HPV E6/E7mRNA檢測在宮頸病變中的診斷價(jià)值

馮琳，高慧芬，潘紅，施艷梅，林琳，張慧

（曲靖市婦幼保健院婦產(chǎn)科，云南 曲靖 655000）

目前，女性健康備受關(guān)注，而宮頸病變屬女性較為典型的綜合型疾病，包括宮頸損傷、炎癥、畸形及內(nèi)膜異位癥等，其中危害最大的為宮頸癌。宮頸癌是臨床常見婦科惡性腫瘤，該病發(fā)病率較高且病情惡劣，嚴(yán)重影響患者身體健康[1]。近年來，我國宮頸疾病的發(fā)病率逐漸呈年輕化趨勢發(fā)展，發(fā)病率逐年升高，實(shí)施有效防控宮頸疾病的措施具有重要意義。高危型人乳頭瘤病毒（HPV）是引發(fā)宮頸疾病的主要因素，與患者長期、持續(xù)感染該病毒密切相關(guān)[2]。研究顯示，大部分患者感染高危型HPV 病毒后0.5～1年內(nèi)可自行恢復(fù)至陰性，存在一次性感染情況，但可自行恢復(fù)健康[3-4]。但部分患者因感染持續(xù)時(shí)間過長等其他因素影響，極易引發(fā)各類宮頸病變甚至宮頸癌，且致死率較高。故實(shí)施積極、早期的檢測措施可有效反映病毒的存在，對于預(yù)防宮頸病變類疾病及宮頸癌具有重要的臨床意義[5]。本研究旨在探究HPV E6/E7mRNA 檢測在宮頸病變中的診斷價(jià)值，分析HPV E6/E7mRNA 檢測與宮頸病變的關(guān)系，提升宮頸癌篩查臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019 年3 月至2020 年12 月于本院行宮頸病變診斷及治療的200 例患者的臨床資料，基于診斷方法分為對照組和觀察組，每組100 例。對照組年齡 25～46 歲，平均年齡（35.6±1.4）歲。觀察組年齡26～48 歲，平均年齡（36.5±1.2）歲。兩組臨床資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究獲得醫(yī)院倫理委員會審核批準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：活檢同期行HPV E6/E7mRNA 檢測；患者及家屬均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：哺乳期或近期使用激素；既往宮頸癌前病變史；因兩性疾病切除子宮。

1.2 方法 避開患者月經(jīng)期，3 d 內(nèi)無性生活及陰道沖洗、上藥操作，選取宮頸鱗柱上皮交界處作為采樣點(diǎn)，使用專業(yè)采樣器以順時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)3～5圈，并將所采樣本放入標(biāo)本保存液中，等待專業(yè)人員檢測處理。對照組采用液基細(xì)胞學(xué)檢查方法，將脫落細(xì)胞系統(tǒng)處理后制片、固定和染色后進(jìn)行鏡檢，并根據(jù)伯塞斯達(dá)診斷系統(tǒng)（2001年修訂）進(jìn)行標(biāo)本判讀，其結(jié)果分為非典型鱗狀細(xì)胞、上皮內(nèi)病變細(xì)胞、高度鱗狀上皮內(nèi)病變和低度鱗狀上皮內(nèi)病變。細(xì)胞學(xué)結(jié)果≥ASCUS 陽性（+），＜ASCUS 為陰性。觀察組使用HPV E6/E7mRNA 檢測方法，應(yīng)用雜交信號方法核酸檢測技術(shù)，定量檢測mRNA 數(shù)量，并交由電腦進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理。試驗(yàn)所選宮頸細(xì)胞標(biāo)本經(jīng)歷過嚴(yán)格的漂洗、緩沖、信號方法、冷光儀檢測等操作步驟，其結(jié)果用RLUs為單位顯示，陽性數(shù)據(jù)為超過發(fā)光閥值（CO）。試驗(yàn)共可檢測14種高危型HPV病毒，此處不做具體分型。

1.3 觀察指標(biāo) 依據(jù)《醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)》第四版，計(jì)算兩組陽性檢出率及不同宮頸病變級別中HPV E6/E7mRNA表達(dá)水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以“”表示，行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，行χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組陽性檢出率比較 觀察組陽性檢出率顯著低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組陽性檢出率比較[n（%）]

2.2 不同病變級別中HPV E6/E7mRNA 表達(dá)水平比較 隨著病理級別的不斷加重，HPV E6/E7mRNA 的拷貝值與宮頸病變程度呈正相關(guān)（r=0.498），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組不同病變級別中HPV E6/E7mRNA表達(dá)水平比較

3 討論

宮頸癌是危害女性健康的常見惡性腫瘤之一，嚴(yán)重威脅女性群體的生命健康。近年來，隨著我國經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，受性觀念逐漸開放和男女權(quán)利平等因素的影響，女性宮頸疾病的發(fā)病率呈逐年升高趨勢[6]。目前，我國女性每年新發(fā)宮頸癌疾病病例約占世界發(fā)病率的33%。故及時(shí)予以相關(guān)檢測，防控宮頸疾病的發(fā)生，是提高女性健康，促進(jìn)社會經(jīng)濟(jì)平穩(wěn)發(fā)展的有效措施。盡管現(xiàn)如今醫(yī)學(xué)界在不斷規(guī)范HPV陽性處理措施，但假陽性高仍制約著宮頸癌疾病診斷準(zhǔn)確性的發(fā)展，給宮頸癌篩查帶來困惑[7]。目前，臨床多采用細(xì)胞學(xué)檢測宮頸癌病毒的方法，通過觀察患者機(jī)體宿主細(xì)胞的形態(tài)狀況，查看是否有異常問題為診斷標(biāo)準(zhǔn)。細(xì)胞學(xué)檢查已有60多年的臨床應(yīng)用經(jīng)驗(yàn)，長期以來為女性患者的宮頸癌疾病篩查工作做出了突出貢獻(xiàn)。但隨著細(xì)胞學(xué)檢查的開展，逐漸發(fā)現(xiàn)細(xì)胞學(xué)檢查因閱片醫(yī)生的不同，存在較嚴(yán)重的主觀傾向，且由于宮頸病變類疾病較多，其診斷準(zhǔn)確率存在差異[8]。為進(jìn)一步提高宮頸癌檢測準(zhǔn)確率，有關(guān)HPV檢測的新型方法逐漸興起，細(xì)胞學(xué)篩查已不能作為唯一評判標(biāo)準(zhǔn)。HPV E6/E7mRNA 屬于腫瘤標(biāo)志物，是宮頸癌疾病發(fā)生、發(fā)展的必要條件。因此，HPV E6/E7mRNA檢測可作為診斷宮頸病變的重要參考指標(biāo)。據(jù)研究證實(shí)，患者受HPV 病毒持續(xù)感染時(shí)，宿主染色體會與病毒相結(jié)合，E6/E7的癌基因被刺激激活，轉(zhuǎn)而生成E6/E7癌細(xì)胞。患者機(jī)體內(nèi)抑癌蛋白和癌蛋白相結(jié)合，引發(fā)細(xì)胞調(diào)節(jié)失控，進(jìn)而發(fā)展為癌變[9]。而當(dāng)患者被一次性感染HPV 病毒時(shí)，其體內(nèi)HPV E6/E7mRNA 被抑制，呈低表達(dá)或不表達(dá)狀態(tài)，病毒DNA 持續(xù)游離，進(jìn)而無法產(chǎn)生癌蛋白。由此可見，不論是持續(xù)性感染還是一次性感染，HPV E6/E7mRNA 均可作為宮頸病變診斷的重要腫瘤標(biāo)志物，具有較高的臨床診斷價(jià)值[10]。本研究結(jié)果顯示，兩組陽性檢出率方面比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），HPV E6/E7mRNA的CINⅠ陽性檢出率較低，分析原因主要與大多數(shù)CINⅠ可自行消退，其基因整合度相對較低，導(dǎo)致機(jī)體mRNA的表達(dá)未達(dá)到足夠的檢測數(shù)值。不同宮頸癌病變級別中HPV E6/E7mRNA 的表達(dá)水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。表明，隨著患者宮頸癌病變程度加劇，患者病情惡化，HPV E6/E7mRNA的拷貝數(shù)值隨之增高，因此，檢測HPV E6/E7mRNA 水平對宮頸癌疾病的風(fēng)險(xiǎn)評估具有一定意義。

綜上所述，在宮頸病變中應(yīng)用HPV E6/E7mRNA檢測方式效果顯著，能及時(shí)發(fā)現(xiàn)HPV病毒病給予阻斷治療。相較于細(xì)胞學(xué)檢查，HPV E6/E7mRNA檢測準(zhǔn)確性更高，在宮頸癌篩查和診斷工作中具有較高的應(yīng)用價(jià)值。