乳腺癌自動乳腺全容積成像表現與生物學預后因子的關系

張凡，葛先立，孫培

河南醫學高等專科學校附屬醫院超聲科，鄭州 450000

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，其發病率和病死率均較高，多見于40～50歲女性患者。全球每年約140萬人被確診為乳腺癌，其中50萬人死于乳腺癌[1-2]。近年來中國乳腺癌的發病率逐年升高，早期乳腺癌的檢出率僅為30%，絕大多數患者延誤了治療的最佳時機[3]。因此，早期檢查和診斷對積極治療乳腺癌具有關鍵性作用。自動乳腺全容積成像（automated breast volume scanner，ABVS）是一種專門針對乳腺檢查而設計的三維超聲成像技術，其可以獲得整個乳腺的橫切面數據，并可自動重建成三維圖像，進而顯示出乳腺腫塊與周圍組織的關系，在乳腺癌的篩查、診斷等方面均具有重要意義[4]。分子生物學因素決定了腫瘤的形態及組織病理學特征，進而決定整個圖像的表現。隨著分子生物學的發展，人們逐漸發現雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，PR）、腫瘤抑制蛋白p53、雌激素誘導蛋白pS2及增殖細胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）等可從不同角度反映腫瘤的行為[5]。本研究探討了乳腺癌ABVS表現與生物學預后因子ER、PR、p53、pS2及PCNA表達的關系，以期為臨床診斷提供依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年10月至2018年9月河南醫學高等專科學校附屬醫院收治的乳腺癌患者。納入標準：①經手術病理確診為原發性乳腺癌；②術前均行ABVS檢查；③經免疫組化染色獲得ER、PR、p53、pS2、PCNA表達狀態；④年齡≥18歲。排除標準：臨床資料不完整。依據納入和排除標準，本研究共納入84例患者，年齡32～75歲，平均（52.0±15.0）歲。本研究經醫院倫理委員會審批通過，所有患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 ABVS檢查

采用Siemens Acuson S2000自動乳腺全容積成像系統及14L5BV探頭進行檢查，探頭頻率為5～14 MHz。患者保持仰臥位，完全暴露乳腺，先進行二維超聲掃描，觀察腫瘤的大小和位置，然后再切換至ABVS檢查。選擇相應的模式，調整探頭使之緊密貼于乳腺，鎖定后自動進行掃描。由兩名具有5年工作經驗的醫師采用雙盲法進行圖像分析，若兩名醫師的分析結果不一致，則經協商達成一致。

1.3 ER、PR、 p53、pS 2、PCNA表達情況的檢測

乳腺癌組織標本均經4%甲醛溶液固定，常規二甲苯石蠟包埋切片，切片厚度為4 μm，然后進行常規蘇木精-伊紅（hematoxylin and eosin，HE）染色和免疫組化染色。采用免疫組化染色Envision二步法檢測ER、PR、p53、pS2及PCNA表達情況，切片組織樣本經二甲苯脫蠟至水，在pH值為6.0的檸檬酸液中用高壓鍋熱處理10 min，加入一抗，4℃過夜后滴加二抗，二氨基聯苯胺（diaminobenzidine，DAB）顯色，蘇木精復染。陰性對照以磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered saline，PBS）代替一抗。所有免疫組化相關試劑盒均購自基因科技（上海）股份有限公司。

1.4 免疫組化結果判定標準

ER、PR和p53定位于細胞核，陽性表達呈棕黃色，陽性細胞數≥10%為陽性；pS2定位于細胞質，陽性表達呈棕黃色，陽性細胞數＞20%為陽性；PCNA定位于細胞核，陽性表達呈棕黃色，陽性細胞數＞20%為陽性。

1.5 統計學方法

采用SPSS 19.0軟件對數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；采用Kappa一致性檢驗分析術前ABVS表現與術后病理結果的一致性；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 ABVS表現

本研究納入84例乳腺癌患者，腫塊大小≥2 cm 37例（44.05%），腫塊內有鈣化39例（46.43%），腫塊周圍有毛刺征62例（73.81%），有淋巴結轉移47例（55.95%）。Kappa一致性分析結果顯示，術前ABVS表現與術后病理具有良好一致性（Kappa=0.732）。

2.2 ER、PR、 p53、pS 2及PCNA表達情況

免疫組化結果顯示，84例乳腺癌患者中，57例患者ER陽性，陽性表達率為67.86%（57/84）；51例患者PR陽性，陽性表達率為60.71%（51/84）；51例患者p53陽性，陽性表達率為60.71%（51/84）；55例患者pS2陽性，陽性表達率為65.48%（55/84）；54例患者PCNA陽性，陽性表達率為64.29%（54/84）。

2.3 不同ABVS表現乳腺癌患者ER、PR、 p53、pS 2及PCNA表達情況的比較

不同腫塊大小乳腺癌患者的ER、PR、p53及pS2陽性表達率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；腫塊大小≥2 cm乳腺癌患者的PCNA陽性表達率高于腫塊大小＜2 cm的患者，差異有統計學意義（χ2=5.720，P＜0.05）。不同腫塊內鈣化情況乳腺癌患者的PCNA陽性表達率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；有腫塊內鈣化乳腺癌患者的ER、PR、p53陽性表達率均高于無腫塊內鈣化的患者，pS2陽性表達率低于無腫塊內鈣化的患者，差異均有統計學意義（χ2=15.988、17.436、5.682、6.489，P＜0.05）。有毛刺征乳腺癌患者的ER、PR、p53、pS2及PCNA陽性表達率均高于無毛刺征的患者，差異均有統計學意義（χ2=4.358、39.425、33.303、19.245、10.122，P＜0.05）。不同淋巴結轉移情況乳腺癌患者的ER、PCNA陽性表達率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；有淋巴結轉移乳腺癌患者的PR陽性表達率高于無淋巴結轉移的患者，p53、pS2陽性表達率均低于無淋巴結轉移的患者，差異均有統計學意義（χ2=4.499、14.755、4.870，P＜0.05）。（表1）

表1 不同ABVS表現乳腺癌患者ER、PR、 p53、pS 2及PCNA的表達情況（ n=84）

3 討論

3.1 ER、PR、 p53、pS 2及PCNA與乳腺癌的關系

正常的乳腺細胞中存在ER和PR，雌激素和孕激素通過ER和PR影響乳腺的增生和分化，當細胞發生惡變時，腫瘤細胞會部分或全部保留正常的受體系統，ER會刺激乳腺管生長，PR會刺激乳腺泡生長[6]。研究表明，ER和PR的表達對內分泌治療具有關鍵作用，ER陽性或ER和PR均陽性的患者內分泌治療效果較好，ER陰性患者的化療效果較好[7]。p53是位于17p1的一段外顯子基因，由11個外顯子構成，可直接產生長度為2.5 kb的mRNA，翻譯為53 kD的核磷酸蛋白[8]。p53可分為野生型和突變型，野生型p53主要參與調節細胞周期，誘導細胞凋亡，而突變型p53不僅失去了抑制腫瘤增殖的功能，還會促進腫瘤生長，它是迄今為止發現的與人類惡性腫瘤關系最密切的基因之一，其陽性表達與乳腺癌的復發和預后具有一定的關系[9]。pS2的表達受雌激素調控，其與乳腺癌中ER和PR的表達密切相關，可用于預測內分泌治療效果[10]。PCNA是僅在增殖細胞和腫瘤細胞中合成或表達的一種核內多肽，腫瘤患者體內的PCNA含量較健康人高，其合成和表達均與細胞周期有關，因此其在腫瘤的良惡性判斷及惡性程度的確定等方面均具有廣泛的應用[11]。因此，治療前檢測ER、PR、p53、pS2及PCNA的表達水平十分重要。

3.2 乳腺癌 ABVS 表現與 ER、PR、 p53、pS 2及PCNA表達的關系

3.2.1 腫塊大小評估乳腺腫塊的大小可以被廣泛應用于診斷和評定乳腺癌的主要腫瘤區域，也是診斷和判定其預后及制訂治療方案的主要依據之一[12-13]。本研究結果顯示，腫塊大小≥2 cm 37例，其中ER陽性26例（70.27%），PR陽性24例（64.86%），p53陽性26例（70.27%），pS2陽性28例（75.68%），PCNA陽性29例（78.38%）；不同腫塊大小乳腺癌患者的ER、PR、p53及pS2陽性表達率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；腫塊大小≥2 cm乳腺癌患者的PCNA陽性表達率高于腫塊大小＜2 cm的患者，差異有統計學意義（P＜0.05）。刁巖等[14]研究了PCNA表達與乳腺癌患者腫瘤大小的關系，結果表明，腫瘤大小≤2 cm組患者的PCNA陽性表達率低于腫瘤大小＞2 cm組（P＜0.05），說明腫瘤大小與PCNA表達具有一定關系，與本研究結果一致。靳鳳梅等[15]分析了乳腺癌患者中ER、PR表達與腫塊大小的相關性，結果表明，腫塊大小≥2 cm組患者的ER、PR陽性表達率與腫塊大小＜2 cm組患者相比，差異均無統計學意義（P＞0.05），與本研究結果大致相同。

3.2.2 腫塊內鈣化乳腺中出現鈣化是由于營養不良引起鈣鹽沉積，一般以羥基磷灰石和磷酸鈣兩種形式存在，乳腺中鈣化形態及分布是鑒別乳腺癌惡性程度的重要指標[16]。本研究結果顯示，出現鈣化39例，其中ER陽性35例（89.74%），PR陽性33例（84.62%），p53陽性29例（74.36%），pS2陽性20例（51.28%），PCNA陽性24例（61.54%）；有腫塊內鈣化乳腺癌患者的ER、PR、p53陽性表達率均高于無腫塊內鈣化的患者，pS2陽性表達率低于無腫塊內鈣化的患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。說明腫塊內鈣化與乳腺癌的惡性程度有一定的關系，這對治療方案的選擇及預后預測具有一定的指導意義。

3.2.3 毛刺征腫瘤的生長是多中心的，生長的不平衡性會導致腫瘤邊緣表現為毛刺、分葉或模糊不清，這就是腫瘤的毛刺征[17]。毛刺征對乳腺癌具有很高的預測價值，有毛刺征乳腺癌的侵襲性較低。本研究結果顯示，有毛刺征62例，其中ER陽性46例（74.19%），PR陽性50例（80.65%），p53陽性49例（79.03%），pS2陽性49例（79.03%），PCNA陽性46例（74.19%）；有毛刺征乳腺癌患者的ER、PR、p53、pS2及PCNA陽性表達率均高于無毛刺征的患者，差異均有統計學意義（P＜0.05），與薛林燕等[18]、黃凌萍和丁潔瓊[19]的研究結果一致。腫瘤的毛刺征可以限制腫瘤細胞擴散，因此內分泌治療效果較好，預后也較好。

3.2.4 淋巴結轉移淋巴結轉移是乳腺癌轉移的主要途徑，也是直接影響早期乳腺癌患者預后的一個重要因素。周才明等[20]研究結果表明，淋巴結轉移與ER、PR及p53表達無關（P＞0.05）。本研究結果顯示，淋巴結轉移47例，其中ER陽性28例（59.57%），PR陽性33例（70.21%），p53陽性20例（42.55%），pS2陽性26例（55.32%），PCNA陽性28例（59.57%）；有淋巴結轉移乳腺癌患者的PR陽性表達率高于無淋巴結轉移的患者，p53、pS2陽性表達率均低于無淋巴結轉移的患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。綜上所述，乳腺癌ABVS表現與ER、PR、p53、pS2及PCNA表達具有一定的關系，對治療方案的制訂和預測預后具有一定的參考價值。