延邊貓泛白細(xì)胞減少癥的實(shí)驗(yàn)室診斷與綜合治療

胡春意，馬浩原，高 旭

延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林延吉 133400

貓泛白細(xì)胞減少癥也稱貓瘟熱，從20世紀(jì)30年代開始，歐美地區(qū)的研究學(xué)者發(fā)現(xiàn)了該種傳染病，因?qū)τ诓∝堅(jiān)斐傻募毙浴⒘倚缘陌准?xì)胞數(shù)下降為主要特征而命名為貓泛白細(xì)胞減少癥。該病于1928年在法國(guó)首次被鑒定，1939年正式命名，Bilin等于1957年首次分離出該病毒。貓泛白細(xì)胞減少癥是由貓細(xì)小病毒（FPV）引起的一種急性高度接觸性傳染病[1]，病貓主要表現(xiàn)為機(jī)體內(nèi)白細(xì)胞數(shù)量急劇減少，并在體內(nèi)大量復(fù)制，特別是在有絲分裂活動(dòng)頻繁的細(xì)胞當(dāng)中，如骨髓、淋巴組織和腸道隱窩細(xì)胞，對(duì)貓科動(dòng)物的多器官多系統(tǒng)都造成了巨大傷害[2]，并伴有發(fā)熱、厭食、嘔吐、腹瀉、中性粒細(xì)胞減少和淋巴細(xì)胞減少等癥狀[3]。FPV主要侵害1歲齡以下的貓，尤其是3～6月齡的幼貓最容易感染。發(fā)病率較高，死亡率在25%～100%之間，呈世界流行。FPV的預(yù)防，目前所使用的弱毒疫苗注射、α干擾素、單抗和卵黃抗體等不失是有效的辦法。FPV主要的傳播途徑有糞便、口腔、分泌物等，包括但不限于通過接觸患貓的體液、糞便或其他污染物，或通過易感動(dòng)物及跳蚤等傳播。對(duì)于環(huán)境當(dāng)中所存在的FPV，通常情況下使用稀釋的漂白水來進(jìn)行消毒可以有效抑制。

1 病例情況

2021年9月23日，延邊朝鮮族自治州延吉市派斯特動(dòng)物醫(yī)院接診一病例，患病貓品種為金漸層,名為球球，雌性，6月齡，體重1.5 kg，未接種疫苗。主訴該貓近兩日出現(xiàn)精神萎靡，嘔吐拉稀癥狀，今日發(fā)現(xiàn)糞便中帶血，故立即送醫(yī)。臨床檢查肛溫40.5 ℃。肛門處毛發(fā)色黃、有異味及干涸糞便。

2 診斷方法

2.1 血常規(guī)檢查

靜脈采血，進(jìn)行檢查[4～5]，血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果見表1。結(jié)果顯示白細(xì)胞、粒細(xì)胞、紅細(xì)胞總數(shù)、血小板計(jì)數(shù)等數(shù)值均有所降低，結(jié)果表明患病幼貓可能存在病毒感染，出血、脫水癥狀等情況。

表1 患病幼貓血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果

2.2 生化檢查

靜脈采血，進(jìn)行生化檢查[6]，檢查結(jié)果見表2，結(jié)果顯示：白球比下降，引起原因可能為體內(nèi)存在炎癥，其他結(jié)果未見異常。

表2 患病幼貓生化檢測(cè)結(jié)果

2.3 膠體金檢測(cè)法

因患病幼貓有明顯消化道疾病癥狀，白細(xì)胞下降，有明顯貓瘟癥狀，故取肛拭子，用貓瘟熱病毒檢測(cè)卡（膠體金法）檢測(cè)[7]，檢測(cè)板C杠呈紅色、T杠也呈紅色。綜上結(jié)果表明,該患病幼貓為貓細(xì)小病毒感染。

2.4 PCR診斷

2.4.1 引物合成

參照GenBank中FPV基因序列（M38246）,設(shè)計(jì)FPV VP2基因引物,片段大小為717bp：上游引物為：5′-CATGGCTTTAGATGATATTCATG-3′；下游引物為：5′-GCTGGTCTCATAATAGTAGCTTC-3′。

2.4.2 方法與結(jié)果

取肛拭子，用病毒基因組DNA提取試劑盒提取貓細(xì)小病毒DNA，進(jìn)行PCR擴(kuò)增,FPV VP2基因擴(kuò)增反應(yīng)體系為：DNA 模板 2 μL，dNTP 2 μL，10×Ex Taq Buffer2.5 μL，上游引物 1 μL，下游引物 1 μL,Ex Taq 0.5 μL，dd H2O 16 μL，總計(jì) 25 μL。

PCR程序反應(yīng)體系為：95 ℃ 5 min；94 ℃ 30 s,55 ℃ 2 min,72 ℃ 2 min,30 個(gè)循環(huán)；72 ℃ 5 min。將PCR產(chǎn)物進(jìn)行1%瓊脂糖凝膠電泳[8],Marker為2 000 bp，F(xiàn)PV VP2基因擴(kuò)增結(jié)果為擴(kuò)增出與目的條帶大小相符的片段，大小約為717 bp，故確定檢測(cè)拭子中含貓細(xì)小病毒。

3 臨床治療

3.1 治療方案

3.1.1 抗病毒，抑制體內(nèi)增殖

皮下注射貓瘟單克隆抗體2 mL，每日1次；皮下注射重組貓ω干擾素90萬IU。

3.1.2 抗炎殺菌，防止繼發(fā)感染

皮下注射慶大霉素2萬IU，每日1次；靜脈注射0.9%氯化鈉20 mL加入頭孢曲松鈉75 mg，每日1次。

3.1.3 補(bǔ)充能量、維持電解質(zhì)平衡

靜脈注射第一組：5%葡萄糖20 mL，加入ATP 0.2 mL、CoA 0.2 mL、維生素C 0.2 mL、復(fù)合維生素B 0.2 mL、肌苷0.2 mL，50%高糖1 mL，每日1次；第二組：乳酸林格氏液20 mL，每日一次。

3.1.4 止吐、止瀉、止血

皮下注射止吐寧0.15 mL，每日1次；口服強(qiáng)力止瀉片（堿式碳酸鉍片）0.2 g，每日1次；靜脈注射酚磺乙胺1.2 mL，每日2次。

3.1.5 控制發(fā)熱

皮下注射巴比妥0.2 mL，每日1次。

3.2 治療結(jié)果

本病例治療全程為6 d，按照3.1所述的治療方案，連續(xù)用藥。9月23日，用藥第1天，高溫未退，精神萎靡，嘔吐腹瀉，糞便不成型且?guī)а＿B續(xù)用藥至9月25日治療第3天，患病幼貓精神狀態(tài)稍有好轉(zhuǎn)，糞便中仍帶有血液，采取強(qiáng)制喂食，并未出現(xiàn)嘔吐現(xiàn)象，情況稍有好轉(zhuǎn)。9月26日治療第4天，體溫39.5 ℃，且全天并未出現(xiàn)體溫升高現(xiàn)象，患病幼貓可自主進(jìn)食，故停掉能量補(bǔ)充及控制發(fā)熱藥物，其余按治療方案正常用藥，情況已基本穩(wěn)定，但仍要鞏固治療繼續(xù)觀察。9月27日治療第5天，幼貓可排出成型糞便，自主進(jìn)食且不出現(xiàn)嘔吐、腹瀉情況、精神狀態(tài)良好，體溫38.8 ℃，不再升高，繼續(xù)按照治療方案用藥，進(jìn)行最后一日的鞏固治療。9月28日治療第6天，幼貓并未出現(xiàn)病情反復(fù)的情況，經(jīng)FPV金標(biāo)試紙檢病毒已消失，恢復(fù)健康故辦理出院。

4 案例總結(jié)

貓泛白細(xì)胞減少癥是一種致死率較高的高度傳染性疾病，主要通過糞便-口腔途徑進(jìn)行傳播，包括但不限于通過接觸患貓的體液、糞便或其他污染物，以及通過跳蚤等傳播。FPV在環(huán)境當(dāng)中具有高度的抗性，能夠在60 ℃環(huán)境下生存30 min，且并不完全的喪失病毒的活性。在低溫的條件下，F(xiàn)PV也能發(fā)揮其特定的感染性，并且在受到FPV感染的有機(jī)物當(dāng)中至少能存活1年。FPV對(duì)于醇類、氯仿等有機(jī)溶劑都有一定的抵抗能力，但對(duì)于紫外線等物理措施能將其完全滅活。因此特別是幼貓需要定期疫苗接種，未接種的要避免接觸易感環(huán)境及動(dòng)物；主要表現(xiàn)癥狀嘔吐、拉稀甚至便血，如初有上述癥狀，要立即就醫(yī)；因FPV病毒檢測(cè)卡可能有假陽(yáng)性或假陰性，故本次診斷運(yùn)用了PCR鑒定的方法，鑒定結(jié)果更加高效準(zhǔn)確；本案例的治療方法應(yīng)用了對(duì)癥治療、抗病毒抗炎殺菌的方法，其中單抗和干擾素的應(yīng)用也是治療關(guān)鍵，本方案也是目前常用于貓泛白細(xì)胞減少癥病毒感染的治療方案。