膠體金快速檢測法測定水產(chǎn)品中獸藥殘留

丘韶麟，龔曉瑩，司徒茵，朱明智，劉俊威，陳 苑

（1.廣東省食品工業(yè)研究所有限公司，廣東廣州 511442；2.廣東省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)站，廣東廣州 511442）

水產(chǎn)品的獸藥殘留問題一直都是人們關(guān)注的焦點(diǎn)，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)發(fā)展，其呈現(xiàn)出規(guī)模化及高密度養(yǎng)殖態(tài)勢，極大程度地滿足了消費(fèi)者對水產(chǎn)品的日常需求。然而水產(chǎn)品高密度養(yǎng)殖容易導(dǎo)致水產(chǎn)品病菌滋生等問題，從而引發(fā)各種病害等。為降低病害帶來的損失，部分養(yǎng)殖戶可能會在養(yǎng)殖過程中使用氯霉素、孔雀石綠、硝基呋喃類等違禁藥[1]，威脅人們的身體健康。人體過量攝入氯霉素可引起人肝臟和骨髓造血機(jī)能的損害，導(dǎo)致再生障礙性貧血和血小板減少、肝損傷等健康危害[2-5]。基于此，本次研究針對獸藥殘留項(xiàng)目檢測結(jié)果進(jìn)行整理分析，篩選出重點(diǎn)檢測品種[6]，以期為農(nóng)貿(mào)市場開展食用農(nóng)產(chǎn)品快速檢測工作提供技術(shù)支持[7-8]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

樣品：根據(jù)農(nóng)貿(mào)市場售賣比較受人們歡迎的水產(chǎn)品進(jìn)行篩選選樣。選取重點(diǎn)水產(chǎn)品樣品共8 178批次，包括5種貝類（花甲、白貝、蟶子、青口和鮑魚）和5種魚類（草魚、黃骨魚、鯽魚、泥猛魚和鯛魚），其中魚類檢測氯霉素和孔雀石綠、呋喃唑酮代謝物和呋喃西林代謝物，貝類檢測氯霉素。

耗材：氯霉素快速檢測試紙條（檢出限0.1 μg·kg-1，內(nèi)含試劑及檢測卡，江蘇美正生物科技有限公司）；孔雀石綠快速檢測試紙條（檢出限2.0 μg·kg-1，內(nèi)含試劑及檢測卡，江蘇美正生物科技有限公司）；硝基呋喃代謝物快速檢測試紙條（呋喃西林代謝物、呋喃唑酮代謝物，檢出限0.5 μg·kg-1，內(nèi)含試劑及檢測卡，江蘇美正生物科技有限公司）。

1.2 儀器與設(shè)備

搗樣機(jī)（JYL-C020E，九陽）；電子天平（AR323CN，奧豪斯儀器有限公司）；渦旋混合儀（MS3 basic S025，德國IKA公司）；離心機(jī)（2-4，上海拖莫斯科學(xué)儀器有限公司）；樣品濃縮儀（Pro-12L，南京百思威科技發(fā)展有限公司）；單道手動可調(diào)移液器（20 ～ 200 μL、100 ～ 1 000 μL、1 ～ 5 mL，芬蘭biohit實(shí)驗(yàn)室儀器有限公司）；數(shù)顯恒溫水浴鍋（HH-2，金壇區(qū)白塔金昌實(shí)驗(yàn)儀器廠）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣品處理

根據(jù)快速檢測項(xiàng)目適用范圍及重點(diǎn)品種，選擇樣品對應(yīng)的重點(diǎn)項(xiàng)目進(jìn)行快速檢測，樣品需要去皮、去骨、去內(nèi)臟和去脂肪等，只取組織部分，用搗樣機(jī)攪碎混勻。按照說明書的稱取量稱取混勻后的組織樣本至15 mL離心管中，加入提取劑，用漩渦儀渦動2 min， 室 溫（20 ～ 25 ℃）4 000 r·m-1離 心 5 min；移取上層有機(jī)相至10 mL聚苯乙烯離心管中，于50～60 ℃空氣流下吹干；加入樣本復(fù)溶液等，用渦旋儀渦動20 s后待檢；用微量移液槍吸取待檢樣本溶液垂直滴加入金標(biāo)微孔中，反復(fù)上下吸取混勻，按說明書規(guī)定反應(yīng)時(shí)間計(jì)時(shí)反應(yīng)。待反應(yīng)時(shí)間結(jié)束用檢測試紙條垂直插入金標(biāo)微孔中；液體流動時(shí)開始計(jì)時(shí)，根據(jù)說明書給出的時(shí)間進(jìn)行結(jié)果判定，其他時(shí)間判讀無效，最后按照說明書判定方法判定試驗(yàn)結(jié)果。

1.3.2 分析方法

使用Excel軟件對快速檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果

本次膠體金快速檢測實(shí)驗(yàn)一共完成檢測8 178批次，檢出陽性批次227批次，總體陽性檢出率為2.78%，陰性率為97.22%。其中氯霉素陽性檢出率為4.10%，孔雀石綠陽性檢出率為1.16%，硝基呋喃類陽性檢出率為0.11%。

2.1.1 魚類的快速檢測情況

本次膠體金快速檢測實(shí)驗(yàn)共抽取魚類6 020批次，檢測項(xiàng)目為氯霉素、孔雀石綠、呋喃唑酮代謝物和呋喃西林代謝物，其中陽性批次為52批次，陽性檢出率為0.86%，陰性率為99.14%。泥猛魚陽性批次數(shù)最多，達(dá)22批次；其次是黃骨魚、草魚、鯛魚、鯽魚，陽性批次數(shù)分別為9批次、8批次、7批次、6批次。從陽性檢出率來看，泥猛魚的陽性檢出率最高，達(dá)1.33%，其次是黃骨魚、鯛魚、鯽魚和草魚，陽性檢出率分別為1.10%、0.86%、0.53%和0.50%。

魚類陽性項(xiàng)目情況：孔雀石綠陽性檢出率為1.16%（28/2 411）；氯霉素陽性檢出率為0.86%（23/2 672）；硝基呋喃類陽性檢出率為0.11%（1/937），其他具體實(shí)驗(yàn)情況見表1。

表1 膠體金免疫層析法試劑盒檢測魚類情況

2.1.2 貝類的快速檢測情況

本次膠體金快速檢測實(shí)驗(yàn)共抽取貝類2 158批次，陽性批次175批次，陽性檢出率為8.11%，陰性率為91.89%。具體實(shí)驗(yàn)情況見表2。

表2 膠體金免疫層析法試劑盒檢測貝類情況

2.1.3 不同獸殘項(xiàng)目的快速檢測情況

（1）氯霉素。本次膠體金快速檢測實(shí)驗(yàn)氯霉素項(xiàng)目完成4 830批次（魚類2 672批次，貝類2 158批次）。魚類氯霉素陽性檢出率最高的是泥猛魚2.05%，其次是黃骨魚1.12%、鯛魚0.28%、鯽魚0.21%、草魚0.14%；貝類氯霉素陽性檢出率最高的是花甲11.61%，其次是白貝6.50%、蟶子5.95%、青口4.32%、鮑魚3.92%。

（2）孔雀石綠。本次膠體金快速檢測實(shí)驗(yàn)孔雀石綠項(xiàng)目完成2 411批次（全部為魚類）。孔雀石綠陽性檢出率最高的是鯛魚（1.81%），其次是黃骨魚（1.52%）、鯽魚（1.12%）、草魚（1.09%）、泥猛魚（0.75%）。

（3）硝基呋喃類。本次膠體金快速檢測實(shí)驗(yàn)硝基呋喃類項(xiàng)目（呋喃西林代謝物、呋喃唑酮代謝物）完成937批次（全部為魚類）。陽性檢出率最高的是泥猛魚1.01%。

2.2 結(jié)果分析

從項(xiàng)目分析來看，①氯霉素項(xiàng)目檢測中，貝類氯霉素的陽性檢出率明顯高于魚類的陽性檢出率。但是貝類多數(shù)屬于海洋捕撈產(chǎn)品，少部分是海洋養(yǎng)殖產(chǎn)品，所以氯霉素藥物殘留可能是運(yùn)輸環(huán)節(jié)、暫養(yǎng)環(huán)節(jié)和流通環(huán)節(jié)違法添加造成的。其中花甲、白貝、蟶子、青口、鮑魚、泥猛魚和黃骨魚的陽性檢出率均高于1.0%，此類品種的氯霉素檢出率高、風(fēng)險(xiǎn)高，可以側(cè)重檢測此類品種。②孔雀石綠項(xiàng)目檢測中，鯛魚和黃骨魚的孔雀石綠陽性檢出率均大于1.5%，可能是孔雀石綠主要用于治療魚類寄生蟲等，會被非法使用在養(yǎng)殖環(huán)節(jié)中。從上述快速檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，X市存在少部分養(yǎng)殖戶違規(guī)使用孔雀石綠違禁藥的情況。③硝基呋喃類項(xiàng)目檢測中，泥猛魚的硝基呋喃類陽性檢出率高于1.0%，硝基呋喃類是廣譜抗生素，曾廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)品養(yǎng)殖業(yè)和畜禽養(yǎng)殖業(yè)。在《食品動物中禁止使用的藥品及其他化合物清單》（中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第250號）中規(guī)定，氯霉素、孔雀石綠、呋喃唑西林代謝物、呋喃唑酮代謝物為禁止使用的藥物，在動物源性食品中不得檢出。

3 結(jié)論

本次實(shí)驗(yàn)使用膠體金快速檢測試劑盒對水產(chǎn)品進(jìn)行了快速檢測，檢測項(xiàng)目分為氯霉素、孔雀石綠、呋喃西林代謝物和呋喃唑酮代謝物4種獸藥殘留項(xiàng)目。獸藥殘留問題比較突出的水產(chǎn)品分別是花甲和白貝（貝類）及泥猛魚、黃骨魚和鯛魚（魚類）。貝類主要陽性檢出項(xiàng)目是氯霉素，魚類主要陽性檢出項(xiàng)目是孔雀石綠和氯霉素。通過整理檢測結(jié)果，分析檢測數(shù)據(jù)，可為水產(chǎn)品重點(diǎn)品種篩選提供依據(jù)，為切實(shí)保障食用農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全、保障人們的身心健康提供助力。