高危型HPV分型宮頸癌初篩檢測及聯合細胞學/病毒載量的二次篩查措施的作用分析

張一倩，陳麗平，林婷婷

廣東省高州市人民醫院 婦科一區，廣東 高州 525200

0 引言

早期有效篩查宮頸癌尤為重要，是改善患者預后轉歸的重要環節。國內外不少研究報道證實，長期高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染是引發宮頸癌及癌前病變的首要原因[3-4]，因此檢測高危型HPV感染已成為臨床上應用較為廣泛的宮頸癌篩查手段。然而，單純高危型HPV初篩檢測的價值有待提升。細胞學/病毒載量檢測亦是目前臨床上用以評估宮頸病變的重要手段，聯合高危型HPV初篩檢測可能發揮較為理想的篩查效能。鑒于此，本文通過研究高危型HPV分型宮頸癌初篩檢測及聯合細胞學/病毒載量的二次篩查措施的作用，以期為臨床診斷提供支持，現作以下報告。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇醫院婦科2019年2月-2022年2月收治的疑似宮頸病變的62例患者。年齡25～69歲，平均（40.01±2.35）歲；受教育年限6～16年，平均（10.83±1.26）年；體質指數19～33kg/m2，平均（23.51±1.79）kg/m2；不良生活習慣：吸煙11例，飲酒17例；婚姻狀況：已婚53例，未婚或其他9例；居住地：城鎮44例，鄉村18例。

納入標準：①所有入組人員均于本地區長期生活；②年齡25～69歲；③有性生活史；④＞3年無子宮頸癌篩查史。排除標準：①既往接受過子宮切除或（和）子宮放療者；②因故無法完成相關檢查者；③缺乏正常交流溝通能力或伴有精神疾病者。入組人員在知情同意書上簽字，獲準于醫院倫理委員會。

1.2 研究方法

1.2.1 高危型HPV分型檢測

受試者自行采集子宮頸陰道脫落細胞樣本，并由醫生采集子宮頸鱗柱交界處樣本。采用實時熒光聚合酶鏈式反應（PCR）技術對所有受試者標本的高危型HPV分型進行檢測。采用廣州安必平自動化檢測設備有限公司生產的HPV分型檢測試劑盒完成檢測，可實現對HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68以及82型15種高危型HPV亞型的檢測。所有醫生采集樣本均開展液基薄層細胞學檢查以及HPV實時熒光定量PCR檢測。每例標本采用4個反應管萬冊檢測，并遵循說明書完成試劑量的配制。與PCR反應管內加入已提取的待測DNA標本5μL，以美國ABI Prism7300PCR以實現。反應條件以及4個通道與其對應熒光基團的設置參照試劑盒說明書完成，并完成PCR擴增。于宮頸癌篩查過程中，若細胞學結果≥未明確診斷意義的不典型鱗狀上皮細胞（ASCUS）或出現15項高危型HPV任一一項陽性，則轉診開展陰道鏡以及子宮頸活檢病理檢查。

1.2.2 宮頸癌篩查方案

以高危型HPV分型宮頸癌初篩檢測為初篩方案，即為方案1，并在此方案基礎之上進行二次篩查，分別為方案2以及方案3。

方案1：差異性高危型HPV亞型組合中任一亞型陽性開展陰道鏡檢查活檢。方案1a：HPV 16/18型陽性，行陰道鏡檢查及活檢；方案1b：HPV 16/18/58型陽性，行陰道鏡檢查及活檢；方案1c：HPV 16/18/58/31/33型陽性，行陰道鏡檢查及活檢；方案1d：HPV 16/18/58/31/33/52型陽性，行陰道鏡檢查及活檢；方案1e：所有15種高危HPV亞型任一亞型陽性，行陰道鏡檢查及活檢。

方案2：于方案1的基礎上聯合細胞學檢查。方案2a：HPV 16/18型陽性，行陰道鏡檢查及活檢，非HPV 16/18型陽性則開展細胞學檢查，細胞學檢查結果≥ASCUS實施陰道檢查及活檢；方案2b：HPV 16/18/58型陽性，行陰道鏡檢查及活檢，非HPV 16/18/58型陽性則開展細胞學檢查，細胞學檢查結果≥ASCUS實施陰道檢查及活檢；方案2c：HPV 16/18/58/31/33型陽性，行陰道鏡檢查及活檢，非HPV16/18/58/31/33型陽性則開展細胞學檢查，細胞學檢查結果≥ASCUS實施陰道檢查及活檢；方案2d：HPV 16/18/58/31/33/52型陽性，行陰道鏡檢查及活檢，非HPV 16/18/58/31/33/52型陽性則開展細胞學檢查，細胞學檢查結果≥ASCUS實施陰道檢查及活檢；方案2e：所有15種高危HPV亞型任一亞型陽性，行陰道鏡檢查及活檢，非所有15種高危HPV亞型任一亞型陽性則開展細胞學檢查，細胞學檢查結果≥ASCUS實施陰道檢查及活檢。

方案3：于方案1的基礎上聯合病毒載量檢測。方案3a：HPV16/18型陽性，行陰道鏡檢查及活檢，非HPV16/18型陽性則開展病毒載量檢測，病毒載量≥1.0E3 copies/mL實施陰道檢查及活檢；方案3b：HPV16/18/58型陽性，行陰道鏡檢查及活檢，非HPV16/18/58型陽性則開展病毒載量檢測，病毒載量≥1.0E3 copies/mL實施陰道檢查及活檢；方案3c；HPV16/18/58/31/33型陽性，行陰道鏡檢查及活檢，非HPV16/18/58/31/33型陽性則開展病毒載量檢測，病毒載量≥1.0E3 copies/mL實施陰道檢查及活檢；方案3d：HPV16/18/58/31/33/52型陽性，行陰道鏡檢查及活檢，非HPV16/18/58/31/33/52型陽性則開展病毒載量檢測，病毒載量≥1.0E3 copies/mL實施陰道檢查及活檢。

1.3 統計學方法

以SPSS 22.0軟件實現對本研究數據的分析，計數資料的表示以[n（%）]實現，進行χ2檢驗。P＜0.05即差異有統計學意義。

2 結果

2.1 高危型HPV分型篩查檢出CINⅡ+以及CINⅢ+的情況分析

方案1d、1e的CINⅡ+、CINⅢ+檢出率均高于方案1a，且方案1d、1e的CINⅡ+檢出率高于方案1b，方案1e的CINⅡ+檢出率高于方案1c（均P＜0.05），見表1。

表1 高危型HPV 分型篩查檢出CIN Ⅱ+以及CIN Ⅲ+的情況分析[n（%）]

2.2 高危型HPV分型初篩聯合細胞學二次篩查檢出CINⅡ+以及CINⅢ+的情況分析

方案2a、2b、2c、2d、2e的CINⅡ+檢出率分別為85.48%、91.94%、91.94%、90.32%、87.10%；CINⅢ+檢出率分別為46.77%、48.39%、60.00%、51.61%、43.55%，不同篩查方案檢出結果對比均不明顯（均P＞0.05），見表2。

表2 高危型HPV 分型初篩聯合細胞學二次篩查檢出CIN Ⅱ+以及CIN Ⅲ+的情況分析[n（%）]

2.3 高危型HPV分型初篩聯合病毒載量二次篩查檢出CINⅡ+以及CINⅢ+的情況分析

方案3a、3b、3c、3d的CINⅡ+檢出率分別為91.94%、93.55%、87.10%、90.32%；CINⅢ+檢出率分別為48.39%、60.00%、51.61%、53.23%，不同篩查方案檢出結果對比均不明顯（均P＞0.05），見表3。

表3 高危型HPV 分型初篩聯合病毒載量二次篩查檢出CIN Ⅱ+以及CIN Ⅲ+的情況分析[n（%）]

3 討論

美國癌癥學會（ACS）于2014年所發布的一項宮頸癌篩查指南中提出[10]，HPV 16/18型可作為醫生取樣本高危型HPV檢測陽性結果二次篩查的重要指標，即對HPV 16/18型陽性女性開展陰道鏡檢查，而非HPV 16/18型陽性女性開展細胞學檢查，并對≥ASCUS受試者開展陰道鏡檢查。本文結果發現，方案1d、1e的CINⅡ+、CINⅢ+檢出率均高于方案1a，且方案1d、1e的CINⅡ+檢出率高于方案1b，方案1e的CINⅡ+檢出率高于方案1c。這提示了方案1中不同亞方案在篩查宮頸病變方面存在明顯差異。這在羅紅學等人[11]的一項研究報道中得以佐證，HPV 52/58型陽性率不低于HPV 16/18型，且高級別宮頸病變風險相對較高；而HPV 31/33型陽性伴或不伴細胞學異常時，高級別宮頸病變風險可能被低估。因此，單獨將HPV 16/18型陽性作為轉診陰道鏡檢查獨立參考指標，而將其他非HPV 16/18型陽性統一分作一組看待可能并非最優方案。由于HPV 58、31、33以及35型分布存在一定的一致性，本文在上述指南推薦方案基礎之上，于二次篩查中納入了HPV 58、31、33以及35型，結果發現，方案2中采用高危型HPV亞型組合聯合細胞學檢查的二次篩查在檢出CINⅡ+、CINⅢ+方面的價值由于相同高危型HPV亞型組合篩查方案，且特異度差別不明顯。這反映了高危型HPV分型宮頸癌初篩檢測及聯合細胞學檢查的二次篩查的價值可能更高，值得臨床推廣普及。另外，方案3a、3b、3c、3d的CINⅡ+檢出率分別為91.94%、93.55%、87.10%、90.32%；CINⅢ+檢出率分別為48.39%、60.00%、51.61%、53.23%。反映了高危型HPV亞型組合聯合病毒載量檢查的二次篩查可能有效提高CINⅡ+、CINⅢ+檢出率。考慮原因，可能是該篩查方式兼備了高危型HPV高致病亞型分型以及病毒載量檢測的雙重能力，從而為臨床篩查提供可靠的依據[12]。

綜上所述，高危型HPV分型宮頸癌初篩檢測及聯合細胞學/病毒載量的二次篩查措施具有較高的臨床作用，可在一定程度上提高對CINⅡ+及CINⅢ+的檢出率。