參芍口服液對(duì)心肌梗死患者Wnt/β-catenin通路及預(yù)后的影響*

劉 帆，邸亞麗，紀(jì) 征

(唐山市工人醫(yī)院心內(nèi)一科，河北 唐山 063000)

隨著醫(yī)療水平快速發(fā)展，急性心肌梗死的早期搶救成功率顯著提高，冠狀動(dòng)脈介入治療成為拯救壞死心肌的最佳解決手段[1]，但遠(yuǎn)期研究發(fā)現(xiàn)，心肌梗死的整體死亡率并沒(méi)有因此而降低，再發(fā)的不良心血管事件，包括急慢性心力衰竭、再發(fā)心肌梗死、室性心動(dòng)過(guò)速、心室顫動(dòng)等惡性心律失常、心臟破裂、腦卒中、心搏驟停等，仍是目前不可忽略的問(wèn)題。因此，對(duì)于心肌梗死的預(yù)后評(píng)估是十分有意義的。在人類生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中存在一個(gè)極其保守的信號(hào)途徑，因以細(xì)胞外因子(Wnt)蛋白作為起始因子,故命名為Wnt信號(hào)通路。在胚胎發(fā)育和腫瘤發(fā)生領(lǐng)域中，關(guān)于Wnt通路的研究眾多,但在心血管方面的研究才剛剛開(kāi)始。近年來(lái)，我國(guó)的中醫(yī)中藥發(fā)展迅速，特別是在心肌梗死方面的研究成果喜人。參芍口服液屬于純中藥復(fù)方制劑[2]，其主要成分有丹參、黃芪、當(dāng)歸、赤芍、川芎等，具有活血化瘀、補(bǔ)氣通絡(luò)的功效，心內(nèi)科主要用于治療冠心病、心絞痛，主要癥狀為胸悶刺痛、心悸氣短、倦怠乏力。Wnt/β-連環(huán)蛋白(β-catenin)信號(hào)通路是與胃癌等多種惡性腫瘤疾病和骨關(guān)節(jié)炎等炎癥性疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)的信號(hào)通路，通過(guò)上下游級(jí)聯(lián)機(jī)制參與多種生理、病理過(guò)程[3]。然而，目前尚不清楚Wnt/β-catenin通路是否可受參芍口服液影響，參與介導(dǎo)心肌梗死的疾病進(jìn)展。前期研究發(fā)現(xiàn)，參芍口服液對(duì)大鼠心肌梗死區(qū)的愈合有良好的治療作用，可能是通過(guò)調(diào)控Wnt/β-catenin通路蛋白促進(jìn)肌纖維母細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等增殖、遷移至梗死區(qū)，減輕心肌壞死的程度，從而改善心功能。目前，參芍口服液已應(yīng)用于臨床多年，但其對(duì)心肌梗死愈合作用的分析研究較少。本研究旨在進(jìn)一步探討參芍口服液對(duì)心肌梗死患者Wnt/β-catenin通路及預(yù)后的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2018年7月到2020年3月擬行冠狀動(dòng)脈支架植入術(shù)的192例急性心肌梗死患者為研究對(duì)象，根據(jù)《急性ST 段抬高型心肌梗死診斷和治療指南》[4]做出急性心肌梗死診斷。患者納入標(biāo)準(zhǔn)：心肌梗死12 h內(nèi)住院；患者及家屬知情同意；接受支架植入術(shù)治療；經(jīng)心電圖等實(shí)驗(yàn)室檢查及心肌酶輔助檢查確診為ST段抬高型心肌梗死；均為18歲以上成年人；臨床資料完整，能夠配合參與本次研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并腦出血、腦梗死、腦卒中等其他心腦血管疾病者；心、肝、腎等重要器官功能不全者；妊娠期、哺乳期婦女；18歲以下或70歲以上者；對(duì)本次治療藥物或其組成成分過(guò)敏及不耐受者；配合度不佳，不愿參與本次研究者。共入組192 例患者中男108例，女84例，平均年齡(62.41±4.73)歲，平均體重指數(shù)(BMI)為24.66±4.08。 將所有患者隨機(jī)平均分為對(duì)照組及試驗(yàn)組。

1.2方法

1.2.1治療方法 所有患者術(shù)前均給予阿司匹林300 mg、替格瑞洛180 mg、阿托伐他汀40 mg口服，根據(jù)冠狀動(dòng)脈造影結(jié)果給予相應(yīng)的球囊擴(kuò)張和支架介入治療，術(shù)后常規(guī)抗凝、抗栓，并使用他汀類藥物調(diào)脂。試驗(yàn)組在此基礎(chǔ)上，加用參芍口服液10 mL 每天3次。

1.2.2研究指標(biāo) 兩組患者術(shù)后每天抽靜脈血送檢，檢測(cè)肌酸激酶同工酶(CK-MB)及肌鈣蛋白(TNI)水平，記錄達(dá)到酶峰及恢復(fù)至正常的時(shí)間；于心肌梗死當(dāng)天及術(shù)后7 d分別抽取兩組患者靜脈血，室溫血液自然凝固10～20 min，2～8 ℃條件下離心20 min左右(2 000～3 000 r/min)，仔細(xì)收集上清液，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)Wnt10b、β-catenin及T細(xì)胞因子4(TCF-4)水平，試劑盒購(gòu)自上海江萊生物科技有限公司，按照說(shuō)明書(shū)操作，于波長(zhǎng)450 nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值。于術(shù)后6個(gè)月電話隨訪，統(tǒng)計(jì)兩組的主要心臟不良事件(MACE)發(fā)生率，MACE包括：頻發(fā)心絞痛、嚴(yán)重心律失常、急性心肌再梗死、支架內(nèi)血栓栓塞、心源性休克等[4-5]。

2 結(jié) 果

2.1兩組Wnt10b、β-catenin及TCF-4水平比較 兩組患者在急性心肌梗死當(dāng)天Wnt10b、β-catenin及TCF-4水平均在較低水平，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；而在術(shù)后7 d兩組以上指標(biāo)水平均有顯著升高，對(duì)照組較試驗(yàn)組升高更明顯，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者不同時(shí)間Wnt10b、β-catenin及TCF-4水平比較

2.2兩組患者CK-MB及TNI水平達(dá)到峰值、恢復(fù)正常時(shí)間比較 試驗(yàn)組CKMB、TNI水平到達(dá)峰值時(shí)間較對(duì)照組明顯提前，恢復(fù)正常時(shí)間較對(duì)照組明顯縮短，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組患者CKMB及TNI水平達(dá)到峰值、恢復(fù)正常時(shí)間比較

2.3兩組MACE發(fā)生情況比較 經(jīng)電話隨訪，192例患者中共發(fā)生MACE 26例，其中頻發(fā)心絞痛10例(前壁心肌梗死和下壁心肌梗死各5例)，支架內(nèi)再狹窄6例(其中前壁心肌梗死4例，下壁心肌梗死2例)，嚴(yán)重的心律失常8例(其中下壁心肌梗死6例，前壁心肌梗死2例)，心源性休克死亡2例(均為前壁心肌梗死)。試驗(yàn)組MACE發(fā)生率明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 兩組MACE發(fā)生情況比較

3 討 論

近年來(lái)，對(duì)于急性心肌梗死的診斷和治療有飛躍進(jìn)展，盡早地應(yīng)用抗凝、抗血小板藥物、盡早地打開(kāi)罪犯血管，無(wú)疑是挽救壞死心肌的主要手段。盡管心肌梗死的早期處理積極正確，但仍面臨著比例較高的MACE，導(dǎo)致預(yù)后不良甚至致死性心臟病的發(fā)生[6]，積極有效的預(yù)測(cè)及治療受到更多臨床醫(yī)生的重視。前期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，成人中的沉默信號(hào)通路Wnt，在心肌梗死發(fā)生后，在梗死區(qū)重新開(kāi)啟[7]，參與其中的一系列蛋白如信號(hào)蛋白Wnt10b、信使β-catenin、效應(yīng)蛋白TCF-4等，都出現(xiàn)顯著的級(jí)聯(lián)放大效應(yīng)，使成纖維細(xì)胞向梗死區(qū)遷移、增殖，激發(fā)形成新生血管[8-10]，促進(jìn)梗死區(qū)愈合，預(yù)防心肌破裂，從而維持心臟功能。這種通路蛋白在心肌損傷后很快激增，高峰發(fā)生在心肌梗死后7 d左右[11]，而后隨著心臟的愈合恢復(fù)便逐漸下降，幾乎在28 d左右完成心肌愈合。本研究通過(guò)觀察心肌梗死患者的預(yù)后指標(biāo)，即在心肌梗死后7 d左右，Wnt信號(hào)通路蛋白高水平表達(dá)，且應(yīng)用參芍口服液后，通過(guò)積極上調(diào)此通路，可使CKMB及TNI水平達(dá)到峰值時(shí)間提前，恢復(fù)正常時(shí)間縮短，并可在遠(yuǎn)期降低MACE發(fā)生率。且本研究中對(duì)照組MACE發(fā)生率為16.7%，這與嚴(yán)葉香等[12]的研究結(jié)果一致。因此，Wnt信號(hào)通路有望成為心肌梗死恢復(fù)的預(yù)測(cè)指標(biāo)。

參芍口服液是本院制劑室以唐山工人醫(yī)院心內(nèi)科專家的經(jīng)驗(yàn)處方為基礎(chǔ)，制備成純中藥復(fù)方制劑，成分有丹參、黃芪、當(dāng)歸、赤芍、川芎等，根據(jù)處方中的各味藥材的理化性質(zhì)進(jìn)行提取工藝研究并制成口服液。采用L9(34)正交試驗(yàn)法,以阿魏酸、丹參素和干浸膏得率為考核指標(biāo),優(yōu)選醇提工藝、水提工藝和精制除雜工藝制成。此藥在心內(nèi)科主要用于治療氣虛血瘀，脈絡(luò)閉阻所致的胸痹、心痛證的患者，且十分有效。現(xiàn)已證實(shí)，參芍口服液對(duì)于冠心病、高血脂、心絞痛患者有一定的療效[13-21]。且本研究也證實(shí)了參芍口服液對(duì)心肌梗死患者Wnt/β-catenin通路的作用效果明顯，對(duì)于心肌梗死的預(yù)后有積極作用。