劉馨憶,孫興忠
(1.吉林工程職業(yè)學院,吉林四平 136001;2.吉林省畜牧獸醫(yī)科學研究院,吉林長春 130062)
在肉雞養(yǎng)殖中,部分養(yǎng)殖企業(yè)為了加速肉雞生長,在其日糧中添加過量蛋白質,導致肉雞體內蛋白含量過剩,造成腎臟組織損傷,繼發(fā)相關疾病(范英言,2019)。此外,蛋白過量還會引起血清相關指標異常,抗氧化能力下降,造成氧化應激,嚴重影響肉雞的生長性能。通過本試驗的研究可以為飼喂高蛋白質日糧引起肉雞腎損傷提供相關的參考依據,確保飼料的質量和安全,避免因飼料蛋白過盛所引起的經濟損失,進而促進畜牧業(yè)持續(xù)健康發(fā)展。
1.1 試驗動物 試驗選用1日齡白羽肉雞1200只,要求健康良好,體重相近,公母各半,購自吉林雙利孵化場。
1.2 試驗日糧 試驗基礎日糧按照NRC(1998)配制,其余日糧按照粗蛋白質水平進行調整,其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)水平(風干基礎)
1.3 試驗設計及飼養(yǎng)管理 將1200只白羽肉雞隨機分為4組,分別為試驗I組,即對照組(粗蛋白質含量19%),試驗II組(粗蛋白質含量22%)、試驗III組(粗蛋白質含量25%)和試驗IV組(粗蛋白質含量28%),每組5個重復,每個重復60只雞。試驗前對雞舍進行全面消毒處理,各試驗組肉雞自由采食、飲水,溫度和濕度等條件均保持一致,按照常規(guī)免疫程序進行免疫,試驗期21 d。
1.4 樣本采集及測定 試驗結束前1 d對肉雞禁食,次日清晨每個重復取6只肉雞頸部放血處死,收集血液,迅速解剖,取兩側腎臟,用10%甲醛溶液固定,石蠟包埋切片,HE染色,顯微鏡下觀察病理變化,將血液離心后取血清置于-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
1.5 試驗指標及測定
1.5.1 生長性能 具體指標計算公式如下:
平均日增重(ADG):平均日增重=(試驗后體重-試驗前體重)/試驗天數;
平均日采食量(ADFI):平均日采食量=試驗期間各組的總采食量/試驗天數。
料肉比(F/G):料肉比=消耗飼料總重(kg)/增重總量(kg)。
1.5.2 血清中相關指標的含量和活性測定 按照尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和總抗氧化能力(T-AOC)檢測試劑盒的說明書進行相關指標測定,以上試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。
1.6 統(tǒng)計分析 用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析,采用Duncan法進行多重比較,計算結果用“平均值±標準差”表示。
2.1 不同蛋白質水平日糧對肉雞生長性能的影響 由表2可知,與試驗I組相比,試驗結束后III組和IV組肉雞的末重顯著降低(P<0.05);試驗III組肉雞的ADG比對照組顯著降低(P<0.05),而試驗IV組ADG比對照組極顯著降低(P<0.01);各試驗組與對照組相比,F(xiàn)/G均顯著增加(P<0.05),ADFI無顯著變化(P>0.05)。

表2 日糧蛋白質水平對肉雞生長性能的影響
2.2 不同蛋白質水平日糧對肉雞腎臟組織及血清指標的影響 由表3可知,與試驗I組相比,試驗III組和試驗IV組肉雞血清中Cr濃度顯著升高(P<0.05);試驗IV組肉雞血清中BUN的濃度極顯著高于試驗I組(P<0.01),其他試驗組與對照組之間無顯著差異(P>0.05);各試驗組肉雞血清中UA含量均無顯著差異(P>0.05)。

表3 日糧蛋白質水平對肉雞血清中UA、Cr和BUN含量的影響
由圖1可知,對照組腎臟形態(tài)結構正常;試驗II組腎臟輕度腫脹,可見少量浸潤的炎性細胞及細小散在的尿鹽;試驗III組腎小球結構,形態(tài)紊亂,腎實質有少量間隙,近端小管與遠端小管有少量浸潤的炎性細胞及沉積的尿鹽;試驗IV組腎臟皮質,腎小球結構松散形態(tài)紊亂,腎實質有大量的間隙,間質血管擴張,腎小管及間質內可見大量的棕黑色尿酸鹽結晶沉積,及浸潤的炎性細胞。
2.3 不同蛋白質水平日糧對肉雞血清氧化和抗氧化指標的影響 由表4可知,試驗IV組血清MDA含量相對于其他3組含量極顯著增高(P<0.01);試驗III組和試驗IV組血清SOD活性比試驗I組顯著降低(P<0.05);試驗III組血清GSH-Px活性比試驗I組顯著降低(P<0.05),試驗IV組比試驗I組血清GSH-Px活性極顯著降低(P<0.01);試驗IV組血清T-AOC含量比試驗I組顯著降低(P<0.05)。

圖1A 對照組(×400)

圖1B 22%蛋白含量(×400)

圖1C 25%蛋白含量(×400)

圖1D 28%蛋白含量(×400)

表4 日糧蛋白質水平對肉雞血清中氧化和抗氧化指標含量的影響
3.1 高蛋白質水平日糧對肉雞生長性能的影響 試驗結果表明,隨著日糧蛋白質水平的提高,試驗結束后III組和IV組肉雞的體重和ADG較對照組顯著降低,各試驗組F/G明顯增加。馮焯等(2016)研究發(fā)現(xiàn),隨粗蛋白質水平的升高(17%、18.5%、20%),太行雞末期體重、平均日增重有增加趨勢,平均日采食量和料重比有降低趨勢,這與本研究結果相反,原因可能是其添加的蛋白質水平在雞生理需求之內,故而隨著蛋白質水平的增加,有助其生產性能的提高。
3.2 高蛋白質水平日糧對肉雞腎臟組織形態(tài)的影響 試驗結果表明,飼料中蛋白質含量過多會導致腎小球結構松散、形態(tài)紊亂、炎性細胞增多,可見棕黑色的尿酸鹽沉積。添加高劑量蛋白試驗組肉雞的腎小球萎縮、腎小囊擴張、腎小管上皮細胞壞死,局部出現(xiàn)浸潤炎性細胞,腎臟損傷明顯(駱建兵,2006)。在鵝的研究中發(fā)現(xiàn),日糧中粗蛋白質含量為24%時鵝的腎臟就已出現(xiàn)病變,主要表現(xiàn)為腎小管空泡、腎小球萎縮及炎性浸潤等(李曼曼等,2019)。飼喂過量的蛋白質其代謝產生的氨在不能完全通過鳥氨酸循環(huán)轉變?yōu)槟蛩嘏懦鲶w外時,會在肝臟中合成嘌呤后再轉變?yōu)槟蛩峤浤I臟排出,當尿酸的合成超出腎臟最大排泄量時會導致腎臟功能衰退(Nasoori等,2015)。
3.3 高蛋白質水平日糧對肉雞血液生化指標的影響 試驗結果表明,隨著日糧中粗蛋白質含量的增加,與對照組相比,試驗III組和試驗IV組肉雞血清中Cr濃度顯著升高,試驗IV組肉雞血清中BUN的濃度極顯著增加,表明日糧蛋白質含量過高,增加了腎臟負擔,長此以往造成其損傷。UA含量也有所增加,其原因可能是日糧中蛋白含量過高會引起Ca的異位沉積,使尿酸排泄受阻,從而使血清中尿酸含量升高(朱小甫等,2013)。由此表明,飼喂高蛋白質日糧能造成肉雞腎臟組織損傷及血清腎功能相關指標異常。
3.4 高蛋白質水平日糧對肉雞血液氧化和抗氧化指標的影響 試驗結果表明,隨著日糧中蛋白含量的增加,血清中MDA的活性顯著增加,SOD和GSH-Px的活性顯著降低。谷春梅等(2007)使用高蛋白質日糧飼喂小鼠,研究其對消化系統(tǒng)的影響,結果發(fā)現(xiàn),與對照組相比,高蛋白質日糧顯著提高了消化系統(tǒng)中超氧陰離子和MDA的含量,SOD、GSH-Px的活性及T-AOC顯著下降,結果表明,高蛋白質日糧誘導小鼠消化系統(tǒng)產生氧化應激反應。雖然研究對象和組織不同,但與本研究結果一致。還有相關研究表明,隨著飼喂高蛋白質日糧時間的延長,大鼠血清中T-SOD活性逐漸下降,高蛋白質日糧飼喂大鼠在試驗不同階段引起了腦、肝、腎不同程度的氧化損傷,其中腎臟的氧化應激最為嚴重(秦學燕,2009)。
本研究結果表明,高蛋白質日糧能降低肉雞生產性能,加重腎臟負擔,造成腎臟組織損傷。此外,高蛋白質日糧還能引起血清腎功能相關指標異常,使得氧化與抗氧化系統(tǒng)失衡,從而導致氧化損傷。