化學發光免疫分析法與酶聯免疫吸附試驗法檢測乙肝病毒感染標志物比較

羅純生，展秀君

（1.佳木斯市中心血站，黑龍江 佳木斯 154002；2.佳木斯市中醫醫院，黑龍江 佳木斯 154002）

乙型肝炎（hepatitis B）是臨床常見的一種傳染性疾病，會發展為肝硬化、肝衰竭、原發性肝癌，嚴重威脅患者的健康安全[1]。乙型肝炎病毒（以下簡稱乙肝病毒）為經血液傳播疾病中比例最高的病原體，乙肝病毒標志物是檢測乙型肝炎的重要指標，臨床檢測方法種類較多，其中酶聯免疫吸附試驗法檢測操作簡單、快速，費用較低，是血站系統各單位普遍使用的檢測手段[2，3]。化學發光免疫分析法是免疫反應和化學發光反應相結合的檢測方法[4]。不同檢測方法檢測乙肝病毒感染標志物結果存在差異[5]。本研究結合2020 年1 月-2021 年5 月在我站血液采集過程中篩查出的70 例乙肝病毒陽性樣本，比較化學發光免疫分析法與酶聯免疫吸附試驗法檢測乙肝病毒感染標志物的價值，為經血傳染病檢測方法的選擇提供一定的參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020 年1 月-2021 年5 月在佳木斯市中心血站血液采集過程中經實時熒光定量PCR 確診篩查出的70 例乙肝病毒陽性樣本為研究對象，采用隨機數字表法分為對照組和觀察組，各35 例。對照組男19 例，女16 例；年齡23～63 歲，平均年齡（44.20±3.11）歲。觀察組男20 例，女15 例；年齡24～65 歲，平均年齡（45.01±2.96）歲。兩組年齡、性別比較，差異無統計學意義（P＞0.05）,研究可行。本研究患者均知情且簽署同意書。

1.2 納入和排除標準 納入標準：①符合乙肝病毒感染臨床診斷標準[6]；②經實時熒光定量PCR 確診[7，8]。排除標準：①合并肝、腎、心腦血管系統等嚴重疾病者；②合并惡性腫瘤者；③合并其他肝臟疾病者；④隨訪資料不完善者。

1.3 方法

1.3.1 對照組 采用酶聯免疫吸附試驗法檢測，取凍存樣本3 ml，室溫復融，以2200 g/min 離心15 min，分離血清[9]，采用哈米爾頓-費米全自動酶標加樣檢測系統（澳斯邦公司）進行檢測，檢測試劑盒為北京萬泰生物藥業股份有限公司生產，所有操作均嚴格按照說明書進行。

1.3.2 觀察組 采用化學發光免疫分析法檢測，采血方法同對照組，采用化學發光儀（天津博奧賽斯生物科技股份有限公司，型號：Axccd400T）與配套試劑盒測定乙肝病毒感染標志物，所有操作均嚴格按照說明書進行[10]。

1.4 觀察指標 比較兩組乙肝病毒感染標志物（HBeAb、HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBcAb）檢測陽性率、兩組乙肝病毒感染標志物的靈敏度、特異度、準確度。

1.4.1 陽性標準[11，12]當HBsAb≥10 mIU/ml、HBsAg≥0.3 IU/ml、HBeAg≥0.5 PEIU/ml、HBcAb≥10 PEIU/ml、HBeAb≥1.5 PEIU/ml 時，可判定乙肝病毒感染性標志物為陽性。

1.4.2 診斷效能[13]靈敏度=真陽性/（真陽性＋假陰性）×100%；特異度=真陰性/（真陰性＋假陽性）×100%。

1.5 統計學方法 采用統計軟件包SPSS 21.0 對本研究的數據進行統計學處理，計量資料采用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料采用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗；P＜0.05 說明差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組乙肝病毒感染指標檢出陽性率比較 觀察組HBeAb、HBsAg、HBeAg 陽性檢出率均高于對照組（P＜0.05），HBsAb、HBcAb 陽性檢出率高于對照組（P＞0.05），見表1。

表1 兩組乙肝病毒感染指標檢出陽性率比較[n（%）]

2.2 兩組乙肝病毒感染診斷效能比較 觀察組乙肝病毒感染靈敏度、特異度、準確度均高于對照組（P＞0.05），見表2。

表2 兩組患者乙肝病毒感染診斷效能比較（%）

2.3 兩組低水平HBsAg 檢測結果比較 當HBsAg 低水平檢測值≤1.00 ng/ml 時，觀察組乙肝病毒感染標志物檢出率高于對照組（P＜0.05），見表3。

表3 兩組低水平HBsAg 檢測結果比較[n（%）]

3 討論

乙肝病毒會長期潛伏于人體內，部分乙肝病毒攜帶者可能由于乙肝病毒被激活而發生乙型肝炎[14]。乙型肝炎具有反復發作、病情遷延不愈的特點，其發生與多種因素相關，并且近年來發病率呈上升趨勢，嚴重影響患者的生活質量[15]。乙型肝炎初期無顯著特點，容易出現漏診、誤診，耽誤病情的發展[16]。因此，早期診斷具有至關重要的作用。臨床常用的乙肝病毒感染檢測方法有化學發光免疫分析法、酶聯免疫吸附試驗法等。但相關研究顯示[17]，酶聯免疫吸附試驗法在血清較低濃度下容易出現假陰性現象，可能會影響臨床檢驗的準確性。例如檢驗過程中抗體與抗體試劑產生差異可出現檢驗誤差，影響檢驗結果[18]。但化學發光免疫分析法與酶聯免疫吸附試驗法檢測乙肝病毒感染志物的準確性和價值方面尚存在爭議[19]。

本研究結果顯示，觀察組HBeAb、HBsAg、HBeAg 陽性檢出率均高于對照組（P＜0.05），HBsAb、HBcAb 陽性檢出率高于對照組（P＞0.05），表明采用化學發光免疫分析法HBeAb、HBsAg、HBeAg 乙肝病毒感染標志物陽性檢出率相對較高，可一定程度降低誤差。因此，化學發光免疫分析法檢測更具一定的優勢。同時，觀察組乙肝病毒感染標志物靈敏度、特異度、準確度均高于對照組（P＞0.05），該結論提示以上兩種方法對乙肝病毒感染標志物診斷具有較高的診斷效能。與張守彩等[20]的研究結果相似。分析認為，化學發光免疫分析法應用免疫反應技術和化學發光測定技術，可以發揮互補優勢的特點，并且對多種逃逸變異株有效識別，有助于避免人為因素對臨床檢驗結果產生的干擾，進一步提高檢測的準確性。此外，當HBsAg 低水平檢測值≤1.00 ng/ml 時，觀察組乙肝病毒感染標志物檢出率高于對照組（P＜0.05），提示采用化學發光免疫分析法檢測可有效避免酶聯免疫吸附試驗法檢測低水平HBsAg 的假陰性情況，進一步確保檢測結果的準確性。

綜上所述，化學發光免疫分析法與酶聯免疫吸附試驗法在檢測乙肝病毒感染標志物中均具有良好的診斷效能；但是相對而言，化學發光免疫分析法對乙肝病毒感染標志物檢出陽性率更高，尤其是對于低水平HBsAg 具有較顯著的應用優勢。有利于提升乙肝病毒感染標志物檢出率，減少經血液傳播的機率，減少漏診、誤診情況，有助于患者及時診治，并進一步防止病情的進展。