血清甲胎蛋白、甲胎蛋白異質體、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3聯合診斷肝細胞肝癌的臨床價值

李 輝 趙 娟 徐沛演 張成芳 譚麗娟 劉美三

1.廣州市花都區人民醫院內科，廣東廣州 510800；2.廣州市花都區人民醫院檢驗科，廣東廣州 510800；3.廣州市花都區人民醫院感染性疾病科，廣東廣州 510800；4.廣州市花都區人民醫院腫瘤科，廣東廣州 510800

肝細胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）為臨床常見惡性疾病[1]。研究顯示，HCC 發病隱匿，進展快，易轉移，多數患者確診即為中晚期，已喪失最佳手術時機，故早期診斷HCC 極為重要[2]。腫瘤標志物（tumor markers，TM）檢測盡管取材方便，簡便易行，但單一指標檢測敏感性、特異性相對較低，臨床常易出現漏診、錯診[3]。血清甲胎蛋白（alpha-fetoprotein, AFP）、甲胎蛋白異質體（Alpha-fetoprotein-L3，AFP-L3）、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（glypican-3，GPC3）為診斷HCC的重要TM，對于準確診斷HCC 具有重要價值，但單一TM 診斷效能相對較低，臨床多行2 種或多種TM 聯合診斷，以提高TM 的診斷效能。本研究探討AFP、AFP-L3、GPC3 聯合診斷HCC 的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年4月至2021年3月廣州市花都區人民醫院診斷的136 例疑似HCC 患者納入HCC 組，129 例肝臟良性疾病患者納入良性組，選取同期廣州市花都區人民醫院診治的140 例肝炎肝硬化患者納入對照組。HCC 組中，男86 例，女50 例；年齡29～78歲，平均（53.74±5.53）歲；中國肝癌的分期方案（China liver cance staging，CNLC）分期：Ⅰa 期14 例，Ⅰb 期19例，Ⅱa 期24 例，Ⅱb 期46 例，Ⅲa 期33 例；Child 分級：A 級104 例，B 級32 例； 美國東部腫瘤協作組（Eastern Cooperative Oncology Group，ECOG） 評分0～2 分，平均（1.18±0.13）分。納入標準：①患者符合《原發性肝癌診療規范》[4]標準；②患者對本研究知情同意；③患者卡氏（Karnofsky，KPS）評分＞60 分。排除標準：①有放化療史者；②轉移性肝癌者；③腫瘤已轉移者；④合并其他惡性腫瘤者；⑤依從性差者。良性組中，男81例，女48 例；年齡29～76 歲，平均（53.81±5.55）歲。對照組中，男89 例，女51 例；年齡28～78 歲，平均（53.95±5.60）歲。三組患者的性別、年齡等一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經醫院倫理委員會審核批準。

1.2 方法

HCC 組、良性組患者均于入院后第2 天抽取患者5 ml 清晨空腹靜脈血，置于促凝管內，以離心機離心5 min，離心半徑：8 cm；離心速度：3000 r/min，分離血清并保存于-20℃冰箱內待檢。AFP 以化學發光法檢測；AFP-L3 以微量離心柱法檢測；GPC3 以酶聯免疫法檢測。上述檢測均嚴格按照試劑盒規定步驟進行。對照組患者以上述方法檢測AFP、AFP-L3、GPC3 水平。比較三組患者的各項檢測結果。陽性預測值=真陽性例數/（真陽性+假陽性）例數×100%；陰性預測值=真陰性例數/（真陰性+假陰性）例數×100%；靈敏度=真陽性例數/（真陽性+假陰性）例數×100%；特異度=真陰性/（真陰性+假陽性）例數×100%；準確度=（真陽性+真陰性）例數/總例數×100%。

1.3 統計學方法

采用SPSS 19.0 統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t 檢驗；計數資料用率表示，兩組間比較采用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson 相關系數法，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組患者血清AFP、AFP-L3、GPC3 水平的比較

HCC 組患者的血清AFP、AFP-L3、GPC3 水平均高于良性組、對照組，良性組患者的血清AFP、AFPL3、GPC3 水平均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）（表1）。

表1 三組患者血清AFP、AFP-L3、GPC3 水平的比較（±s）

表1 三組患者血清AFP、AFP-L3、GPC3 水平的比較（±s）

注 與HCC 組比較，aP＜0.05； 與良性組比較，bP＜0.05；AFP： 甲胎蛋白；AFP-L3：甲胎蛋白異質體；GPC3：磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3；HCC：肝細胞肝癌

組別 例數 AFP（μg/L） AFP-L3（%） GPC3（μg/L）HCC 組良性組對照組F 值P 值136 129 140 140.86±16.31 101.89±11.87a 16.52±1.85ab 4127.678＜0.001 16.09±1.74 12.64±1.33a 7.07±0.73ab 1622.252＜0.001 10.19±1.21 2.73±0.30a 1.08±0.13ab 6113.744＜0.001

2.2 AFP、AFP-L3、GPC3 單獨、聯合診斷HCC 的診斷效能

對HCC 組所有患者進行診斷效能分析，AFP、AFP-L3、GPC3 聯合診斷HCC 的靈敏度、特異度、陰性預測值、陽性預測值、準確度均高于AFP、AFP-L3、GPC3 單獨及兩兩聯合診斷（表3）。

表3 AFP、AFP-L3、GPC3 單獨、聯合診斷HCC 的診斷效能[%（n/N）]

3 討論

影像學檢查及肝組織病理活檢是診斷HCC 的重要方法[5]。影像學檢查可明確診斷體積較大的HCC 病灶。但對于初發微小病灶，影像學檢查卻并無優勢[6]。肝組織病理活檢是診斷HCC 的金標準，該方法診斷HCC 盡管具有較高的診斷符合率，但難以取材，無法進行普查[7]。

TM 是腫瘤發生、進展過程中產生的標志性物質，在腫瘤篩查及早期診斷中具有重要價值[8]。研究顯示，血清TM 檢測有助于HCC 的診斷[9]。AFP 為人胚胎期即存在的糖蛋白，出生后其水平常降低至常態。通常，成人肝細胞不分泌AFP，故其血清AFP 水平相對較低，多不高于20 ng/ml[10]。肝細胞癌變時，未分化的肝細胞可表達大量AFP，且隨著癌變程度加重，AFP 表達程度也逐漸升高，導致血清AFP 水平升高，因此檢測血清AFP 可掌握HCC 發生進展[11]。資料顯示，盡管血清AFP 可用于HCC 的診斷，但因良性肝病、妊娠期女性AFP 也存在程度不同升高，故其臨床診斷率相對較低，且部分晚期HCC 患者AFP 水平并無特異性改變，臨床診斷較為困難[12]。郭鴻雁等[13]研究顯示，HCC 患者的血清AFP 高于肝臟良性疾病患者及正常人，且其AFP 診斷HCC 的敏感度（71.3%）、特異度（77.7%）偏低。

肝病患者多存在蛋白糖基化異常，生成多種具有腫瘤特異性的糖鏈結構[14]。AFP-L3 為肝臟分泌的AFP 異質體，既往常用于評價早期血管浸潤及腫瘤轉移，因其血清水平與腫瘤惡化程度成正相關，故近年來多用于早期HCC 的臨床診斷[15]。曾繁利等[16-18]證明，與正常人群及肝臟良性疾病相比較，HCC 患者的AFP-L3 水平顯著升高，且AFP-L3 單獨診斷HCC 的敏感度為76%，特異度為93%。

GPC-3 為磷脂酰肌醇蛋白聚糖，可經Yes 相關蛋白、生長因子及Wnt 通道調控HCC 的發生及進展[19]。GPC-3 高表達可誘導生成Wnt-frizzled 復合物，進而激活下游β-catenin，促進HCC 發展。GPC-3 可結合成纖維細胞生長因子，誘導后者結合其相關受體促進HCC 增殖[20]。研究顯示，GPC-3 在肝炎肝硬化患者及正常人血清中表達不顯著，但高表達于HCC 患者，故其可作為診斷HCC 的TM[21]。與AFP、AFP-L3 相似，GPC-3 診斷HCC 的敏感度也相對偏低[22]。王艷等[23]研究顯示，GPC3 診斷HCC 的靈敏度為69.5%。

本研究結果顯示，HCC 組患者的血清AFP、AFPL3、GPC3 水平均高于良性組、對照組，良性組患者的血清AFP、AFP-L3、GPC3 水平均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；AFP、AFP-L3、GPC3 聯合診斷HCC 的靈敏度、特異度、陰性預測值、陽性預測值、 準確度均高于AFP、AFP-L3、GPC3 單獨及兩兩聯合診斷，提示AFP、AFP-L3、GPC3 是反映HCC 的重要指標，三者聯合診斷HCC 可獲得更好的試驗評估結果。

綜上所述，血清AFP、AFP-L3、GPC3 與HCC 關系密切，檢測其水平有助于HCC 的臨床診斷，且三者聯合檢測可顯著提高HCC 的診斷率，更大程度避免誤診、漏診。