氣相色譜串聯三重四極桿質譜法測定果蔬中四聚乙醛殘留量

駱 燦，龔麗婷，鄭 剛，姚菲菲，陶志成

（1.杭正檢測集團有限公司，浙江 杭州 310000；2.浙江金正檢測有限公司，浙江 金華 322000）

四聚乙醛，又名蝸牛敵，常被用于防治諸如蛞蝓、蝸牛等軟體動物[1-2]。由于四聚乙醛導致的人畜中毒的事情時有發生，為了保障食品安全我國制訂了《食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）。該標準規定了四聚乙醛在不同種類果蔬中的最大殘留限量，其中番茄的最大殘留量為0.5 mg·kg-1，莖用萵苣葉和茼蒿的最大殘留限量為10 mg·kg-1，獼猴桃和火龍果的最大殘留限量為0.1 mg·kg-1[3]。

文獻報道中關于檢測食品中四聚乙醛殘留量的方法主要有氣相色譜法、氣相色譜-質譜法和液相色譜串聯質譜法等[4-5]。鑒于目前QuEChERS前處理方法在食品檢測中的廣泛應用，本文采用基于QuEChERS 凈化結合氣相色譜質譜法（Gas Chromatography Mass Spectrometry，GC-MS/MS）以檢測果蔬中的四聚乙醛殘留量，對樣品提取、凈化和檢測條件進行優化，建立一種簡單快速的適用于檢測果蔬中四聚乙醛殘留量的GC-MS/MS 法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

8890-7000D 三重四極桿氣質聯用儀（美國Agilent 公 司）；19091S-433UI HP-5MS 色譜柱 （30 m×0.25 mm，0.25 μm，美國Agilent 公司）。SFTDL-6A 離心機（上海菲恰爾分析儀器有限公司）；MS 3 basic 振蕩器（IKA 公司）；四聚乙醛標準品（99.4%，BePure）；乙酸乙酯、二氯甲烷、乙腈（色譜純）；氯化鈉（分析純）；QuEChERS 試劑盒（885 mg硫酸鎂+150 mg PSA+15 mg GCB）。

1.2 方法

1.2.1 儀器條件

色譜條件：色譜柱Agilent 19091S-433UI HP-5MS Ultra Inert（30 m×0.25 mm，0.25 μm）； 程序升溫：50 ℃保持2 min，以20 ℃·min-1的升溫速率升至 160 ℃后，再以40 ℃·min-1的升溫速率升至280 ℃保持1 min；進樣口溫度：200 ℃；傳輸線溫度：280 ℃；載氣：氦氣（99.999%），流速1.0 mL·min-1；進樣量：1 μL；進樣方式：不分流進樣。

質譜條件：離子源(Xtr EI)；離子源溫度：280 ℃；電子轟擊源：70 eV；四極桿溫度：150 ℃；碰撞氣流量：1.50 mL·min-1；猝滅流量：2.25 mL·min-1；溶劑延遲：5 min；模式：多反應監測MRM 模式采集。采集條件如下：定量離子對89.0/45.1，碰撞能量15 eV，定性離子對131.0/42.8，碰撞能量15 eV，定性離子對45.0/43.0，碰撞能量15 eV。

1.2.2 樣品前處理

取10 g（精確至0.01 g）均質后的樣品于50 mL離心管中，加入6 g NaCl，加入20 mL 乙腈+乙酸 乙 酯（3+1），渦 旋振蕩2 min，5 000 r·min-1離心5 min。吸取上清液8 mL 加到內含885 mg 硫酸鎂+150 mg PSA+15 mg GCB 的離心管中，渦旋混勻 1 min，4 200 r·min-1離心5 min，取上清液過微孔濾膜（0.22 μm），用于測定。

1.2.3 標準曲線

稱取適量四聚乙醛標準品，先用少量二氯甲烷溶解，再以乙腈+乙酸乙酯（3+1）將其配制成 100 μg·mL-1的單標儲備液，避光冷藏保存，按需使用；以按上述前處理方法處理得到的基質空白溶液將標準品稀釋成0.004 μg·mL-1、0.010 μg·mL-1、 0.050 μg·mL-1、0.100 μg·mL-1、0.200 μg·mL-1和 0.500 μg·mL-1的基質標準工作液，現配現用。

1.2.4 添加回收實驗

對小青菜、西紅柿、韭菜、蘋果、棗和蜜桔進行添加回收實驗，添加濃度為0.01 mg·kg-1、 0.10 mg·kg-1、0.50 mg·kg-1。取樣后添加適量標液混勻靜置0.5 h 后，再對樣品進行處理。

2 結果與分析

2.1 儀器條件的選擇

對于四聚乙醛化合物，經過質譜優化后，確定儀器條件見1.2.1，采用上述儀器條件對四聚乙醛進行樣品中的定性定量測定，四聚乙醛的標準溶液質譜圖見圖1。由譜圖可見，出峰時間為6.216 min，峰形較好。

圖1 四聚乙醛的標準溶液質譜圖

2.2 前處理的選擇與優化

目前，乙腈和乙酸乙酯作為提取溶劑在農藥提取中已經得到了廣泛應用，因此本研究選擇乙酸乙酯和乙腈作為提取溶劑。在考察了乙腈、乙酸乙酯、乙腈+乙酸乙酯（1+1）和乙腈+乙酸乙酯（3+1）4 種溶劑的提取效果后，發現乙腈+乙酸乙酯（3+1）的提取效果最好。故本研究采用了乙腈+乙酸乙酯（3+1）作為提取溶劑。

在比較了不同凈化手段（LC-NH2/Envi-carb 固相萃取柱、弗羅里硅土柱、QuEChERS 試劑盒）的回收率之后，對加標量為0.50 mg·kg-1的樣品進行試驗。結果表明，采用LC-NH2/Envi-carb 固相萃取柱凈化的樣液回收率為83%，采用弗羅里硅土柱凈化的樣液回收率為82%，采用QuEChERS 凈化的樣液回收率為105%，回收率均滿足要求，但考慮到操作的簡單快速，本研究選擇QuEChERS 凈化作為凈化 手段。

2.3 添加回收率

采用陰性樣品添加標液的方法，分別對小青菜、西紅柿、韭菜、蘋果、棗和蜜桔進行添加回收實驗，添加濃度為0.01 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1、0.50 mg·kg-1。按照1.2.2 方法提取，GC-MS/MS 測定，計算添加回收率，結果見表1。

結果表明，四聚乙醛在0.004 ～0.500 μg·mL-1線性關系良好，相關系數大于0.999，加標試驗平均回收率在84%～113%，RSD 在0.91%～7.84%，檢出限為0.002 mg·kg-1（S/N=3）。

3 結論

本文建立了一種樣品前處理簡單快速，方法靈敏度和選擇性高，重復性好，能夠滿足快速檢測果蔬中四聚乙醛殘留量的氣相色譜串聯質譜檢測方法。與文獻方法相比，本法在保證高靈敏度和準確性的同時，盡可能簡化了前處理，提高了工作效率，為快速測定果蔬中四聚乙醛殘留量的研究提供了數據 基礎。