多發傷合并膿毒癥患者血漿s-CD62P水平與炎癥因子、凝血指標的相關性研究*

陸暢，薛建華，劉佳佳，楊洋

（南通大學附屬醫院 創傷中心，江蘇 南通226001）

多發傷，指的是由同一致傷因素造成的至少兩個解剖部位同時發生的創傷，且其中至少有一處創傷可能危及生命[1]。多發傷患者常合并膿毒癥、多器官功能障礙綜合征、全身炎癥反應綜合征等，有較高的致殘率和病死率，其中膿毒癥是多發傷患者死亡的一個重要原因。膿毒癥被認為是全身炎癥平衡失調所引起的進行性內皮細胞損傷、血小板及白細胞激活、凝血系統受損，進而造成的多器官功能障礙[2]。可溶性顆粒膜蛋白CD62P（s-CD62P）是黏附分子選擇素家族的成員之一，是血小板活化及內皮損傷的重要標志物，同時在啟動和維持炎癥狀態過程中也發揮重要作用[3]。既往關于s-CD62P 的研究重心基本上都放在心血管疾病方面，較少有研究揭示s-CD62P 與膿毒癥患者凝血系統、炎癥反應的關系。本研究擬探討s-CD62P 與多發傷膿毒癥患者炎癥因子、凝血指標之間的關系，以期為膿毒癥以s-CD62P 為靶點的抗黏附治療提供科學依據，提高患者的救治成功率。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月—2019年12月南通大學附屬醫院ICU 收治的102 例多發傷合并膿毒癥患者為觀察組。其中，男性60 例，女性42 例；年齡24～76 歲，平均（48.85±18.24）歲；致傷原因：交通事故61 例，高處墜落12 例，銳器刺傷12 例，鈍器砸傷10 例，其他7 例；伴顱腦損傷66 例，伴胸部傷60 例，伴腹部傷48 例，伴骨盆四肢骨折90 例，伴面部損傷12 例，伴體表損傷10 例。納入標準：年齡≥18 歲；符合多發傷診斷標準；符合《中國嚴重膿毒癥/膿毒性休克治療指南（2014）》的膿毒癥診斷標準[4]：白細胞計數升高，有發熱、心動過速、呼吸急促等癥狀； 伴有全身炎癥反應綜合征（systemic inflammatory response syndrome, SIRS）[5]；創傷嚴重度評分＜16 分；受傷至入住ICU 時間不超過24 h，且ICU 入住時間不低于48 h。排除標準：合并糖尿病、高血壓、心臟疾病；處于妊娠期；伴有呼吸系統疾病；近期應用過免疫抑制劑。另選取同期100 例體檢健康者為對照組，身體狀況良好，各項體檢結果正常。其中，男性55 例，女性45 例；年齡28～74 歲，平均（50.04±16.38）歲。兩組的性別構成、年齡比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究通過醫院倫理委員會批準，患者或家屬知情并簽署知情同意書。

1.2 方法

觀察組在入住ICU 后24～48 h 內、對照組在體檢時分別采集空腹靜脈血6 mL。采集的血液標本分為3 份，各2 mL。一份以乙二胺四乙酸二鉀抗凝管保存（1 號管），一份以分離膠促凝管保存（2 號管），一份以枸櫞酸鈉抗凝管保存（3 號管）。1 號管血樣3 000 r/min 離心10 min，去除上清液，保留血漿，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法檢測血漿s-CD62P 水平，試劑盒購自美國R&D 公司，嚴格按照試劑盒說明書操作。2 號管血樣4 000 r/min 離心5 min，取上清液，用Beckman Coulter AU5821 全自動生化分析儀（購自美國貝克曼庫爾特有限公司），采用雙抗夾心免疫發光法檢測降鈣素原（PCT）水平，采用酶聯免疫吸附法檢測炎癥因子，包括腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、超敏C 反應蛋白（hs-CRP）、白細胞介素-6（IL-6）水平，試劑盒購自北京晶美生物公司，嚴格按照試劑盒說明書操作。3 號管血樣4 000 r/min 離心5 min，去除上清液，保留血漿，用Sysmex CS 5100 全自動凝血分析儀（購自日本希森美康公司）檢測凝血相關指標，包括凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、血小板計數（PLT）、D-二聚體（D-D）。分離出的血漿需及時送檢，室溫放置不得超過2 h，2～8℃保存時間不得超過4 h，以保證檢測結果的準確性。

1.3 統計學方法

數據分析采用SPSS 20.0 統計軟件。計數資料以構成比（%）表示，比較用χ2檢驗；計量資料以均數±標準差（±s）表示，比較用t檢驗；相關性分析用Pearson 法。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組炎癥因子、血漿s-CD62P水平比較

兩組的TNF-α、hs-CRP、PCT、IL-6 及血漿s-CD62P 水平比較，差異有統計學意義（P＜0.05），觀察組高于對照組。見表1。

表1 兩組的炎癥因子、血漿s-CD62P水平比較 （±s）

表1 兩組的炎癥因子、血漿s-CD62P水平比較 （±s）

組別觀察組對照組t 值P 值n 102 100 TNF-α/（pg/mL）32.35±13.82 5.37±1.14 19.457 0.000 hs-CRP/（mg/L）92.46±20.25 3.37±1.86 43.812 0.000 PCT/（μg/L）153.17±63.54 8.48±2.30 22.756 0.000 IL-6/（ng/L）158.27±9.05 62.64±11.28 66.525 0.000 s-CD62P/（ng/mL）223.05±69.14 96.25±31.54 16.713 0.000

2.2 兩組凝血指標比較

兩組PT、APTT、PLT、D-D 比較，差異有統計學意義（P＜0.05），觀察組的PT、APTT 長于對照組，D-D 水平高于對照組，PLT 低于對照組。見表2。

表2 兩組的凝血指標比較 （±s）

表2 兩組的凝血指標比較 （±s）

組別觀察組對照組t 值P 值n 102 100 PT/s 13.50±2.24 10.13±0.53 14.647 0.000 APTT/s 37.52±13.51 20.36±2.42 12.506 0.000 PLT/（×109/L）153.65±46.24 233.58±24.15 15.354 0.000 D-D/（μg/L）860.14±68.16 192.41±79.54 64.110 0.000

2.3 s-CD62P與炎癥因子、凝血指標的相關性

Pearson 相關分析顯示，s-CD62P 與TNF-α、hs-CRP、IL-6、PCT 水平呈正相關（均P＜0.05）；s-CD62P 與PT、APTT、D-D 水平呈正相關（均P＜0.05），與PLT 水平呈負相關（P＜0.05）。見表3。

表3 s-CD62P與炎癥因子、凝血指標的相關性

2.4 炎癥因子與凝血指標的相關性

Pearson 相關分析顯示，TNF-α 水平與PT、APTT、D-D 水平呈正相關（均P＜0.05），與PLT 呈負相關（P＜0.05）；hs-CRP 水平與PT、APTT、D-D水平呈正相關（均P＜0.05），與PLT 呈負相關（P＜0.05）；IL-6 水平與PT、APTT、D-D 水平呈正相關（均P＜0.05），與PLT 呈負相關（P＜0.05）；PCT 水平與PT、APTT、D-D 水平呈正相關（均P＜0.05），與PLT 呈負相關（P＜0.05）。見表4。

表4 炎癥因子與凝血指標的相關性分析

3 討論

多發傷患者并發膿毒癥是一個漸進的過程，炎癥因子在這一過程中發揮著關鍵性作用。本研究結果顯示多發傷合并膿毒癥患者的TNF-α、hs-CRP、PCT、IL-6 水平均高于健康者。這是因為創傷本身及創傷引起的失血、休克、疼痛等非特異性反應會使機體處于全身持續高代謝狀態，誘發產生大量的炎癥介質和血管活性物質。合并膿毒癥的多發傷患者病情危重，患者機體內炎癥機制與抗炎細胞因子平衡失調，SIRS 無法及時得到糾正，所以這類患者的炎癥反應程度更為嚴重[6]。

s-CD62P 是反映血小板活化情況的特異性標志物，同時也是炎癥反應啟動并維持所不可或缺的重要物質，所以s-CD62P 同時也是炎癥反應的標志物。s-CD62P 是內皮細胞、血小板在炎癥介質或組織缺氧刺激下最先表達的一種膜蛋白，其能通過結合細胞表面的P-選擇素糖蛋白配體-1（PSGL-1）來啟動白細胞與血小板，或者內皮細胞的黏附、遷移，進而引發內皮細胞損傷。s-CD62P 能夠介導血管內皮細胞與血小板的黏附、聚集，參與凝血，同時還可促進中性粒細胞在炎癥或受損內皮細胞局部的滾動，從而使炎癥反應加重[7-8]。本研究顯示多發傷合并膿毒癥患者的血漿s-CD62P 水平明顯比健康者更高。這與同類文獻報道[9]結論一致，表明多發傷合并膿毒癥患者發生了內皮細胞損傷，s-CD62P 可能通過參與炎癥反應促進膿毒癥的發生與發展[10]。魏捷等[11]的研究報道指出，在創傷失血性休克、重癥膿毒癥、膿毒癥休克三類患者的s-CD62P 水平均高于正常人，并且三類患者中，感染程度最高的膿毒癥休克患者的s-CD62P 水平最高，這表明s-CD62P 與機體炎癥反應程度密切相關，且兩者為正向關系。這與本次研究得出的多發傷合并膿毒癥患者的血漿s-CD62P 水平與炎癥因子TNF-α、hs-CRP、IL-6、PCT 均呈正相關結論一致。

本研究結果顯示，相比健康者，多發傷合并膿毒癥患者的D-D 水平明顯升高，PT、APTT 時間明顯延長，而PLT 水平明顯降低。這提示膿毒癥患者嚴重的炎癥反應可能造成了凝血系統活化、抗凝機制下調、纖溶系統抑制。王改鋒等[12]的報道指出，APTT、PT 水平膿毒癥組＜嚴重膿毒癥組＜膿毒癥休克組，纖維蛋白原水平膿毒癥組＞嚴重膿毒癥組＞膿毒癥休克組，凝血功能障礙隨著膿毒癥病情的加重而加重。這是因為：膿毒癥病情的持續進展會激活機體外源性凝血途徑，增強內源性抗凝系統活性，體內凝血/纖溶系統平衡被打破，生理性抗凝物質減少，從而使得機體處于高凝狀態[13]。研究[14-15]顯示，s-CD62P 能夠同時觸發炎癥和凝血級聯反應，介導血小板在內皮細胞和白細胞中的黏附，增強核因子κB 活性，促使單核細胞釋放大量組織因子，再與活化血小板膜融合而發生凝血。s-CD62P 表達的升高可促進廣泛微血管炎癥及血栓的形成，進而增加膿毒癥病死的風險。本研究結果也顯示s-CD62P 與凝血指標PT、APTT、D-D 呈正相關，與PLT 呈負相關。由此可見，s-CD62P 參與了血小板活化和凝血/纖溶系統失衡，其可能是多發傷膿毒癥患者炎癥反應，以及機體處于高凝狀態的始動因素之一。

綜上所述，s-CD62P 水平與炎癥因子、凝血指標密切相關，其可誘導膿毒癥炎癥-凝血網絡的形成，臨床針對s-CD62P 采取有效的抗黏附治療，可能有助于改善膿毒癥患者的高炎癥及高凝狀態，改善患者預后。