miR-34a 及miR-150 在阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征患者血清中的表達及臨床意義

趙麗，高靜杰，季宇騰，方崢嶸

1.南通瑞慈醫院神經內科，江蘇南通 226000；2.南通瑞慈醫院耳鼻喉科，江蘇南通 226000

臨床中，阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（obstructive sleep apnea hypopnea syndrome, OSAHS）是因上呼吸道反復阻塞擾亂睡眠中的正常通氣，從而影響患者睡眠質量，進而出現注意力不集中、頭痛、精神萎靡等癥狀，對患者神經系統功能造成影響，還可能誘發心腦血管相關疾病[1-2]。因此，臨床應重視OSAHS 的早期篩查，并予以有效干預治療。既往研究顯示，循環miRNA 對靶細胞有生物學影響，其參與多種疾病的發生進展[3]。有研究報道，miR-34a 與血管內皮細胞損傷存在相關性[4]，miR-150 的 表 達 與ST 段 抬 高 型 心 肌 梗 死（ST-segment elevation myocardial infarction, STEMI）患者預后有關[5]。但目前臨床對miR-34a 及miR-150 在OSAHS 中的意義的研究報道較少，因此，本研究選取2020 年4 月—2022 年4 月南通瑞慈醫院收治的78 例OSAHS 患者，探討miR-34a 及miR-150 在OSAHS 患者血清中的表達及臨床意義。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的78 例OSAHS 患者納入觀察組，按照呼吸暫停低通氣指數（apnea hypopnea index, AHI）將其分為輕度組（AHI≤10 次/h，22 例）、中度組（10 次/h＜AHI≤20 次/h，39 例）及重度組（AHI＞20 次/h，17 例），另選取同期本院體檢健康者50 名納入對照組。觀察組中男49 例，女29 例；平均年齡（41.78±2.13）歲。對照組中男33 名，女17 名；平均年齡（42.31±3.09）歲，兩組年齡及性別比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院醫學倫理學委員會批準，且患者及其家屬知情同意。

1.2 納入與排除標準

納入標準：符合OSAHS 診斷標準[6]者；年齡＞18歲者。

排除標準：合并其他類型睡眠障礙性疾病者；存在呼吸系統疾病者；腦外傷者；惡性腫瘤者；嚴重心腦血管疾病及既往接受耳鼻喉手術者。

1.3 方法

采用德國SOMNO screen puls PSG+多導睡眠監測儀進行睡眠監測，監測時間為21∶00-07∶00，由專業醫師判定分析監測結果，包括：最低血氧飽和度（lowest oxygen saturation, LSpO2）、睡眠呼吸暫停低通氣指數（apnea hypopnea index, AHI）、氧飽和度＜90%時間占睡眠時間百分比（percentage of sleep time when oxygen saturation is lower than 90%, Ts90%）。于睡眠監測結束后采集空腹靜脈血8 mL，按照試劑盒說明書提取血清RNA，進行逆轉錄反應，應用實時熒光定量PCR 儀進行逆轉錄產物擴增。

1.4 觀察指標

①以β-actin 為內參，應用2-△△CT方法計算miR-34a 及miR-150 的相對表達量；②采用全自動生化分析儀檢測低密度脂蛋白（low density lipoprotein, LDL）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein, HDL）、總膽固醇（total cholesterol, TC）和三酰甘油（triacylglycerol, TG）水平。

1.5 統計方法

采用SPSS 21.0 統計學軟件處理數據，符合正態分布的計量資料用（±s）表示，組間差異比較采用t檢驗；多組比較采用方差分析，兩兩比較采用LSD法，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 觀察組和對照組實驗室指標比較

兩組LDL、HDL、TC、TG 比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；與對照組比較，觀察組LSpO2較低，AHI 和Ts90%較高，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 觀察組和對照組實驗室指標比較(±s)

表1 觀察組和對照組實驗室指標比較(±s)

2.2 觀察組和對照組血清miR-34a 及miR-150 的相對表達量比較

與對照組比較，觀察組患者血清中miR-34a 的相對表達量較高，miR-150 的相對表達量較低，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 觀察組和對照組血清miR-34a 及miR-150 的相對表達量比較(±s)

表2 觀察組和對照組血清miR-34a 及miR-150 的相對表達量比較(±s)

2.3 不同AHI 指數患者血清miR-34a 及miR-150的相對表達量比較

3 組血清miR-34a 及miR-150 相對表達量比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；與輕度組比較，中度組和重度組血清miR-34a 的相對表達量較高，而miR-150 的相對表達量較低，差異有統計學意義（P＜0.05）；與中度組比較，重度組血清miR-34a 的相對表達量較高，而miR-150 的相對表達量較低，差異有統計學意義（P＜0.05），見表3。

表3 不同AHI 指數患者血清miR-34a 及miR-150 的相對表達量比較(±s)

表3 不同AHI 指數患者血清miR-34a 及miR-150 的相對表達量比較(±s)

2.4 ROC 曲線分析

由ROC 曲 線 可 知，miR-34a 診 斷OSAHS 的 曲線下 面積為0.815（95%CI:0.721～0.936，P＜0.05），截斷值為3.54，敏感性為95.12%，特異性為83.44%；miR-150 診斷OSAHS 的曲線下面積為0.809（95%CI:0.708～0.914，P＜0.05），截斷值為0.83，敏感性為92.23%，特異性為80.56%，見圖1。

圖1 ROC 曲線分析

3 討論

臨床研究表明，miRNAs 在炎癥反應過程中發揮重要作用，其異常表達與神經系統疾病、腦損傷等相關[7-8]。OSAHS 的發病過程是一種慢性炎癥過程，其主要特征表現為間歇性低氧（intermittent hypoxia, IH），由于機體內低氧循環發生，進而誘發血管內皮細胞損傷[9-10]。最近研究顯示，miRNAs 在缺氧所致的組織細胞損傷中發揮重要作用[11]。因此，本研究探究了miR-34a 及miR-150 與OSAHS 的關系。既往研究顯示，miR-34a 對心血管疾病、血管內皮細胞功能障礙等有調控作用，其在高血壓、冠心病等患者血清中呈高表達[12-13]。另有研究報道，miR-150 可通過靶向血管內皮生長因子調節中動脈閉塞大鼠的血管生成及神經功能缺損[14]。miR-150 的上調可通過抑制信號通路，實現抑制炎癥反應及血栓形成的作用[15]。

本研究發現，與對照組比較，觀察組患者血清中miR-34a 的相對表達量（3.67±0.89）較高，而miR-150的相對表達量（0.67±0.15）較低（P＜0.05）。結果提示，OSAHS 患者血清中miR-34a 呈高表達，miR-150呈低表達。呂欣[16]研究發現，OSAHS 患者外泌體中miR-34a 的表達顯著上調，其相對表達量為（3.95±0.73），其可能成為治療OSAHS 患者血管內皮損傷的靶點。另有研究報道，miR-34a 的過表達可能對血管壁損傷信號通路有調節作用，從而降低炎癥反應程度[17]。潘琴艷等[18]研究發現，miR-150 水平變化與急性腹膜炎伴膿毒癥患者病情嚴重程度有關。另有研究報道，miR-150 與機體炎癥反應、神經炎癥損傷等密切相關[19-20]。由以上研究可知，miR-34a 及miR-150 的表達與多種疾病相關，且其表達水平與疾病嚴重程度有關。

進一步分析不同AHI 指數OSAHS 患者血清miR-34a 及miR-150 的表達發現，與輕度組比較，中度組和重度組血清miR-34a 表達較高，而miR-150 表達較低；與中度組比較，重度組血清miR-34a 表達較高，而miR-150 表達較低（P＜0.05）。這說明miR-34a 及miR-150 參與OSAHS 的發生過程，且其表達量隨患者病情加重而發生變化。分析原因可能為：miR-34a 水平的升高，可能是其對信號通路有促進作用；miR-150 水平的降低，可能是由于其對信號通路的活性有抑制作用，在削弱機體炎性反應時出現消耗性降低。因此推測miR-34a 表達上調及miR-150 的表達下調可促進OSAHS 患者機體細胞的衰老及凋亡。通過ROC曲線分析發現，miR-34a 診斷OSAHS 的曲線下面積為0.815（95%CI:0.721～0.936，P＜0.05），敏感性為95.12%，特異性為83.44%；miR-150 診斷OSAHS 的曲線下面積為0.809（95%CI:0.708～0.914，P＜0.05），敏感性為92.23%，特異性為80.56%。結果提示，miR-34a 及miR-150 診斷OSAHS 的敏感性及特異性均較高，推測二者或將成為OSAHS 臨床診斷的評價指標。

綜上所述，OSAHS 患者血清miR-34a 表達水平升高，而miR-150 表達水平降低，且其表達水平隨患者病情嚴重程度變化而變化，可作為OSAHS 臨床診斷的評價指標。