卡維地洛聯合托拉塞米對慢性充血性心力衰竭病人CX3CR1、miR-423-5p表達的影響

劉旭光，陳 晨，譚安安，吳 斌，胡家蕓，項 娜

近年來，隨著我國人口老齡化現象的不斷發展，心血管疾病發病率逐年上升，已成為威脅老年群體生命安全的重要原因[1-2]。心血管疾病病人若得不到及時有效的治療，病情發展至終末階段即為慢性充血性心力衰竭，慢性充血性心力衰竭病人主要臨床表現為渾身乏力、呼吸困難，具有神經內分泌激活、心臟功能異常等特征，嚴重威脅病人身體健康甚至生命安全[3-4]。有研究表明，慢性充血性心力衰竭病人預后較差，病死率較高[5-6]。卡維地洛、托拉塞米是常用的治療慢性充血性心力衰竭的藥物，但是關于二者聯合應用的研究較少。本研究旨在觀察卡維地洛聯合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭的效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年10月—2019年12月湖北省中醫院收治的慢性充血性心力衰竭病人150例，按照隨機數字表法分為卡維地洛組與聯合治療組，各75例。卡維地洛組，男40例，女35例；年齡62～73(67.5±4.4)歲；病程1～8(4.5±2.8)年。聯合治療組，男42例，女33例；年齡60～71(65.5±4.3)歲；病程1～9(5.1±3.2)年。兩組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究病人及家屬均知情同意。

納入標準：符合中華醫學會制訂的充血性心力衰竭的診斷標準[7]，經我院檢查確診為慢性充血性心力衰竭，心功能Ⅱ～Ⅳ級。排除標準：①病歷資料不全者；②卡維地洛、托拉塞米過敏或不耐受者；③惡性腫瘤病人；④肝、腎、肺等臟器功能障礙者；⑤溝通障礙者。

1.2 方法 兩組均給予維持水電解質平衡、擴張血管、強心、吸氧等常規治療。卡維地洛組在常規治療基礎上使用卡維地洛(生產廠家：齊魯制藥有限公司，規格：每片10 mg，批號：20210326)治療，每次3.125 mg，每日2次，于早、晚飯后使用溫水進行吞服，連續用藥14 d后將劑量調整為每次6.250 mg、每日2次，并逐漸提升用藥劑量，以85 kg為界，體重≤85 kg病人最高用藥劑量為每次25 mg、每日2次，體重>85 kg病人最高用藥劑量為每次50 mg、每日2次。聯合治療組在卡維地洛組治療基礎上給予托拉塞米(生產廠家：湖北亨迪藥業股份有限公司，規格：每片5 mg，批號：2100104)，初始劑量為每次10 mg、每日1次，于清晨使用溫水吞服，可根據病人病情發展情況對劑量進行調整，最高劑量為200 mg，卡維地洛用法、用量與卡維地洛組保持一致。兩組均連續治療3個月。

1.3 觀察指標

1.3.1 心功能 采用多普勒超聲檢測儀檢測病人心功能指標，病人取左側臥位，M3S探頭頻率設置為2.0～4.0 MHz，進行多平面掃查。觀測指標包括心排血量(CO)、左室后壁厚度(LVPWT)、左室舒張末期內徑(LVEDD)。

1.3.2 散射比濁法檢測肌鈣蛋白I(cTnI)、高敏肌鈣蛋白I(hs-TNI)、N末端B型鈉尿肽前體(NT-proBNP)水平 采集病人空腹靜脈血5 mL，離心處理后-80 ℃環境中保存。根據提取凝固的待測標本在凝固的過程中散射光的變化來確定終點，在光探檢測器為90°的單色光源中向血清樣本加凝血激活劑，在樣品凝塊的過程中，散射光的強度會慢慢增加，當血清樣本完全凝固后，光探測器會發生變化，會送到檢測器上處理并且描出凝固曲線后檢測cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平的變化。

1.3.3 酶聯免疫吸附實驗法檢測谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、氧化氫酶(CAT)、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、內皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)水平 將血清置于室溫后，標記酶標板，制作標準品，然后取出試劑盒，以1∶2的稀釋液稀釋樣品；在反應孔上依次加入稀釋好的待測血清和標準品，每孔100 μL，放置37 ℃恒溫孵育箱中濕育2 h；然后用專用的洗滌液將反應板清洗3次以后，再加入抗體工作液(1∶100倍稀釋后)，每孔100 μL，放置于37 ℃恒溫孵育箱中濕育45 min；繼續清洗反應板4次后，在反應孔內加入TMB溶液，每孔100 μL，置于37 ℃恒溫孵育箱中濕育45 min后在反應孔內加入終止液，每孔100 μL，終止反應；在450 nm波長測定吸光度，顏色反應深淺與GSH-Px、ox-LDL、CAT、AngⅡ、ET-1、NO水平成正比，經繪制標準曲線計算GSH-Px、ox-LDL、CAT、AngⅡ、ET-1、NO水平。

1.3.4 逆轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)檢測CX3趨化因子受體1(CX3CR1)、miR-423-5p表達 提取細胞總RNA，檢測RNA純度、含量，逆轉錄處理后獲得cDNA，使用Primer5.0軟件設計引物，內參U6，采用2-△△Ct方法計算需要檢測的CX3CR1、miR-423-5p表達量。

1.4 療效評價標準 顯效：心功能改善2級，臨床癥狀基本消失；有效：心功能改善1級，臨床癥狀減輕或有所好轉；無效：心功能無改善，臨床癥狀未緩解甚至加重。總有效率=(顯效例數+有效例數)/總例數×100%。

2 結 果

2.1 兩組CO、LVPWT、LVEDD比較 治療前，兩組CO、LVPWT、LVEDD比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；治療后，與卡維地洛組相比，聯合治療組CO水平升高，LVPWT、LVEDD降低，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組CO、LVPWT、LVEDD比較(±s)

2.2 兩組cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平比較 治療前，兩組cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；治療后，與卡維地洛組相比，聯合治療組cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平均降低，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平比較(±s)

2.3 兩組治療前后GSH-Px、ox-LDL、CAT水平比較 治療前，兩組GSH-Px、ox-LDL、CAT水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；治療后，與卡維地洛組相比，聯合治療組血清GSH-Px、CAT水平升高，ox-LDL水平降低，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表3。

表3 兩組治療前后GSH-Px、ox-LDL、CAT水平比較(±s)

2.4 兩組AngⅡ、ET-1、NO水平比較 治療前，兩組AngⅡ、ET-1、NO水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；治療后，與卡維地洛組相比，聯合治療組血清AngⅡ、ET-1水平降低，NO水平升高，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表4。

表4 兩組AngⅡ、ET-1、NO水平比較(±s)

2.5 兩組治療前后CX3CR1、miR-423-5p表達比較 治療前，兩組CX3CR1、miR-423-5p表達比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；治療后，與卡維地洛組相比，聯合治療組CX3CR1、miR-423-5p表達降低，差異均有統計學意義(P<0.05)。詳見表5。

表5 兩組治療前后CX3CR1、miR-423-5p表達比較(±s)

2.6 兩組臨床療效比較 聯合治療組治療總有效率高于卡維地洛組，差異有統計學意義(P<0.05)。詳見表6。

表6 兩組臨床療效比較

3 討 論

慢性充血性心力衰竭是一種由心血管疾病導致的心肌缺血性功能障礙、心室充盈以及射血障礙疾病，具有病情嚴重程度較高、臨床治療難度較大、病死率較高的特點，嚴重威脅病人生命安全[8-10]。卡維地洛能夠靶向阻斷鈣離子通路，具有調血脂、降血壓及較為理想的心臟保護作用[11-12]。托拉塞米是一種高效髓袢利尿劑，也常用于慢性充血性心力衰竭的治療[13]。但是，目前關于卡維地洛聯合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭的臨床研究鮮有報道。

慢性充血性心力衰竭的發生、發展伴隨著機體心功能異常。有研究表明，提升病人心功能是改善慢性充血性心力衰竭病人預后的關鍵[14-15]。CO、LVPWT、LVEDD是常用的心功能指標，檢測CO、LVPWT、LVDED水平，能夠對慢性充血性心力衰竭病人心功能狀況、病情嚴重程度及臨床治療效果進行評價。本研究結果顯示，卡維地洛聯合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭病人，可明顯調控CO、LVPWT、LVEDD水平，說明二者聯合治療能夠通過改善慢性充血性心力衰竭病人心功能而起到改善預后的作用。

慢性充血性心力衰竭癥狀嚴重程度與心肌組織細胞損傷程度具有密切聯系，改善心肌組織細胞損傷程度對慢性充血性心力衰竭癥狀緩解具有重要作用。cTnI、hs-TNI是敏感性的心肌損傷標志物，檢測cTnI、hs-TNI水平能夠對心肌損傷程度進行評價[16-17]。NT-proBNP也常用于評價機體心功能狀況、心力衰竭嚴重程度[18]。本研究結果顯示，卡維地洛聯合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭，可明顯降低病人cTnI、hs-TNI、NT-proBNP水平，說明二者聯合能夠減輕慢性充血性心力衰竭病人心肌損傷嚴重程度，緩解心力衰竭癥狀，從而發揮治療效果。

大量臨床研究表明，心力衰竭癥狀的發生發展與氧化應激反應具有密切聯系，GSH-Px、ox-LDL、CAT是常用的評價抗氧化防御系統狀況的指標，三者水平變化與機體抗氧化防御系統狀況、氧化應激損傷嚴重程度密切相關，能夠反映機體氧化應激損傷狀況。本研究結果顯示，卡維地洛聯合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭病人能調控GSH-Px、ox-LDL、CAT水平，改善慢性充血性心力衰竭病人抗氧化防御系統狀況，減輕氧化應激損傷。

慢性充血性心力衰竭癥狀發生、發展與血管內皮功能障礙有密切聯系[19-20]。武子舉[21]研究表明，改善慢性充血性心力衰竭病人血管內皮功能對病人病情恢復具有重要意義。本研究結果顯示，卡維地洛聯合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭病人能夠調控AngⅡ、ET-1、NO水平，改善血管內皮功能。

有研究表明，CX3CR1、miR-423-5p在慢性充血性心力衰竭中呈現異常表達，參與慢性充血性心力衰竭的發生發展[22-23]。本研究結果顯示，卡維地洛聯合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭病人，可使CX3CR1、miR-423-5p表達下調，說明二者聯合能夠調控CX3CR1、miR-423-5p表達，緩解慢性充血性心力衰竭病人病情。

綜上所述，卡維地洛聯合托拉塞米治療慢性充血性心力衰竭病人，可改善心功能、血管內皮功能，減輕心肌損傷、氧化應激損傷，下調CX3CR1、miR-423-5p表達，治療效果較好，為慢性充血性心力衰竭的治療提供了一定的參考價值。