602例早產兒ABO溶血三項試驗的結果分析

杜淑文 楊培峰 張儀 任方

摘要：目的：探討母兒ABO血型不合的早產兒的血型及溶血三項試驗在新生兒溶血病早期診斷中的指導意義。方法：收集2018年1月至2019年1月期間收治的602例疑似母兒ABO血型不合的早產兒血液標本，根據血型、溶血三項試驗進行統計與分析。結果：（1）：602例標本中，母嬰ABO血型均為O型RH（+）共計180例，母嬰ABO血型不合者共計422例，其中確診為新生兒ABO溶血病者225例，陽性率53.32%，其中A型RH（+）新生兒溶血病131例，陽性率58.22% ，B型RH（+）新生兒溶血病93例，陽性率41.33%。兩者比較差異具有統計學意義（P<0.05）。（2）225例新生兒ABO溶血病溶血三項：直接抗球蛋白試驗陽性11例，陽性率4.89%，釋放抗體試驗陽性167例，陽性率74.22%，游離抗體試驗陽性140例，陽性率62.22%，三者比較差異具有統計學意義（P<0.05）。結論：及早地對疑似母兒血型不合的早產兒進行血型及溶血三項試驗檢測對新生兒溶血病的預防及治療有重要意義，另外，應綜合考慮早產兒群體的特殊性，密切結合臨床癥狀作出相應防治措施，避免延誤診療。

關鍵詞：早產兒;新生兒溶血病;血型;溶血三項試驗

【中圖分類號】 R722? ? 【文獻標識碼】 A? ? ? 【文章編號】2107-2306（2022）03--02

新生兒溶血病（hamolytic disease of the fetus and newborn，HDFN ）是指母嬰血型不合，母體針對與其不同的胎兒紅細胞抗原所產生的相應抗體經胎盤進入胎兒血液循環，導致新生兒同種免疫性溶血引起的一系列臨床癥狀[1]。根據發病原因，分為ABO新生兒溶血病（ABO-HDN）及ABO以外不規則抗體引起的非ABO-HDN。在已發現的人類26個血型系統中，ABO血型不合溶血病相對于RH血型不合溶血病較常見。有報道我國ABO溶血病占新生兒溶血病的85.3%[2]，輕者出現貧血、水腫、水腫、肝脾腫大、重者如果未經處理，可能導致胎兒重度貧血，嚴重的新生兒高膽紅素血癥與核黃疸甚至死亡[3] 。因此，早診斷、早治療、早預防新生兒溶血病對提高早產兒生存質量具有重要的指導意義及現實意義。

溶血病三項檢測是目前檢測胎兒出生后新生兒溶血病最常用的實驗方法， 其檢測內容包括直接抗人球蛋白試驗（DAT）、游離抗體試驗（游離試驗）和紅細胞釋放抗體試驗（釋放試驗）[4]。既往對足月兒 ABO 溶血病的研究發現，有 30% 的足月兒直接抗人球蛋白試驗陽性，母親通過胎盤傳遞給胎兒的 IgG 抗體與胎齡呈正相關，早產兒的IgG 水平可能低于足月兒，因此對于早產兒發生新生兒溶血病的發現可能與足兒不同。

為了更好地為早產兒溶血病的早診斷、早治療提供依據， 本研究通過回顧分析2018年至2019年間602例疑似HDN的早產兒母兒血液標本進行相關檢測及統計分析，現將研究成果報告如下。

一、資料及方法

1.1一般資料：本次研究對象為我院在2018年1月至2019年1月期間收治的602例疑似母嬰ABO血型不合的早產新生兒，研究對象均為母親型為O型RH（+），父親為其他血型的新生兒。納入標準：新生兒溶血病的診斷依據綜合臨床癥狀確診，胎齡28-37周且臨床資料完整，新生兒父母RH血型為陽性，新生兒風疹病毒，巨細胞病毒，單純皰疹病毒及弓形蟲檢查為陰性，肝腎功能檢查正常。排除標準：（1）母孕期患有免疫系統疾病或使用過免疫抑制劑;（2）臨床資料不全、出生時有嚴重窒息或嚴重畸形的早產兒;（3）住院期間自動放棄治療者。本研究經我院倫理委員會批準實施，同時獲得早產兒家屬知情同意。

1.2方法：

1.2.1血型鑒定 采用微柱凝膠法，參照《全國臨床檢驗操作規程》[5]進行早產兒 ABO 血型鑒定。

1.2.2 溶血病三項試驗 參照 《全國臨床檢驗操作規程》[5]進行溶血病三項試驗

1.3 統計學處理：應用 Excel收集數據，用 SPSS20.0統計軟件對數據進行統計分析，計數資料用N（%）表示，新生兒溶血病早產兒血型、溶血三項實驗采用獨立樣本χ2檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

二、結果

2.1母嬰血型鑒定結果：602例標本中，母嬰ABO血型均為O型共計180例，母嬰血型不合者共計422例，O-A血型者205例，O-B血型者216例，O-AB血型者1例，其中確診為新生兒ABO溶血癥者225例，陽性率53.32%，其中A型RH（+）新生兒溶血病131例，陽性率58.22% ，B型RH（+）新生兒溶血病93例，陽性率41.33%.兩者比較差異具有統計學意義（P<0.05）

2.2 新生兒溶血病患兒溶血三項的檢測結果：225例新生兒ABO溶血病溶血三項結果：直接抗球蛋白陽性11例，陽性率4.89%，釋放抗體試驗陽性167例，陽性率74.22%，游離抗體試驗140例，陽性率62.22%，三種比較差異具有統計學意義（P<0.05），見表2）.

2.3新生兒ABO溶血病溶血三項聯合檢測實驗結果：按照溶血三項檢測結果的不同將225例新生兒溶血病患兒分成5組，三組全陽性占4.89%，抗體釋放試驗和游離抗體試驗陽性占52.89%，僅抗體釋放試驗陽性占16.44%，僅游離抗體試驗陽性占4.44%，其中溶血三項實驗均為陰性占21.33%，見表3

三、討論

新生兒溶血病發生的主要是胎兒和母親血型不相容，紅細胞進入母體，經免疫反應產生同種免疫抗體IgG ，后者通過胎盤進入胎兒血液循環，致敏胎兒紅細胞，致敏的紅細胞被網狀系統破壞，導致新生兒貧血、黃疸、水腫及肝脾腫大，溶血產生的大量未結合膽紅素透過血腦屏障使腦神經核黃染，出現膽紅素腦病，使患兒神經細胞、智力發育及運動功能障礙等均收到損害[6] 。 ABO新生兒溶血病的發生及嚴重程度，與新生兒細胞A/B抗原結合位點的表達量、血型物質、胎盤的屏障作用及IgG亞類的不同有明顯相關性[7，8]。同時，母親體內IgG抗—A或IgG抗—B滴度與HDN的發生發展關系密切[9]。本研究發現A型HDN陽性率58.22%高于B型陽性率41.33%，與國內郭瑩瑩[10]及Murray[11] 等報道一致，O-A母兒模式HDN發生率較O-B母兒血型模式高可能與血型抗原結合位點有關，在血型系統抗原結構上，A 型紅細胞抗原結合位0.81～1.17×106 比 B 型紅細胞抗原結合位點 0.61～0.83×106 數量多[12]. 此外，本研究發現一例母親血型O型，新生兒血型為AB型且患有嚴重新生兒溶血病，考慮母嬰這種異常ABO血型遺傳是基于罕見的ABO等位基因的遺傳，該等位基因編碼能夠合成A和B抗原的糖基轉移酶，因此在這種情況下，抗A和抗B抗原都可能參與溶血。有文獻[13]曾報道1例O型母親所生AB 血型的嬰兒發生嚴重 ABO 新生兒溶血，在該患兒血清中同時檢測出 IgG 抗-A 和抗-B 兩種抗體，該新生兒具有持續升高的高膽紅素血癥以及嚴重的貧血。但是溶血三項實驗均為陰性可能與這一假設不相符。

目前新生兒溶血病的試驗室檢測方案包括（1）產前檢查方案：所有孕婦在妊娠8-12周建檔時進行ABO和RHD血型鑒定，紅細胞不規則抗體篩查。（2）胎兒出生后檢測：可采集臍帶血或新生兒血樣進行直接抗人球蛋白試驗、游離抗體試驗、紅細胞抗體放散試驗，同時進行血紅蛋白和膽紅素測定。（3）胎母出血檢測，對于羊膜穿刺術、異位妊娠、產前出血、宮內死亡、剖腹產等孕婦，及RHD陰性孕婦預防注射抗-D免疫球蛋白等，推薦進行胎母出血檢測[3]。除了實驗室檢測，新生兒溶血病診斷應綜合臨床表現最終確診[14]。直接抗球蛋白試驗是用來檢測新生兒體內的紅細胞是否被母親來源的 IgG抗體致敏，進入胎盤的IgG與胎齡相關，加上早產兒紅細胞上的血型抗原數量少，能與母體IgG抗體結合的位點有限，直接抗球蛋白試驗常出現陰性的結果，在本試驗研究中，只有4.89%的早產兒DAT陽性得以驗證，直接抗球蛋白試驗陰性不能表示患兒沒有溶血病的發生。游離試驗是用來檢測新生兒血漿中是否存在與其紅細胞未結合的IgG 抗體，有助于觀察疾病的發展趨勢和治療。本研究62.22%的早產兒兒游離試驗陽性，部分新生兒溶血病患兒的游離抗體試驗檢測結果為陰性，這可能與新生兒的胎齡有關，胎齡越小，IgG含量越低，部分母體中的IgG抗體未進入新生兒體內，僅吸附于紅細胞上，血漿中則無游離IgG抗體，導致試驗結果為陰性[15] 。抗體釋放試驗檢出抗體特異性是HDN診斷的重要依據，陽性結果表明患兒紅細胞IgGg抗A（B）抗體所致敏。本試驗研究發現抗體釋放試驗陽性率比例最大，占74.22%，明顯高于游離抗體試驗、直接抗球蛋白試驗。此外，根據統計溶血三項實驗結果不同陰陽性組合發現，抗體釋放試驗陽性和（或）游離抗體試驗陽性對于判斷新生兒溶血病陽性率最高。同時觀察到，有的早產兒黃疸、貧血很明顯，但 ABO—HDN三項檢測皆為陰性。認為可能有以下原因：（1）抽樣時間較晚，使試驗結果成假陰性，因 此強調早期抽樣的重要性。（2）可能為其他原因造成新生兒溶血病。如：遺傳性葡萄糖一6一磷酸脫氫酶 異常、遺傳性球形紅細胞癥以及血紅蛋白合成異常、 由感染引起的紅細胞獲得性缺陷等等。

早產發生率在不同種族和社會狀況有所不同， 一般在7%左右（5%～10%）[16] 隨著醫療技術的快速進展，早產兒存活率不斷提高。但由于早產兒是一類特殊的群體，其出生時細胞免疫、體液免疫及黏膜屏障均未完全發育成熟，早產帶來的高圍產兒死亡及體格、智能發育障礙是兒童醫療保健的難題。所以對母兒血型不合的早產兒，及時并盡早的進行血型及溶血三項實驗的檢測具有重要的臨床意義，另外，應綜合考慮早產兒群體的特殊性，密切結合臨床癥狀作出相應防治措施，避免延誤診療。

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