miR-133/208對老年急性心肌梗死患者預后的預測價值

周 艷，張克昌，涂 秀，錢 琤

(1.滁州市第一人民醫院 檢驗科，安徽 滁州239000;2.中國人民解放軍第904醫院 檢驗科,江蘇 蘇州215007)

急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)是冠狀動脈急性缺血缺氧引起的心肌壞死，多見于老年人，該病可累及消化、呼吸、心血管系統，并發心律失常、血管栓塞、心臟破裂、心力衰竭、心源性休克等，危及患者生命[1]。隨著醫學不斷進步，急性心肌梗死早期病死率明顯降低，但整體病死率仍較高，而急性心肌梗死后不良心血管事件是造成患者死亡的重要因素之一[2]。因此早期預測急性心肌梗死后不良心血管事件是降低急性心肌梗死病死率的關鍵。微小核糖核酸(MicroRNA，miR)是一種單鏈非編碼小RNA分子，廣泛存在于真核生物中，可參與轉錄后基因表達調控[3]。miR-208、miR-133是近年新發現的的miRNA，既往研究報道[4-5]miR-208、miR-133與急性心肌梗死發生及病情相關，但其與急性心肌梗死預后的相關性尚不清楚。本研究就miR-208、miR-133對老年急性心肌梗死患者預后的預測價值進行了探討，現將研究結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

征得滁州市第一人民醫院醫學倫理委員會批準，選擇2019年3月-2021年6月滁州市第一人民醫院收治的急性心肌梗死患者198例為研究組，體檢健康者50例為對照組。研究組：男109例，女89例；年齡50-93歲，平均年齡(71.25±5.43)歲。對照組：男27例，女23例；年齡52-90歲，平均年齡(72.63±5.88)歲。兩組一般資料無顯著差異(P>0.05)。根據198例急性心肌梗死患者1年內是否發生不良心血管事件分為預后良好組(n=168)與預后不良組(n=30)，預后良好組：男92例，女76例；年齡50-92歲，平均年齡(69.77±5.49)歲。預后不良組：男17例，女13例；年齡51-92歲，平均年齡(70.46±5.73)歲。預后良好組和預后不良組一般資料無顯著差異(P>0.05)。

1.2 納入排除標準

納入標準：①符合急性心肌梗死診斷標準[1]；②行冠狀動脈支架置入術(intracoronary stent implantation，ISI)；③年齡50-93歲，病歷資料完整；④心、肝、腎功能正常；⑤所有研究對象簽訂知情同意書。排除標準：①合并凝血系統疾病、擴張型心肌病、惡性腫瘤、心臟瓣膜病、活動期肺結核、精神性疾病、自身免疫性疾病、甲狀腺疾病；②隨訪期間發生與急性心肌梗死無關的重大疾病導致的預后不良；③住院期間死亡；④轉院或放棄治療；⑤依從性不好，不能配合完成本研究。

1.3 研究方法

所有研究對象入院后記錄年齡、性別等一般資料，采集清晨空腹外周靜脈血5 ml，置于含肝素抗凝的無菌真空采血管(安徽赫爾生物醫學檢驗科技有限公司)中，采用總RNA提取試劑盒(常州百代生物科技有限公司)提取血液總RNA，采用反轉錄試劑盒(北京百奧萊博科技有限公司)將總RNA反轉錄成cDNA，以此cDNA為模板進行PCR擴增。PCR擴增體系：cDNA模板1 μL，SYBR Premix Ex Taq 10 μL，上下游引物各0.5 μL，加無核酶水補充至20 μL；PCR反應條件：95℃預變性15 s，95℃變性5 s，60℃退火延伸30 s，39次循環。根據擴增曲線讀取循環數(Ct)，將GAPDH作為內參基因，采用相對定量法以2-△△Ct對miR-208、miR-133表達水平進行相對定量分析。每份RNA樣本重復檢測3次，由同一名醫師嚴格根據說明書描述進行操作。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 研究組與對照組外周血中miR-208、miR-133相對表達量

研究組外周血中miR-208、miR-133相對表達量顯著高于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)(表1)。

表1 研究組與對照組外周血中miR-208、miR-133相對表達量

2.2 預后良好組與預后不良組外周血中miR-208、miR-133相對表達量

預后不良組外周血中miR-208、miR-133相對表達量顯著高于預后良好組，差異具有統計學意義(P<0.05)(表2)。

表2 預后良好組與預后不良組外周血中miR-208、miR-133相對表達量

2.3 miR-208、miR-133與急性心肌梗死患者預后不良的相關性

miR-208、miR-133與急性心肌梗死患者預后不良呈正相關(P<0.05)(表3、圖1)。

表3 miR-208、miR-133與急性心肌梗死患者預后不良的相關性

圖1 miR-208、miR-133與急性心肌梗死患者預后不良的相關性

2.4 miR-208、miR-133對急性心肌梗死患者預后不良的預測價值

miR-208對急性心肌梗死患者預后不良的預測價值明顯優于miR-133(P<0.05)；miR-208、miR-133聯合檢測對急性心肌梗死患者預后不良的預測價值明顯優于各指標單獨檢測(P<0.05)(表4、圖2)。

圖2 miR-208、miR-133預測急性心肌梗死患者預后不良的ROC曲線

表4 miR-208、miR-133對急性心肌梗死患者預后不良的預測價值

兩指標聯檢時，以均陽性方為陽性(預后不良)。

3 討論

急性心肌梗死是老年人群的常見病、多發病，臨床表現為劇烈而持久的胸骨后疼痛、心電圖進行性改變以及血清肌紅蛋白(myoglobin，MB)、肌酸激酶同功酶(Creatine kinase isoenzyme，CKMB)、肌鈣蛋白Ⅰ(Troponin I，TnI)等心肌酶活性升高[6]。隨著人們生活方式改變及生活水平的提高，急性心肌梗死發病率逐年攀升。急性心肌梗死發病迅速，并發癥多，嚴重危害人類健康。急性心肌梗死后不良心血管事件是造成患者死亡的重要因素之一，因此早期預測急性心肌梗死后不良心血管事件的發生，是降低急性心肌梗死患者病死率的重要途徑，對提升急性心肌梗死患者預后有重要意義。

miRNA是一類單鏈非編碼小分子RNA，長度約為20-25個核苷酸，廣泛存在于真核生物中，能夠通過靶向結合特定mRNA的3′端非編碼區(3′UTR)，對靶基因表達進行轉錄后負調控。人類1/3基因受miRNA調控，miRNA能夠參與人體多個生理過程，廣泛參與細胞增殖、分化、凋亡等細胞生物學行為，并在系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)、自身免疫性溶血性貧血(autoimmune hemolytic anemia，AHA)、多發性腦脊髓硬化癥(multiple sclerosis，MS)等自身免疫性疾病、心血管疾病(Cardiovascular disease，CVD)以及非小細胞肺癌(Non-small cell lung cancer，NSCLC)、肝細胞肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)等惡性腫瘤等疾病發生、發展中發揮重要作用[7-9]。miR-208、miR-133是近年新發現的的miRNA，有研究發現[10]敲低miR-208可減少急性心肌梗死大鼠心肌梗死面積，改善心肌細胞凋亡。另有研究發現[11]miR-208可在轉錄后水平負調節目的基因表達，參與急性心肌梗死后心室重構過程。本研究顯示研究組外周血中miR-208相對表達量顯著高于對照組，這與劉新秀等[12]人研究結果一致，提示miR-208在老年急性心肌梗死患者外周血中呈高表達。本研究顯示預后不良組外周血中miR-208相對表達量顯著高于預后良好組，提示miR-208與老年急性心肌梗死患者預后具有明顯相關性，本研究spearman相關分析也證實了這一結論，提示miR-208高表達的老年急性心肌梗死患者預后越差。有研究顯示[13]miR-133在缺血再灌注損傷(Ischemia-reperfusion injury，IRI)過程中表達水平上升。另有研究顯示[14]miR-133在急性心肌梗死大鼠心臟中表達明顯上調。上述研究[13-14]在本研究中得到了證實，本研究顯示miR-133在老年急性心肌梗死患者外周血中呈高表達，且預后不良組外周血中miR-133相對表達量顯著高于預后良好組，提示miR-133與老年急性心肌梗死患者預后相關，miR-133高表達的老年急性心肌梗死患者預后越差，這與Yuan L等[15]人研究結果一致，等人研究發現miR-133高表達患者急性心肌梗死后不良心血管事件發生率更高。

綜上所述，miR-208、miR-133在老年急性心肌梗死患者外周血中呈高表達狀態，miR-208、miR-133與老年急性心肌梗死患者預后具有明顯相關性，外周血miR-208、miR-133聯合檢測對老年急性心肌梗死患者預后具有一定評估價值，有望成為臨床管理老年急性心肌梗死的分子生物標志物。但本研究尚具樣本小、隨訪時間短的不足，故有待進一步研究。

作者簡介：周艷，女，安徽省明光市人，碩士，主管檢驗師，研究方向:檢驗。