溫度對注射用紅花黃色素與6 種溶劑配伍穩(wěn)定性的影響*

陳 虹，楊禮聰，賴 蕓，劉興欣，唐 燕△，韓惟芳，李德勛

（1. 云南省昭通市中醫(yī)醫(yī)院，云南 昭通 657000； 2. 云南省昭通市食品藥品檢驗所，云南 昭通 657000）

注射用紅花黃色素的主要有效成分為羥基紅花黃色素A，有活血、化瘀、通脈的作用，臨床常用于治療冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（簡稱冠心病）穩(wěn)定型勞累性心絞痛［1-2］、急性缺血性中風血瘀證［3］、急性腦梗死［4-5］、心肌缺血缺氧［6-7］、心肌損傷［8］，改善神經(jīng)功能［9］，防治術(shù)后深靜脈血栓［10］。其藥品說明書中規(guī)定的用法用量為每次150 mg 溶于250 mL 氯化鈉注射液（NS）靜脈滴注，未提及是否可選用其他溶劑，臨床實際使用時常選擇其他溶劑。陳小勇等［11］抽取了使用注射用紅花黃色素住院患者病歷784份，發(fā)現(xiàn)配藥溶劑與藥品說明書標識不相符率為17.47%。故有必要考察常用溶劑與注射用紅花黃色素配伍后的穩(wěn)定性。中藥注射劑與溶劑配伍后pH 改變、藥品放置時間過久、放置溫度不適宜等因素會影響成品輸液的穩(wěn)定性［12］。臨床也常遇到藥物調(diào)配完成后患者暫不能輸注時，成品輸液應在何種溫度下貯存及應在多長時間內(nèi)輸注等問題的咨詢。部分藥品說明書中關(guān)于調(diào)配后成品輸液的貯存條件、貯存時限等信息不完整，直接影響藥品質(zhì)量［13］。注射用紅花黃色素的藥品說明書中并未明確標注其調(diào)配后的貯存條件（溫度、時間等），且目前尚未見關(guān)于放置溫度等貯存條件對該成品輸液穩(wěn)定性影響的研究報道。為此，本研究中考察了3種溫度對注射用紅花黃色素與NS、5%葡萄糖注射液（GS）、10%GS、葡萄糖氯化鈉注射液（GNS）、轉(zhuǎn)化糖注射液及果糖注射液配伍8 h內(nèi)穩(wěn)定性的影響，以期為臨床安全用藥提供參考。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

LC-2010型高效液相色譜儀（日本Shimadzu公司）；MS105 DU 型電子天平（瑞士Mettler Toledo 公司）；UC - 7100S 型超聲波清洗機（美瑞泰克科技有限公司）；AP-9925 型真空泵（天津奧特賽恩斯儀器有限公司）；PHS-3B 型pH 計（上海儀電分析儀器有限公司）；GZX - 9246MBE 型數(shù)顯鼓風干燥箱（上海博迅醫(yī)療生物儀器有限公司）；LG4 - 1000M3 型冷藏展示柜（廣州穗凌電器有限公司）；GWF-8JA型微粒分析儀（天津天河醫(yī)療儀器有限公司）；YJ - 1450DA 型醫(yī)用凈化工作臺（蘇州凈化設(shè)備有限公司）。

1.2 試藥

注射用紅花黃色素（山西德元堂藥業(yè)有限公司，批號為813020164，規(guī)格為每支150 mg）；羥基紅花黃色素A對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為111637 -201810，含量93.1%）。5%GS（批號為AD190127C1）、NS（批號為AD190208L2）、10%GS（批號為AD190206B2）、GNS（批號為AD180409A1），均購自昆明南疆制藥有限公司，轉(zhuǎn)化糖注射液（四川美大康藥業(yè)股份有限公司，批號為18091232），果糖注射液（江蘇正大豐海制藥有限公司，批號為1711181），上述6 種溶劑規(guī)格均為每瓶250 mL。乙腈、甲醇均為色譜純，其余試劑均為分析純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 含量測定

2.1.1 色譜條件

色譜柱：Shim-pack VP-ODS柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇- 乙腈- 0.02%磷酸水溶液（20∶4∶76，V/V/V）；流速：1 mL/min；檢測波長：403 nm；柱溫：30 ℃；進樣量：3 μL。

2.1.2 溶液制備

取羥基紅花黃色素A 對照品23 mg，精密稱定，置25 mL 容量瓶中，加甲醇溶解并定容，即得對照品溶液。取樣品15 mg，精密稱定，置25 mL 容量瓶中，加25%甲醇定容，即得供試品溶液。以流動相作為空白對照品溶液。

2.1.3 方法學考察

系統(tǒng)適用性試驗與專屬性試驗：分別取2.1.2項下3種溶液各3 μL，按2.1.1項下色譜條件進樣測定，記錄色譜圖。供試品溶液色譜中，在與對照品溶液色譜相同保留時間處有相應色譜峰，理論板數(shù)按羥基紅花黃色素A 峰計應不低于3 000，分離度大于1.5，基線分離良好，且空白對照無干擾，專屬性良好。詳見圖1。

1. 羥基紅花黃色素AA. 對照品溶液 B. 供試品溶液 C. 空白對照品溶液圖1 高效液相色譜圖1.Hydroxysafflor yellow AA.Reference solution B.Test solution C.Blank reference solutionFig.1 HPLC chromatograms

線性關(guān)系考察：精密量取2.1.2 項下對照品溶液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL，置10 mL 容量瓶中，加25% 甲醇定容，搖勻，得質(zhì)量濃度分別為42.825，85.650，171.300，256.950，342.600，428.250 μg/ mL的系列對照品溶液。按2.1.1項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積，以峰面積（Y）為縱坐標、質(zhì)量濃度（X，μg/mL）為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程Y=10 248X-58 688，r= 0.999 9（n= 6）。結(jié)果表明，羥基紅花黃色素A 質(zhì)量濃度在42.825～428.250 μg/mL 范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗：取2.1.2 項下對照品溶液適量，按2.1.1 項下色譜條件連續(xù)進樣測定6 次。結(jié)果羥基紅花黃色素峰面積的RSD為0.47%（n= 6），表明儀器精密度良好。

重復性試驗：取樣品6 支，按2.1.2 項下方法制備供試品溶液，經(jīng)0.45 μm 微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，按2.1.1 項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積并計算含量。結(jié)果羥基紅花黃色素A 平均含量為0.415 8 g/ g，RSD為1.44%（n=6），表明方法重復性良好。

加樣回收試驗：取樣品15 mg，精密稱定，置50 mL容量瓶中，加入對照品溶液適量，加25%甲醇定容，平行制備6 份。按2.1.1 項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積并計算加樣回收率。結(jié)果見表1。

表1 加樣回收試驗結(jié)果（n=6）Tab.1 Results of the recovery test（n=6）

2.2 成品輸液配伍穩(wěn)定性考察

配伍、分組與環(huán)境：模擬臨床用藥，由同一操作人員在水平層流潔凈臺內(nèi)，取樣品6 支，分別加入250 mL NS、5%GS、10%GS、轉(zhuǎn)化糖注射液、果糖注射液、GNS 調(diào)配成品輸液。每種溶劑對應的成品輸液分為A 組、B 組、C 組（每組4 份），光照下分別置常溫（10～30 ℃）、高溫（35～37 ℃）、低溫（4～8 ℃）條件下操作。

外觀與pH：分別取各組成品輸液適量，于0，1，2，5，8 h時觀察澄明度、顏色及有無異物，并測定pH。結(jié)果6 種成品輸液均澄清、呈亮黃色、無肉眼可見異物。5%GS 為溶劑的成品輸液8 h 內(nèi)在常溫、高溫、低溫條件下pH 的RSD分別為2.25%，3.86%，4.10%，較其他組大，其余成品輸液pH無明顯變化。詳見表2。

表2 成品輸液的pH考察結(jié)果（n=4）Tab.2 Investigation results of pH of finished infusion（n=4）

不溶性微粒：分別取各組成品輸液適量，于0，0.5，1，2，5，8 h 時，按2020年版《中國藥典（四部）》規(guī)定的不溶性微粒檢測法中光阻法測定每1 mL 成品輸液中粒徑≥10 μm 和≥25 μm 的不溶性微粒數(shù)（藥典規(guī)定分別不得超過25粒和3粒）。結(jié)果見表3。可見，3種溫度下，6種成品輸液中，除均在0 h 時的10%GS、轉(zhuǎn)化糖注射液、GNS 外，其余溶液配伍后8 h 內(nèi)的不溶性微粒數(shù)量均在規(guī)定范圍內(nèi)。

表3 成品輸液中不溶性微粒數(shù)考察結(jié)果（個/mL，n=4）Tab.3 Investigation results of insoluble particles number of finished infusion（number/mL，n=4）

羥基紅花黃色素A 含量：取各組成品輸液適量，于0，1，2，5，8 h 按2.2 項下方法制備供試品溶液，按2.1.1 項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積，并以0 h 的含量為100%，分別計算其他時間點的相對含量。結(jié)果見表4。表明3種溫度條件下8 h內(nèi)不同成品輸液中羥基紅花黃色素A含量無明顯變化（RSD<1%）。

表4 成品輸液中羥基紅花黃色素A相對含量測定結(jié)果（%，n=4）Tab.4 Determination results of relative content of hydroxysafflor yellow A in finished infusion（%，n=4）

3 討論

本研究中，注射用紅花黃色素與10%GS、轉(zhuǎn)化糖注射液、GNS 的成品輸液在0 h 時的不溶性微粒數(shù)量超出藥典規(guī)定，但其余時間段內(nèi)均符合。這可能與成品輸液的調(diào)配操作、局部藥物濃度過高等原因有關(guān)，且溫度、時間對不溶性微粒無明顯影響，因此在調(diào)配過程中應注意操作，減少氣泡、泡沫等的產(chǎn)生。另外，以5%GS 為溶劑的成品輸液pH 變化較其他溶劑稍大，但其不溶性微粒數(shù)量在藥典規(guī)定范圍內(nèi)，有效成分含量無明顯變化，故推斷pH變化對成品輸液質(zhì)量無明顯影響。

羥基紅花黃色素A 對光和熱不穩(wěn)定［14］，當溫度超過60 ℃時，加熱一段時間后會水解［15］，而溫度較低時穩(wěn)定性較好［16］。本研究中設(shè)置的3 種溫度下，注射用紅花黃色素與6 種溶劑配伍8 h內(nèi)羥基紅花黃色素A 含量均較穩(wěn)定。由于藥品說明書中未要求避光，且其成品輸液在臨床使用時未采取遮光措施，加之試驗組別多，故未設(shè)置遮光組，這也是本研究的不足之處。臨床實際應用過程中，若患者不能及時輸注，成品輸液放置的溫度及時間等仍是影響輸液質(zhì)量和安全的因素和常見問題。因此，進行此類研究有一定的必要性。

本研究結(jié)果表明，注射用紅花黃色素與6種常用溶劑配伍8 h 內(nèi)穩(wěn)定，這與陳歡等［17］的研究結(jié)果一致。本研究結(jié)果可作一定的參考，但需注意，溶劑選擇也與中藥注射劑藥品不良反應的發(fā)生相關(guān)［18］，放置的溫度不適宜或時間過久等原因也會影響成品輸液質(zhì)量［12］，臨床應用時應盡量遵循藥品說明書。

綜上所述，本研究中探討了放置溫度等貯存條件對紅花黃色素成品輸液質(zhì)量安全的影響，以期督促廠家加強對靜脈輸注藥品調(diào)配后穩(wěn)定性的研究，明確貯存條件、時限等在藥品說明中的標注。