蔬菜中重金屬汞的快速測定及方法評(píng)估

◎ 付 英，夏 云

（阿克蘇地區(qū)食品安全檢測中心，新疆 阿克蘇 843000）

隨著工業(yè)的快速發(fā)展，環(huán)境污染導(dǎo)致的食品中重金屬殘留問題越來越突出[1]。由于大氣沉積、土壤、化肥、降雨和灌溉等環(huán)境因素的影響，重金屬在生物富集的作用下進(jìn)入農(nóng)產(chǎn)品中，從而造成重金屬的污染[2]。2019年汞及汞的化合物被列入有毒有害水污染物名錄[3]。重金屬汞可通過皮膚接觸、呼吸道及消化道等途徑被人體攝入，并以高毒性有機(jī)化合物形式對(duì)大腦、神經(jīng)、腎臟和消化系統(tǒng)造成危害，嚴(yán)重威脅人類的生命安全，如發(fā)生在日本的水俁病[4]。

蔬菜可為人體提供必需的多種維生素和礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，是人們?nèi)粘ｏ嬍持斜夭豢缮俚氖澄?。檢測蔬菜中重金屬汞的污染，加快重金屬汞的快速篩查，對(duì)有效建立重金屬汞含量超標(biāo)預(yù)警機(jī)制有重要意義。目前，常規(guī)重金屬汞的檢測方法有原子熒光光譜分析法、冷原子吸收光譜法、電感耦合等離子體質(zhì)譜法等。此類方法的檢測儀器成本較高，操作復(fù)雜，耗時(shí)較長，且必須送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測，無法進(jìn)行現(xiàn)場檢測[5]?？鞕z技術(shù)操作簡單、快速、成本低，能滿足現(xiàn)場檢測、快速篩查的要求，多用于果蔬樣品的初步篩選。因此，建立一種簡單、準(zhǔn)確、高效的重金屬汞快速檢測方法具有重要意義。

本文選取重金屬汞快檢試劑盒對(duì)阿克蘇市市售蔬菜中重金屬汞含量進(jìn)行評(píng)估，以《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總汞及有機(jī)汞的測定》（GB 5009.17—2014）第一法原子熒光光譜分析法作為參比方法，根據(jù)重金屬汞快檢試劑盒說明書對(duì)該快檢試劑盒的特異性、靈敏度、假陰性率和假陽性率等相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

隨機(jī)選取本地銷售的白菜、番茄、黃瓜樣品，均為阿克蘇市地產(chǎn)蔬菜；重金屬汞標(biāo)準(zhǔn)品（1 000 μg·mL-1，壇墨）；硝酸（優(yōu)級(jí)純）；重金屬汞快檢試劑盒（為避免評(píng)價(jià)結(jié)果作為廠家宣傳工具，簡稱為試劑盒）。

1.2 儀器與設(shè)備

微波消解儀，上海屹堯分析儀器有限公司；原子熒光光譜儀，北京吉天儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 樣品制備

取蔬菜樣品各2.5 kg經(jīng)縮分后，分別粉碎混勻，各制成待測樣品3份，放入分裝容器中，于-20 ℃下保存，備用。

1.3.2 國家標(biāo)準(zhǔn)方法測定

分別稱取白菜、番茄、黃瓜樣品0.5 g于消解罐中，各加入5 mL硝酸，加蓋放置過夜，旋緊罐蓋，按照微波消解儀的標(biāo)準(zhǔn)操作步驟進(jìn)行消解。冷卻后全部取出，緩慢打開罐蓋排氣，用少量水沖洗內(nèi)蓋，將各消解罐放在控溫電熱板上，于80 ℃加熱5 min，趕出棕色氣體，將各消化液分別轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中，用少量水分3次洗滌所有內(nèi)罐，洗滌液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻用原子熒光光譜儀測定，同時(shí)作空白試驗(yàn)。

1.3.3 回收率的測定

對(duì)制備的白菜待測樣進(jìn)行加標(biāo)，添加重金屬汞的濃度為0.1 mg·kg-1、1.0 mg·kg-1，通過對(duì)樣品進(jìn)行消化、趕酸，用原子熒光光譜儀檢驗(yàn)得到回收率。

1.3.4 快檢方法測定

按照重金屬汞快檢試劑盒說明書進(jìn)行操作，對(duì)快檢試劑盒進(jìn)行評(píng)估。分別取制備好的白菜、番茄、黃瓜樣品5 g于50 mL錐形瓶中，加入25 mL蒸餾水，加入5 mL檢測液A，加入1份試劑B，將錐形瓶放在電熱板上，調(diào)節(jié)溫控旋鈕使樣液微沸約10 min（驅(qū)除硫化物的干擾），此時(shí)加入1片銅片，保持微沸約20 min。注意隨時(shí)補(bǔ)加熱水，保持體積不變。若加熱30 min后銅片表面未變色，可判定為陰性樣，若銅片變色，可按表1推測樣品中可能存在的化合物，并采取相應(yīng)措施進(jìn)行處理。

表1 快檢結(jié)果判定表

1.3.5 數(shù)據(jù)處理

根據(jù)《食品快速檢測方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》計(jì)算試劑盒靈敏度、特異性、假陰性率和假陽性率。

2 結(jié)果與分析

2.1 蔬菜中重金屬汞的檢測結(jié)果

采用《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中總汞及有機(jī)汞的測定》（GB 5009.17—2014）第一法原子熒光光譜分析法進(jìn)行檢測，重金屬汞的檢出限為0.003 mg·kg-1，低于0.003 mg·kg-1報(bào)出值為未檢出，檢測結(jié)果均為未檢出，見表2。采用汞快檢試劑盒對(duì)蔬菜樣品進(jìn)行重金屬汞污染的檢測，檢測結(jié)果均為陰性，見表3。檢測結(jié)果顯示采用快檢方法和國標(biāo)方法檢測蔬菜中重金屬汞的殘留，結(jié)果均為未檢出。

表2 市售蔬菜隨機(jī)樣重金屬汞檢測結(jié)果表

表3 市售蔬菜隨機(jī)樣重金屬汞快檢試劑盒檢測結(jié)果表

2.2 重金屬汞的加標(biāo)回收率

對(duì)制備的白菜待測樣進(jìn)行加標(biāo)，添加重金屬汞的濃度為0.1 mg·kg-1、1.0 mg·kg-1，通過對(duì)樣品進(jìn)行提取、凈化，用原子熒光光譜儀檢驗(yàn)得到回收率分別為95%、96%，滿足回收率實(shí)驗(yàn)要求，結(jié)果見表4。

表4 重金屬汞的回收率表

2.3 重金屬汞快檢試劑盒的評(píng)估

按照說明書，對(duì)白菜樣品進(jìn)行系列濃度加標(biāo)，評(píng)估此快檢試劑盒檢測重金屬汞的適用性。取白菜待測樣品分別添加0 mg·kg-1、0.25 mg·kg-1、0.40 mg·kg-1、0.50 mg·kg-1和1.00 mg·kg-1的 汞 標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液，每 個(gè)濃度重復(fù)10次。說明書顯示此試劑盒的檢出限為0.5 mg·kg-1，即＞0.5 mg·kg-1為陽性樣品，＜0.5 mg·kg-1為陰性樣品。檢驗(yàn)結(jié)果及顯色情況見表5和圖1。試劑盒的檢出限為0.5 g·kg-1，樣品在0.4 g·kg-1時(shí)開始顯銀灰色，對(duì)其進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該濃度顯色不穩(wěn)定，40%為陽性，60%為陰性。依據(jù)《食品快速檢測方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》計(jì)算此試劑盒的假陽性率、假陰性率、靈敏度、特異性和顯著性差異，結(jié)果見表6。

表5 白菜中添加重金屬汞的顯色情況表

圖1 蔬菜中不同濃度重金屬汞顯色情況圖

表6 重金屬汞快檢評(píng)估分析表

3 結(jié)論

根據(jù)《食品快速檢測方法評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》得出試劑盒靈敏度100%，特異性86.67%，假陰性率0，假陽性率13.33%，顯著性差異2.25，表示參比方法與快檢方法的陽性確認(rèn)比率在95%的置信區(qū)間內(nèi)有顯著性差異，相對(duì)準(zhǔn)確度92%。根據(jù)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量》（GB 2762—2017），重金屬汞在蔬菜中的限量要求是0.01 mg·kg-1，該試劑盒檢出限為0.5 g·kg-1，樣品在0.4 g·kg-1時(shí)開始顯銀灰色，且顯色不穩(wěn)定，40%為陽性，60%為陰性。因此，重金屬汞的快檢試劑盒在蔬菜中的應(yīng)用還需進(jìn)行進(jìn)一步研究。