甲氧芐啶快速檢測試劑盒質(zhì)量評價樣品的分析

葉雅真 駱和東

摘 要：為做好商品化甲氧芐啶膠體金快速檢測試劑盒質(zhì)量評價工作，本文采用參比方法，參照《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南》（CNAS-GL003-2018）對甲氧芐啶評價樣品進(jìn)行穩(wěn)定性和均勻性考察。結(jié)果顯示，甲氧芐啶制備樣品穩(wěn)定性符合要求，在14 d考察期內(nèi)可用于試劑盒質(zhì)量評價，制備樣品均勻性符合要求，可用于試劑盒質(zhì)量評價。

關(guān)鍵詞：甲氧芐啶;膠體金免疫層析;質(zhì)量評價;食品安全快速檢測

Abstract： In order to evaluate the quality of commercial methylrim colloidal gold rapid detection kit， the stability and uniformity were investigated by reference to （CNAS-GL003-2018）.The results showed that the sample stability of trimethoprim preparation met the requirements， can be used for the kit quality evaluation during the 14 d investigation period， the preparation sample uniformity met the requirements， and can be used for the kit quality evaluation.

Keywords： trimethoprim; the principle of colloidal gold immunochromatography; quality assessment; rapid detection for food safety

甲氧芐啶（Trimethoprim，TMP）是一種抗菌增效劑，可提高抗菌藥在動物體內(nèi)的利用率[1-5]。甲氧芐啶的廣泛使用和不合理用藥，使動物性食品中有藥物殘留，對人體健康造成危害。食品安全快速檢測技術(shù)是一種快速定性（或半定量）的檢測技術(shù)，大多在2小時內(nèi)可以出具樣品中目標(biāo)成分含量符合或不符合國家相關(guān)限量要求的報告，雖然無法報告樣品中目標(biāo)成分的具體含量，但是實(shí)現(xiàn)了現(xiàn)場快速檢測，為監(jiān)管部門對食品安全的有效監(jiān)管提供了便利的技術(shù)手段[6-15]。但由于國內(nèi)快速檢測產(chǎn)品生產(chǎn)門檻低，監(jiān)管部門難以監(jiān)管，市場上流通的快速檢測產(chǎn)品質(zhì)量參差不齊，符合監(jiān)管需求的合格快檢產(chǎn)品較少[6-8]。為做好商品化甲氧芐啶膠體金快檢試劑盒質(zhì)量評價工作，確保甲氧芐啶試劑盒的檢測效果，本文參照《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南》（CNAS-GL003-2018）對甲氧芐啶評價樣品進(jìn)行穩(wěn)定性和均勻性考察[16]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

甲醇中甲氧芐啶溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（BePure-26347YM，1 000 μg/mL，BePure）;乙腈（色譜純，德國MERCK）;正己烷（色譜純，德國MERCK）;正丙醇（分析純，滬試）;甲酸（優(yōu)級純，德國MERCK）;磷酸氫二鈉（分析純，國藥）;磷酸二氫鉀（分析純，國藥）;有機(jī)過濾頭（0.22 μm，津騰）。

1.2 儀器與設(shè)備

三重串聯(lián)四極桿液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（Agilent 6470）;色譜柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm，Agilent?UPLC C18）;Milli-Q超純水處理系統(tǒng)（美國Millipore）;電子天平（德國Sartorius）;微波爐（格蘭仕）;臺式離心機(jī)（美國Sigma）;移液槍（德國Eppendorf）;刀式研磨儀（德國Retsch）;pH計(jì)（瑞士METTLER TOLEDO）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

膠體金免疫層析快速檢測試劑盒一般適用于肌肉靶組織的檢測。通過調(diào)研發(fā)現(xiàn)雞肉是甲氧芐啶殘留風(fēng)險最高的食品，因此確定此次質(zhì)量評價的樣品基質(zhì)為雞肌肉組織。參比方法為《動物源性食品中磺胺類藥物殘留量的測定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》（GB/T 21316—2007）[17]。經(jīng)參比方法確證為陰性的雞肉作為空白雞肉樣本。以空白雞肉為基質(zhì)，添加甲氧芐啶標(biāo)準(zhǔn)溶液，制成0 μg/kg、25 μg/kg 、50 μg/kg 3個添加水平的樣品。用參比方法對制備樣品進(jìn)行均勻性和穩(wěn)定性考察。

2 結(jié)果與分析

2.1 制備樣品的穩(wěn)定性檢驗(yàn)

參照《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南》（CNAS-GL003-2018）中穩(wěn)定性檢驗(yàn)-t檢驗(yàn)法分析制備的甲氧芐啶加標(biāo)樣品的穩(wěn)定性。統(tǒng)一制備甲氧芐啶加標(biāo)樣品用于穩(wěn)定性檢驗(yàn)，分裝到50 mL離心管中，速凍保存。在第1 d、第7 d、第10 d和第14 d，分別隨機(jī)抽取25 μg/kg和50 μg/kg 2個濃度梯度的甲氧芐啶加標(biāo)樣品各6份，用參比方法對制備樣品進(jìn)行穩(wěn)定性檢驗(yàn)。穩(wěn)定性檢驗(yàn)t臨界值t0.05（10）=1.812 5。濃度梯度為25 μg/kg的甲氧芐啶加標(biāo)樣品在第7 d、第10 d和第14 d與第1 d相比較，t值分別為0.457 3、0.086 1和0.063 3，濃度梯度為50 μg/kg的甲氧芐啶加標(biāo)樣品在第7 d、第10 d和第14 d與第1 d相比較，t值分別為0.263 4、0.238 3和0.052 9，所有t值均

2.2 制備樣品的均勻性檢驗(yàn)

參照《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南》（CNAS-GL003-2018）中均勻性檢驗(yàn)-單因子方差分析法分析制備的甲氧芐啶加標(biāo)樣品的均勻性。統(tǒng)一制備甲氧芐啶加標(biāo)樣品用于試劑盒質(zhì)量評價，分裝到50 mL離心管中，速凍保存。隨機(jī)抽取25 μg/kg和50 μg/kg 2個濃度梯度的甲氧芐啶加標(biāo)樣各10份，用參比方法對制備樣品分別進(jìn)行均勻性檢驗(yàn)。查F檢驗(yàn)臨界值表可知，均勻性檢驗(yàn)F臨界值F0.05（9，10）=3.02。甲氧芐啶加標(biāo)樣品在25 μg/kg和50 μg/kg 2個濃度梯度的F值分別為2.57、2.90，均

3 結(jié)論

本文參照《能力驗(yàn)證樣品均勻性和穩(wěn)定性評價指南》（CNAS-GL003-2018）對甲氧芐啶評價樣品進(jìn)行穩(wěn)定性和均勻性考察。結(jié)果顯示，甲氧芐啶制備樣品穩(wěn)定性、均勻性均符合試劑盒質(zhì)量評價要求，在14 d考察期內(nèi)可用于試劑盒質(zhì)量評價。

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