呼吸道腺病毒感染兒童血清PCT、SAA、25(OH)D的檢測及臨床意義

曾洲榆，官燕飛，倪文鵬，柯家龍，張熾倫

廣東省中山市博愛醫(yī)院檢驗科，廣東中山 528403

腺病毒感染多發(fā)于兒童時期，發(fā)生率較高。呼吸道腺病毒感染易使機體發(fā)生細胞因子與淋巴細胞亞群紊亂，嚴重者可致全身炎癥反應綜合征。故尋找有效判斷呼吸道腺病毒感染的血清學指標對早期診斷發(fā)現(xiàn)疾病具有重要價值。呼吸道病毒感染的嚴重程度一般不由病毒本身決定，機體對病毒產(chǎn)生的免疫應答才是影響感染后嚴重程度的主要原因。腺病毒感染后，機體體液免疫通過分泌抗體來保護組織器官，細胞免疫則作用于病毒內(nèi)蛋白而使感染終止，對抗腺病毒感染具有重要作用[1-2]。降鈣素原(PCT)為降鈣素的前體物質(zhì)，機體發(fā)生感染后在細菌內(nèi)毒素誘導下，血清中PCT水平迅速上升；淀粉樣蛋白A(SAA)為急性時相反應蛋白，在健康人群體內(nèi)水平極低，發(fā)生感染后其水平急劇上升[3-4]。維生素D為脂溶性維生素，與機體免疫功能、炎性反應等過程有關，25羥基維生素D[25(OH)D]為評估機體維生素D營養(yǎng)狀況的最佳指標[5]。本研究對本院呼吸道腺病毒感染患兒血清PCT、SAA、25(OH)D水平進行檢測，以了解其血清水平并評估腺病毒感染特征。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年2月至2021年3月于中山市博愛醫(yī)院住院患兒作為研究對象，臨床表現(xiàn)為咳嗽發(fā)熱、氣促、咽痛。分別采用間接酶聯(lián)免疫法及免疫熒光法檢測腺病毒IgM抗體與腺病毒抗原，將二者檢測結果均為陽性的110例患兒納入腺病毒感染組，其中男61例，女49例；年齡為6個月至5歲，平均(29.57±9.12)個月。同期選取100例于本院體檢的健康兒童作為對照組，其中男57例，女43例；年齡為7個月至5歲，平均(30.05±9.72)個月。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2儀器與試劑 腺病毒IgM抗體來源于比爾塞有限公司；腺病毒抗原檢測試劑盒購自海德診斷有限公司；Roche Cobas E601全自動電化學發(fā)光儀來源于羅氏公司；干式熒光免疫分析儀為梅里埃全自動熒光酶免疫分析儀；SAA試劑來源于廣州市微米生物科技有限公司。

1.3方法 腺病毒IgM抗體檢測：于清晨抽取患兒空腹靜脈血，離心后取其血清冷藏備用；采用間接酶聯(lián)免疫法測定血清腺病毒IgM抗體，操作參考IgM抗體檢測試劑盒要求，結果呈陽性標本納入備選。腺病毒抗原檢測：取患兒鼻咽分泌物制成涂片，采用異硫氰酸熒光素標記的針對腺病毒鼠單克隆抗體檢測腺病毒抗原，通過熒光顯微鏡觀察，以觀察到超過2個完整細胞有明亮黃綠色熒光作為陽性，反之為陰性[6]。PCT、SAA、25(OH)D檢測：抽取患兒清晨空腹靜脈血，離心后備用；采用梅里埃全自動熒光酶免疫分析儀及其配套試劑檢測血清PCT；使用干式熒光免疫分析儀測定SAA水平；采用電化學發(fā)光法檢測血清25(OH)D水平。

2 結 果

兩組血清PCT、SAA、25(OH)D水平比較 腺病毒感染組血清PCT、SAA水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，25(OH)D水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 兩組血清因子水平比較

3 討 論

腺病毒為雙鏈DNA無包膜病毒，首先從人腺樣組織培養(yǎng)物中分離出，分為6個亞群，共47個血清型。呼吸道感染為哮喘的主要誘因，病毒感染與哮喘發(fā)生密切相關。兒童由于呼吸系統(tǒng)生理與解剖結構未發(fā)育成熟而較易發(fā)生呼吸道感染，腺病毒感染患兒病死率高且后遺癥程度重，對兒童健康成長有嚴重影響，及時掌握呼吸道腺病毒感染特點及血清學變化和早期診斷并采取及時有效的治療方式對兒童成長具有重要價值[7-8]。呼吸道腺病毒感染易導致機體出現(xiàn)細胞因子與淋巴細胞亞群紊亂，嚴重時可導致全身炎癥反應綜合征。機體細胞免疫功能嚴重下降時，相關細胞因子瀑布效應出現(xiàn)及伴隨趨化因子參與，可導致整個免疫應答網(wǎng)絡失控，加重全身炎癥反應綜合征，發(fā)生膿毒血癥，病情惡化，引起多臟器功能不全綜合征。人體感染腺病毒后可通過體液免疫分泌出抗體以保護氣管等組織器官，還能通過細胞免疫作用于病毒內(nèi)部蛋白以抵御病毒感染。及時治療可促使患兒自身免疫調(diào)控恢復，促進免疫應答平衡，進而治愈腺病毒感染。故研究腺病毒感染患兒免疫應答變化情況對闡明腺病毒感染致病機制及腺病毒感染患兒治療具有重要作用[9]。

PCT是由116個氨基酸組成的糖蛋白屬于降鈣素前體，細菌脂多糖短期內(nèi)可誘導PCT大量生成，支原體與病毒感染后分泌的白細胞介素對PCT分泌具有阻斷作用，可導致其分泌量下降。PCT水平變化與細菌感染密切相關，對細菌感染性疾病診斷與治療具有一定價值，全身感染4 h后在促炎因子及內(nèi)毒素作用下PCT水平可逐漸上升，在6～24 h內(nèi)穩(wěn)定在高水平，不受激素與藥物影響，早期PCT水平上升后經(jīng)抗感染治療能降低其水平，故PCT為臨床中診斷感染性疾病的有效指標[9-10]。早期健康人體中含有極低量的PCT，不受惡性腫瘤本身影響，當發(fā)生細菌感染后2～3 h體內(nèi)PCT水平逐漸升高，與感染程度呈正相關，而在病毒感染時不升高。

SAA是由104個氨基酸組成的多肽，主要產(chǎn)生于肝臟，為敏感性較高的急性反應蛋白，可反映機體炎癥程度，通過降低巨噬細胞與T淋巴細胞水平以減輕組織器官炎癥損傷。健康患兒體內(nèi)SAA水平極低，當受到支原體、細菌等侵襲后，肝細胞產(chǎn)生大量SAA[11-12]。有研究顯示，研究組PCT、SAA水平明顯高于對照組，提示血清PCT與SAA可作為感染性疾病診斷參考指標[13]。維生素D為機體內(nèi)重要類固醇激素，在肺組織中能被激活，也能調(diào)節(jié)免疫功能，且可加速誘導肺部免疫應答機制，減輕炎性反應。機體正常免疫調(diào)節(jié)需通過淋巴亞群維持，維生素D能刺激中性粒細胞、呼吸道上皮細胞等表達以預防呼吸道感染[14]。25(OH)D3為體內(nèi)維生素D活性代謝產(chǎn)物，具有穩(wěn)定的結構，能促進骨代謝并維持鈣平衡，且能參與機體免疫調(diào)節(jié)。25(OH)D為反映機體維生素D儲備的存在形式，主要有25(OH)D2與25(OH)D3兩種亞型，多數(shù)研究以25(OH)D3水平表示機體內(nèi)維生素D水平。25(OH)D3可減輕肺泡嗜酸性粒細胞浸潤程度并降低氣道高反應性，當25(OH)D3呈低表達狀態(tài)可導致肺抗感染能力下降，進而誘導哮喘等疾病發(fā)生、發(fā)展。本研究中，腺病毒感染組血清25(OH)D水平低于對照組，說明患兒體內(nèi)維生素D水平較低時，外周免疫球蛋白水平較低，呼吸道抵抗力下降，呼吸道感染可能增加。當體內(nèi)維生素D水平上升時機體自身免疫力提高，這有助于腺病毒感染好轉(zhuǎn)，提示維生素D水平對腺病毒感染預測具有一定價值[15]。

綜上所述，與健康兒童相比，呼吸道腺病毒感染患兒血清PCT、SAA水平上升，25(OH)D水平下降，早期檢測對及早診斷和及時治療具有積極意義。