(zhì)，為化合物3(45.6 mg)。

Fr.3(26.4 g)用硅膠柱色譜分離，三氯甲烷—甲醇—水(9∶1∶0.02～7∶3∶0.10)梯度洗脫，得Fr.3.1～Fr.3.6，F(xiàn)r.3.2經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱色譜(三氯甲烷—甲醇=1∶1)除去水溶性雜質(zhì)后，用反相ODS柱色譜分離，甲醇—水(3∶7～10∶0)梯度洗脫，得Fr.3.2.1～Fr.3.2.5；其中Fr.3.2.2用半制備高效液相色譜(semi-preparative high performance liquid chromatography，Semi-Prep HPLC)分離(甲醇—水=30∶70)，得化合物4(200.0 mg，tR9.3分鐘)、化合物5(90.0 mg，tR12.5分鐘)和化合物6(20.6 mg，tR14.5分鐘)。

Fr.4(42.5g)用硅膠柱色譜分離，三氯甲烷—甲醇—水(9∶1∶0.02～6∶4∶0.5)梯度洗脫，得到Fr.4.1～Fr.4.8，F(xiàn)r.4.2用Sephadex LH-20凝膠柱色譜(三氯甲烷—甲醇=1∶1)除去水溶性雜質(zhì)后，經(jīng)反相ODS柱色譜分離，甲醇—水(2∶8～10∶0)梯度洗脫，得Fr.4.2.1～Fr.4.2.6，其中Fr.4.2.2用Semi-Prep HPLC純化(甲醇—水=55∶45)，得化合物7(122.8 mg，tR8.6分鐘)和化合物8(90.2 mg，tR13.7分鐘)。

1.3 酸水解和糖基的衍生分析

稱取待測(cè)化合物5 mg，加入5 mL三氟乙酸溶液(2 mol/L)，密閉反應(yīng)8小時(shí)(110 ℃)；反應(yīng)后靜置放冷，加入20 mL 純凈水，等體積乙酸乙酯萃取3次，合并水層，濃縮蒸干所得殘余物與2 mgL-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽溶于2 mL吡啶，于60 ℃水浴中反應(yīng)1小時(shí)，反應(yīng)完畢后用氮?dú)獯蹈桑幌驓堄辔镏屑尤?.2 mLN-(三甲基硅基)咪唑和2 mL吡啶，60 ℃水浴反應(yīng)1小時(shí)，氮?dú)獯蹈桑粴堄辔镉盟稚ⅲ玫润w積環(huán)己烷萃取3次，蒸干得糖基的三甲基硅醚化衍生物。

對(duì)衍生物進(jìn)行氣相色譜(gas chromatography，GC)分析，載氣：氮?dú)猓贿M(jìn)樣量：1 μL；檢測(cè)器溫度：280 ℃；氣化溫度：250 ℃；程序升溫：初始柱溫為140 ℃，保持5分鐘，以2 ℃/分鐘的速度升溫到180 ℃，保持5分鐘，再以10 ℃/分鐘的速升溫到320 ℃，保持10分鐘。標(biāo)準(zhǔn)糖用上述同樣方法衍生并進(jìn)行分析，根據(jù)樣品保留時(shí)間和峰面積來確定化合物中的糖基種類和含量比例。

2 結(jié)果

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

按照1.2所述方法步驟，從美花鐵線蓮莖乙醇提取物的正丁醇萃取部位共分離鑒定了8個(gè)化合物1～8，包括4個(gè)三萜類(化合物1、2、7和8)、1個(gè)甾醇苷類(化合物3)和3個(gè)木脂素類(化合物4、5和6)化合物(圖1)，所有化合物均為首次從本植物中得到，4為首次從本屬植物中發(fā)現(xiàn)。

2.2 化合物1

白色針晶，易溶于三氯甲烷，m.p. 256～258℃，Libermann-Burchard反應(yīng)呈陽(yáng)性，濃硫酸乙醇溶液(體積分?jǐn)?shù)10%)中顯紫色。電噴霧質(zhì)譜(Electro Spray Ionization-Mass Spectroscopy，ESI-MS)給出[M+Na]+m/z449，結(jié)合其13C-NMR(125 MHz, CDCl3)數(shù)據(jù)推測(cè)分子式為C30H50O。該化合物的1H-NMR(500 MHz, CDCl3)給出8個(gè)三萜類化合物的特征甲基質(zhì)子信號(hào)：δH0.72 (3H，s，H-24)，0.85 (3H，s，H-25)，0.86 (3H，d，J=6.5Hz，H-23)，0.94 (3H，s，H-29)，0.99 (3H，s，H-30)，1.00 (3H，s, H-26)，1.03 (3H，s，H-27)和1.17 (3H，s，H-28)。

13C-NMR譜及DEPT譜給出30個(gè)碳信號(hào)，包括8個(gè)甲基碳信號(hào)、11個(gè)亞甲基碳信號(hào)、5個(gè)次甲基碳信號(hào)和6個(gè)季碳信號(hào)(含1個(gè)羰基碳信號(hào))，具體如下：δC22.0 (C-1)，41.1 (C-2)，212.8 (C-3)，57.9 (C-4)，41.8 (C-5)，41.0 (C-6)，18.0 (C-7)，52.8 (C-8)，37.1 (C-9)，59.2 (C-10)，35.4 (C-11)，30.2 (C-12)，39.4( C-13)，38.0 (C-14)，32.5 (C-15)，35.7 (C-16)，29.7 (C-17)，42.5 (C-18)，35.1 (C-19)，28.0 (C-20)，32.2 (C-21)，39.0 (C-22)，6.6 (C-23)，14.4 (C-24)，17.6 (C-25)，20.0 (C-26)，18.3 (C-27)，31.8 (C-28)，31.5 (C-29)，34.8 (C-30)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[22]，故鑒定該化合物為木栓酮。

圖1 從美花鐵線蓮中分離到的化合物1～8的化學(xué)結(jié)構(gòu)

2.3 化合物2

白色針晶，易溶于三氯甲烷，m.p. 284～287℃，Libermann-Burchard反應(yīng)呈陽(yáng)性，濃硫酸乙醇溶液(體積分?jǐn)?shù)10%)中顯紫色。ESI-MS給出[M+Na]+m/z451，結(jié)合其13C-NMR(125 MHz, CDCl3)譜推測(cè)分子式為C30H52O。該化合物的1H-NMR(500 MHz, CDCl3)給出8個(gè)三萜類化合物的特征甲基質(zhì)子信號(hào)：δH0.86 (3H，s，H-24)，0.92 (3H，s，H-23)，0.94 (3H，s，H-25)，0.96 (3H，s，H-30)，0.99 (3H，s，H-29)，1.01 (3H，s, H-26)，1.02 (3H，s，H-27)和1.15 (3H，s，H-28)，1個(gè)特征的次甲基質(zhì)子信號(hào)δH3.71 (1H，br s，H-3)。

13C-NMR譜及DEPT譜顯示，化合物2比化合物1少1個(gè)羰基碳信號(hào)，多出1個(gè)連氧的次甲基碳信號(hào)，且化學(xué)位移差別主要在A環(huán)，具體如下：δC15.6 (C-1)，32.2 (C-2)，72.6 (C-3)，49.0 (C-4)，36.8 (C-5)，41.7 (C-6)，17.4 (C-7)，53.0 (C-8)，38.2 (C-9)，61.2 (C-10)，35.4 (C-11)，30.5 (C-12)，37.7 (C-13)，39.5 (C-14)，32.8 (C-15)，36.0 (C-16)，29.8 (C-17)，42.7 (C-18)，35.2 (C-19)，28.0 (C-20)，35.0 (C-21)，39.1 (C-22)，11.5 (C-23)，16.2 (C-24)，18.1 (C-25)，18.5 (C-26)，20.0 (C-27)，31.9 (C-28)，34.8 (C-29)，31.6 (C-30)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[23]，故鑒定該化合物為表木栓醇。

2.4 化合物3

白色無(wú)定形粉末，m.p. 284～286℃，Libermann-Burchard和Molish反應(yīng)呈陽(yáng)性，濃硫酸乙醇溶液(體積分?jǐn)?shù)10%)中顯紫色。以3種TLC展開系統(tǒng)(石油醚—丙酮、環(huán)己烷—乙酸乙酯和三氯甲烷—甲醇)展開，與β-胡蘿卜苷對(duì)照品的Rf值和顯色反應(yīng)一致，并且與對(duì)照品混合熔點(diǎn)不下降，推測(cè)其為β-胡蘿卜苷。

該化合物的13C-NMR譜(125 MHz, C5D5N) 數(shù)據(jù)為δC: 37.6 (C-1)，30.3 (C-2)，78.4 (C-3)，39.8 (C-4)，140.8 (C-5)，121.7 (C-6)，32.3 (C-7)，32.0 (C-8)，50.4 (C-9)，36.7 (C-10)，21.1 (C-11)，39.2 (C-12)，42.4 (C-13)，56.7 (C-14)，24.5 (C-15)，28.6 (C-16)，56.4 (C-17)，12.1 (C-18)，19.3 (C-19)，36.3 (C-20)，19.1 (C-21)，34.4 (C-22)，26.5 (C-23)，46.0 (C-24)，29.5 (C-25)，19.9 (C-26)，19.4 (C-27)，23.5 (C-28)，12.1 (C-29)，Glc (葡萄糖)C-1～C-6 (102.5，75.4，78.4，71.8，78.1，62.9)，與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)基本一致[24]，故鑒定該化合物為β-胡蘿卜苷。

2.5 化合物4

該化合物13C-NMR譜及DEPT譜給出26個(gè)碳信號(hào)，包括12個(gè)隸屬于兩個(gè)芳環(huán)的碳信號(hào)、6個(gè)隸屬于六碳糖的碳信號(hào)、2個(gè)甲氧基碳信號(hào)、2個(gè)羥甲基碳信號(hào)、2個(gè)亞甲基碳信號(hào)和2個(gè)次甲基碳信號(hào)，具體如下：δC116.8 (C-1)，146.7 (C-2)，146.3 (C-3)，113.9 (C-4)，36.3 (C-5)，44.7 (C-6)，61.5 (C-6a)，45.0 (C-7)，61.6 (C-7a)，36.3 (C-8)，136.7 (C-9)，123.0 (C-10)，133.5 (C-1’)，114.5 (C-2’)，150.7 (C-3’)，149.1 (C-4’)，116.7 (C-5’)，122.5 (C-6’)，Glc C-1～C-6 (103.1，75.4，79.0，71.7，79.3，62.8)，56.3 (3’-OCH3)，56.3 (4’-OCH3)。以上信息提示化合物4為由兩個(gè)苯丙素類分子及一分子葡萄糖組成的木脂素苷類化合物，波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[25]，故鑒定該化合物為sargentodoside D。

2.6 化合物5

該化合物的13C-NMR譜及DEPT譜給出32個(gè)碳信號(hào)，包括12個(gè)隸屬于兩個(gè)芳環(huán)的碳信號(hào)、12個(gè)隸屬于兩組六碳糖的碳信號(hào)、2個(gè)甲氧基碳信號(hào)、1個(gè)羥甲基碳信號(hào)、2個(gè)亞甲基碳信號(hào)和3個(gè)次甲基碳信號(hào)，具體如下：δC139.4 (C-1)，111.5 (C-2)，149.9 (C-3)，147.6 (C-4)，116.6 (C-5)，119.3 (C-6)，83.7 (C-7)，54.3 (C-8)，60.5 (C-9)，135.6 (C-1')，114.2 (C-2')，150.7 (C-3')，146.9 (C-4')，116.9 (C-5')，121.7 (C-6')，33.8 (C-7')，43.5 (C-8')，73.7 (C-9')，Glc I C-1～C-6 (102.8，75.4，79.0，71.7，79.3，62.8)，Glc II C-1～C-6 (102.9，75.4，79.1，71.7，79.3，62.9)，56.4 (3’-OCH3)，56.4 (4’-OCH3)。以上信息提示化合物5為由兩個(gè)苯丙素類分子及兩分子葡萄糖組成的木脂素苷類化合物，波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[26]，故鑒定該化合物為落葉松脂醇-4,4’-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

2.7 化合物6

分析13C-NMR譜及DEPT譜數(shù)據(jù)，化合物6比化合物5少1組六碳糖碳信號(hào)，具體如下：δC139.3 (C-1)，111.2 (C-2)，149.7 (C-3)，47.5 (C-4)，116.3 (C-5)，119.2 (C-6)，83.7 (C-7)，54.3 (C-8)，60.2 (C-9)，135.6 (C-1’)，114.2 (C-2’)，150.6 (C-3’)，146.7 (C-4’)，116.8 (C-5’)，121.5 (C-6’)，33.7 (C-7’)，43.3 (C-8’)，73.5 (C-9’)，Glc C-1～C-6 (102.8，75.3，79.1，71.1，79.3，62.9)，56.3 (3’-OCH3)，56.4 (4’-OCH3)。上述波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[26]，故鑒定該化合物為落葉松脂醇-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

2.8 化合物7

1H-NMR給出6個(gè)苷元甲基質(zhì)子信號(hào)：δH0.84 (3H，s，H-29)，0.85 (3H，s，H-30)，0.96 (3H，s，H-25)，1.05 (3H，s，H-26)，1.12 (3H，s，H-24)和1.15 (3H，s，H-27)；6個(gè)糖端基質(zhì)子信號(hào)：δH4.95 (1H，d，J=8.0 Hz，Glc II H-1)，5.08 (1H，d，J=6.2 Hz，Ara H-1)，5.15 (1H，d，J=8.0 Hz，Xyl H-1)，5.86 (1H，s，28-O-Rha H-1)，6.23 (1H，d，J= 8.2 Hz，Glc I H-1)和6.35 (1H，s，3-O-Rha H-1)；3-O-Rha和28-O-Rha上的甲基質(zhì)子信號(hào)分別為：δH1.51 (3H，d，J=6.2 Hz)和1.67 (3H，d，J=6.1 Hz)；苷元特征質(zhì)子信號(hào)：δH3.12 (1H，dd，J=3.6，13.2 Hz，H-18)和5.34 (1H，br s，H-12)。

13C-NMR給出δC：39.2 (C-1)，26.9 (C-2)，81.3 (C-3)，44.0 (C-4)，48.2 (C-5)，18.6 (C-6)，33.2 (C-7)，40.4 (C-8)，48.5 (C-9)，37.3 (C-10)，24.1 (C-11)，123.2 (C-12)，144.4 (C-13)，42.4 (C-14)，28.6 (C-15)，23.7 (C-16)，47.5 (C-17)，42.0 (C-18)，46.7 (C-19)，31.2 (C-20)，34.3 (C-21)，33.2 (C-22)，64.3 (C-23)，14.3 (C-24)，16.5 (C-25)，17.9 (C-26)，26.4 (C-27)，176.9( C-28)，33.5 (C-29)，24.2 (C-30)，Ara C-1～C-5 (105.1，76.0，75.5，69.9，66.4)，3-O-Rha C-1～C-6 (101.7，72.4，83.1，73.5，70.3，18.8)，Xyl C-1～C-5 (107.6，76.0，78.9，71.6，67.9)，Glc I C-1～C-5 (96.0，74.4，79.1，71.2，78.7，69.6)，Glc II C-1～C-6 (105.1，75.7，76.6，78.7，77.4，61.6)，28-O-Rha C-1～C-6 (103.1，72.8，73.2，74.2，70.6，18.7)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[29]，故鑒定該化合物為sieboldnoside A。

2.9 化合物8

1H-NMR給出7個(gè)苷元甲基質(zhì)子信號(hào)：δH0.87 (3H，s，H-25)，0.90 (3H，s，H-30)，0.91(3H，s，H-29)，1.08 (3H，s，H-26)，1.15 (3H，s，H-24)，1.26 (3H，s，H-27)和1.32 (3H，s，H-23)；6個(gè)糖端基質(zhì)子信號(hào)：δH4.98 (1H，d，J=7.9 Hz，Glc II H-1)，5.05 (1H，d，J=8.0 Hz，Xyl H-1)，5.95 (1H，d，J=4.0 Hz，Rib H-1)，5.86 (1H，s，28-O-Rha H-1)，6.23 (1H，d，J= 8.5 Hz，Glc I H-1)和6.32 (1H，s，3-O-Rha H-1)；3-O-Rha和28-O-Rha上的甲基質(zhì)子信號(hào)分別為：δH1.52 (3H，d，J=6.2 Hz)和1.67 (3H，d，J=6.2 Hz)；苷元特征質(zhì)子信號(hào)：δH3.14 (1H，dd，J=3.6，13.2 Hz，H-18)，3.25 (1H，dd，J=4.2，11.8 Hz，H-18)和5.37 (1H，br s，H-12)。

13C-NMR給出δC：39.3 (C-1)，27.0 (C-2)，89.1 (C-3)，39.9 (C-4)，56.4 (C-5)，18.8 (C-6)，33.3 (C-7)，40.3 (C-8)，48.5 (C-9)，37.4 (C-10)，24.2 (C-11)，123.2 (C-12)，144.4 (C-13)，42.5 (C-14)，28.6 (C-15)，23.7 (C-16)，47.3 (C-17)，42.0 (C-18)，46.6 (C-19)，31.1 (C-20)，34.3 (C-21)，32.9 (C-22)，28.5 (C-23)，17.6 (C-24)，16.1 (C-25)，17.8 (C-26)，26.4 (C-27)，176.9 (C-28)，33.4 (C-29)，24.1 (C-30)，Rib C-1～C-5 (105.0，73.2，69.5，70.9，65.6)，Xyl C-1～C-5 (105.7，77.3，80.2，72.0，67.4)，3-O-Rha C-1～C-6 (101.8，72.3，81.6，73.1，70.2，18.9)，Glc I C-1～C-5 (96.0，74.2，79.0，71.1，78.7，69.6)，Glc II C-1～C-6 (105.1，75.7，76.5，78.7，77.3，61.5)，28-O-Rha C-1～C-6 (103.1，72.9，73.2，74.3，70.7，18.5)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[32]，故鑒定該化合物為huzhangoside C。

3 討論

王文采院士等[2]于2005年建立了新的鐵線蓮屬分類系統(tǒng)，認(rèn)為該屬包含4個(gè)亞屬15組共355種，在此之后，繼續(xù)對(duì)該屬品種進(jìn)行擴(kuò)展和修訂[3-10]，現(xiàn)已達(dá)到370余種，中國(guó)約產(chǎn)170種。據(jù)《中國(guó)中藥資源志要》記載[11]，在毛茛科植物中，鐵線蓮屬供藥用品種數(shù)(77種)僅次于烏頭屬(82種)，已有29個(gè)少數(shù)民族將其作為藥用[13]。可見，本屬植物物種豐富，可供藥用品種多，《藥典》中收錄的威靈仙和川木通，其基原植物分別為3種和2種，在實(shí)際使用中混用現(xiàn)象較為嚴(yán)重。不同民族對(duì)本屬植物的藥用部位和對(duì)應(yīng)的功能主治也存在較大差別。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者已對(duì)20余種本屬植物進(jìn)行過化學(xué)成分和藥理作用的相關(guān)研究，不及本屬品種總數(shù)十分之一，這些研究表明三萜皂苷、黃酮和木脂素是發(fā)揮藥效的主要活性成分，但上述成分所發(fā)揮的藥理作用不盡相同，這也是造成在不同民族藥用時(shí)功能主治差異的主要原因。因此，有必要進(jìn)一步拓展本屬植物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究，為民族用藥功效的內(nèi)涵提供科學(xué)闡釋。

本課題組為首個(gè)開展美花鐵線蓮化學(xué)成分研究的團(tuán)隊(duì)，本研究在前期工作基礎(chǔ)上，綜合運(yùn)用多種色譜分離手段，從該植物的乙醇提取物正丁醇萃取部位分離純化得到8個(gè)化合物，根據(jù)波譜數(shù)據(jù)和理化性質(zhì)鑒定了它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)，包括4個(gè)三萜類、1個(gè)甾醇苷類和3個(gè)木脂素類化合物，其中化合物1和化合物2為木栓烷型三萜，化合物7和化合物8為齊墩果烷型三萜皂苷，胡蘿卜苷(化合物3)為廣泛存在的植物甾醇苷，化合物4為二芐基丁烷型木脂素苷，化合物5和化合物6均為四氫呋喃型木脂素苷，所有化合物均為首次從本植物中分離得到，化合物4為首次從本屬分離得到，且所有化合物得量較高，為下一步的藥理活性研究提供了保障。本研究結(jié)果豐富了鐵線蓮屬植物藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，為本植物的進(jìn)一步開發(fā)利用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，可為本屬植物間的相互替代用藥和藥效闡釋提供參考。