梅毒患者血漿中IL-27和IL-35水平變化及其臨床意義

賀勇鋒 謝惠琴 程曉慧 余進勝

摘要：目的 探討梅毒患者血漿中IL-27、IL-35的水平變化及臨床意義。方法 選取2021年3月～2022年4月我院皮膚科門診收治梅毒患者54例（試驗組）， 根據(jù)梅毒滴度水平分為高滴度組30例和低滴度組24例。同時收集10例在我院進行體檢的健康職工志愿者為對照組。采用ELISA法測定各組血漿中IL-27、IL-35水平并進行比較，分析其水平差異與RPR滴度的相關(guān)性。另外，抽取10例跟蹤治療患者樣本，分析梅毒患者治療前后血漿中IL-27和IL-35的水平變化情況。結(jié)果 試驗組血漿IL-27、IL-35水平均高于對照組（P＜0.05）；高滴度組IL-27、IL-35水平均高于低滴度組，但兩組IL-27、IL-35的水平均無顯著差異（P＞0.05）；治療后梅毒患者IL-27和IL-35水平較治療前均降低，但兩者治療前后水平均無顯著差異（P＞0.05）。結(jié)論 梅毒患者具有較高的血漿IL-27、IL-35水平，提示IL-27和IL-35可能和梅毒細胞免疫有一定的相關(guān)性。

關(guān)鍵詞： IL-27；IL-35；梅毒RPR滴度

梅毒是一種系統(tǒng)性的性傳播疾病，能夠引起人體全身組織和器官的損害和病變[1]。現(xiàn)代社會經(jīng)濟高速發(fā)展，城市化進程也逐步加快，高密度的人口加快了性疾病傳播速度，梅毒發(fā)病率逐年上升，對我國經(jīng)濟和社會發(fā)展都造成了嚴重負擔(dān)[2]。廣東省的常住人口和流動人口數(shù)量居于我國前列，因此它也是我國性病疫情較為嚴重的地區(qū)，梅毒報告發(fā)病數(shù)和報告發(fā)病率居高不下[3]。當前對機體感染梅毒螺旋體（TP）后的免疫反應(yīng)機制尚未闡明。TP不激發(fā)先天病原識別系統(tǒng)，而是在梅毒感染的不同時期出現(xiàn)不同程度的細胞免疫和體液免疫。早期的細胞免疫和體液免疫反應(yīng)對清除TP具有重要的作用，晚期的細胞免疫反應(yīng)是梅毒患者組織損傷的關(guān)鍵原因[4]。IL-27具有較為多樣的生物學(xué)功能，其主要作用是抗感染免疫以及增強自身免疫力；IL-35是調(diào)節(jié)性T細胞發(fā)揮抑制效應(yīng)所需的抑制性細胞因子，主要作用是抗炎和免疫抑制[5]。本研究主要通過測定梅毒患者中血漿IL-27和IL-35的表達水平，分析其與梅毒細胞免疫的相關(guān)性及其對梅毒病程發(fā)展的作用，以期能為患者的臨床治療提供一定的參考作用。

1資料與方法

1.1 一般資料

選取2021年3月～2022年4月于我院就診的58例梅毒患者為研究對象（試驗組），根據(jù)RPR滴度分為高滴度組（RPR≥1：8）30例和低滴度組（RPR＜1：8）24例。同時選取在我院體檢的健康職工人群10例作為對照組；另外，抽取10例跟蹤治療患者樣本，分析治療前后血漿中IL-27和IL-35的水平變化情況。對照組10例（男6例，女4例），年齡22～50歲，平均年齡（32.20±10.24）歲；高滴度組30例（男18例，女12例），年齡19～50歲，平均年齡（30.13±11.58）歲；低滴度組25例（男12例，女13例），年齡19～50歲，平均年齡（33.83±13.30）歲。各組患者性別、年齡等比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 納入與排除標準

納入標準：此次究病例選取均按照《梅毒診斷（WS273—2018）》的標準進行；經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準后，所有患者均知情同意并自愿參與本次研究。

排除標準：需要復(fù)雜、全面監(jiān)測和處理的嚴重心肺疾病患者；嚴重肝腎功能不全或衰竭患者；有顯著呼吸系統(tǒng)疾病患者，近期患上呼吸道感染有明顯發(fā)熱、喘息、鼻塞和咳嗽等；不愿意參加或不積極配合的患者；因各種原因無法配合此次研究的患者；依據(jù)篩選條件通過科室信息管理系統(tǒng)對每天進行梅毒血清學(xué)檢測（TPPA、RPR及TRUST）的患者數(shù)據(jù)進行篩選整理并建立檔案。

1.3 方法

確診后的梅毒患者及健康志愿者立即進行相關(guān)指標檢測，抽取患者和志愿者外周肘靜脈血5 ml，先室溫靜置20 min，待血液凝固后將標本放入離心機，以3000 r/min的速度離心20 min，將患者血漿置于-80℃環(huán)境中保存待檢；采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血漿IL-27、IL-35水平；然后采用快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗檢測RPR滴度。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 26.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以（±s）表示，采用ｔ檢驗，計數(shù)資料用比率表示，采用χ2檢驗，（P＜0.05）為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 兩組IL-27、IL-35表達水平比較

實驗組血漿IL-27和IL-35水平均高于對照組（P＜0.05）。見表1。

2.2 高滴度組與低滴度組IL-27、IL-35表達水平比較

高滴度組、低滴度組患者血漿IL-27、IL-35水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

2.3 治療前后梅毒患者IL-27、IL-35表達水平比較

治療前后梅毒患者血漿IL-27水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；治療前后患者IL-35水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.059）。見表3。

3討論

目前，梅毒仍然是全球較為嚴重的公共衛(wèi)生問題。它的病程長，臨床癥狀復(fù)雜多樣，累及全身多個器官和組織，臨床上常會造成漏診和誤診，影響梅毒患者的診斷和治療。雖然目前梅毒的發(fā)病機制不明確，但已知其與細胞免疫密切相關(guān)，且認為細胞免疫抑制對梅毒病程的發(fā)展具有關(guān)鍵作用[6]。梅毒的細胞免疫機制極其復(fù)雜，T細胞免疫、巨噬細胞免疫、樹突狀細胞免疫、NK細胞免疫和細胞因子等形成了復(fù)雜的免疫網(wǎng)絡(luò)，它們密切相關(guān)且都對梅毒的感染以及病程的發(fā)展有著重要的影響[7]。早在1992年就有國外學(xué)者提出梅毒病程Th1/Th2反應(yīng)失衡的學(xué)說：早期發(fā)病以Th1型反應(yīng)介導(dǎo)為主，隨著病程發(fā)展逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)門h2型反應(yīng)介導(dǎo)為主，認為TP的清除主要是Th1細胞免疫，但是當Th1/Th2失衡，往Th2細胞方向分化，抑制了機體的細胞免疫，從而導(dǎo)致梅毒病程的遷延。另外，在梅毒細胞免疫機制中研究較多的還有Treg/Th17的失衡。有研究表明，患者體內(nèi)Treg/Th17細胞失衡會造成免疫抑制，削弱了機體對梅毒螺旋體的控制。

IL-27是由EB病毒誘導(dǎo)基因3（EBI3）和p28兩個亞基通過二硫鍵連接組成的異源二聚體復(fù)合物。IL-27主要由活化的抗原提呈細胞如樹突狀細胞、巨噬細胞等分泌，是一種具有抗炎和促炎效應(yīng)的多效細胞因子，與T細胞免疫密切相關(guān)。IL-27可以誘導(dǎo)初始CD4＋T細胞往Th1型細胞方向分化，介導(dǎo)了Th1型細胞免疫反應(yīng)，抑制Th2細胞應(yīng)答，通過刺激自然殺傷細胞產(chǎn)生IFN-γ抑制了Th2型細胞及因子IL-4的產(chǎn)生，糾正Th2型細胞免疫的漂移，維持Th1/Th2比例平衡[8]。IL-35是由EB病毒誘導(dǎo)基因3（EBI13）和IL-12的p35亞基組成的異二聚體。Collison等首先發(fā)現(xiàn)IL-35是由Treg細胞產(chǎn)生，在Treg細胞的抑制功能中具有關(guān)鍵作用的抑制性細胞因子。Treg細胞能夠分泌相關(guān)的細胞因子，如TGF-β、IL-35、IL-10等，發(fā)揮負性免疫調(diào)節(jié)作用。而梅毒患者中具有抑制性效應(yīng)的Treg細胞增多會導(dǎo)致機體細胞免疫功能受到抑制，從而減少了機體對TP的清除作用[9]。

本研究對比了梅毒患者和健康人群血漿IL-27和IL-35水平，結(jié)果顯示兩組之間IL-27和IL-35的水平均存在顯著差異，梅毒患者IL-27和IL-35水平均高于健康人群。IL-27的研究結(jié)果與其他學(xué)者的研究結(jié)果相似，說明了IL-27對梅毒的細胞免疫抑制功能存在一定的作用。此外，梅毒患者IL-35的表達升高也可以說明了IL-35可能與梅毒細胞免疫具有相關(guān)性，但相關(guān)報道較少，因此IL-35的具體作用機制有待深入探究。

本研究還檢測了不同RPR滴度梅毒患者IL-27和IL-35的水平，同時也追蹤了10例治療前后的梅毒患者，對其進行了IL-27和IL-35的水平比對，結(jié)果顯示各組之間均無統(tǒng)計學(xué)差異。考慮原因：IL-27和IL-35在復(fù)雜的梅毒細胞免疫網(wǎng)絡(luò)中也是需要通過與其他細胞因子以及信號通路的相互影響來發(fā)揮作用的。未來可能需要增加聯(lián)合檢測TGF-β、IL-10、IL-4IFN-γ等相關(guān)細胞因子的表達水平，分析它們與IL-27、IL-35的相互作用，進而研究是否存在其他免疫機制影響這兩種細胞因子發(fā)揮作用，進一步影響了梅毒細胞免疫機制以及梅毒病程的發(fā)展。其次，梅毒患者經(jīng)過規(guī)范的抗梅治療后，大部分一期梅毒會在1年內(nèi)血清學(xué)試驗轉(zhuǎn)陰，二期梅毒在2年內(nèi)陰轉(zhuǎn)，尚有部分患者會長期維持梅毒血清固定狀態(tài)。因此，在接下來的研究中可能需要延長對患者治療前后的追蹤觀察時間以及增加相關(guān)的病例數(shù)進一步觀察。

綜上所述，梅毒患者血漿IL-27和IL-35水平均升高，二者參與了梅毒發(fā)展的免疫應(yīng)答過程，但其具體作用機制還有待進一步研究。IL-27和IL-35可作為觀察指標為梅毒診斷及了解其細胞免疫功能的重要依據(jù)。

參考文獻

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