GC-MS分析成都產澤瀉揮發油化學成分

王雅琴，吳偉銘，丘志龍，朱文雅，張毅彬，張偉云*

(1.廈門醫學院 藥學系/廈門市中藥生物工程重點實驗室，福建 廈門 361023；2.福建中醫藥大學，福建 福州 350122)

澤瀉為澤瀉科植物東方澤瀉Alismaorientale(Sam.) Juzep.或澤瀉Alismaplantago-aquaticaLinn.的干燥塊莖。澤瀉因其特殊的利水滲濕、泄熱、化濁降脂等療效[1]，常被醫者廣泛使用。澤瀉主要有促進尿液排泄[2]、降血糖血脂[3，4]、抑制腎結石的形成[5]等功效。澤瀉中所含的化學成分，除了三萜、二萜以及倍半萜以外，還有含氮化合物、苯丙素、糖類、甾體、黃酮、酚酸、脂肪烴及其衍生物等[1]。

澤瀉揮發油中，倍半萜類化合物占據了很大部分，這類化合物不僅僅出現于揮發油中的高沸點部分，還多具有芳香氣味。研究發現，目前已從澤瀉中分離出了52個倍半萜[6]，主要分為三類：桉葉烷型、吉瑪烷型和愈創木烷型(占據多數)[7-8]。另外還包括少量刺參烷型、蒼耳烷型和其他類型的倍半萜[9]。因此，本實驗利用水蒸氣蒸餾法提取成都產澤瀉揮發油，運用氣質聯用儀進行成分分析，并與不同產地澤瀉的揮發油化學成分進行比較，研究不同產地澤瀉的開發利用可能性，為不同產地澤瀉的臨床治療及相關物質基礎研究提供參考。

1 材料及方法1.1 材料與儀器

氣質聯用儀(型號：7890B/7000，美國安捷倫科技有限公司生產)。澤瀉產于四川成都[購自北京本草方源(亳州)藥業科技有限公司，生產許可證號為皖20160125，藥材批號為190801，執行標準為2015版《中華人民共和國藥典》]，經廈門大學藥學院陳全成副教授鑒定為澤瀉Alismaplantago-aquaticaLinn.的干燥塊莖。蒸餾水、正己烷與甲醇均為色譜級。

1.2 水蒸氣蒸餾法

采用粉碎機將成都產澤瀉粉碎，過10目篩，分別兩次稱取100.00 g成都產澤瀉(已粉碎過篩)放置于兩個2 000 mL圓底燒瓶中，分別加入800 mL蒸餾水，將圓底燒瓶放于電熱套上，連接揮發油提取器，從測定管上端加水至“0”的刻度線，連續提取6 h。用吸管將揮發油移至1.5 mL試管中，因為該試管中含有少量蒸餾水，故需要加入少量無水硫酸鈉進行脫水。吸取少量深綠色的揮發油置于未使用且干凈的EP管中，加入適量正己烷與甲醇溶解深綠色的澤瀉揮發油，用微孔濾膜(0.45 μm)過濾至2 mL的樣品瓶，作為成都產澤瀉揮發油GC-MS分析用的樣品。

1.3 氣相色譜-質譜法

實驗條件詳見表1。

表1 氣相色譜-質譜法解析化合物條件

2 實驗結果

2.1 水蒸氣蒸餾法提取所得的化合物

采用水蒸氣蒸餾法且參照實驗設定的條件提取成都產澤瀉揮發油進行GC-MS解析，水蒸氣蒸餾法提取成都產澤瀉揮發油的GC-MS總離子流見圖1。

圖1 水蒸氣蒸餾法提取成都產澤瀉揮發油的GC-MS總離子流

在NIST MS譜庫進行檢索，采用Agilent MassHunter Qualitative Analysis B.06.00 分析軟件對譜圖進行分析，發現共有85個色譜峰，有66個化合物，具體化合物見表2。

表2 水蒸氣蒸餾法提取成都產澤瀉揮發油的化學成分

續表2

其中水蒸氣蒸餾法提取成都產澤瀉的揮發油，經過AgtQual分析軟件中的面積歸一化法計算得出，有10個化合物相對含量較大，將這些化合物相對含量從大到小進行排列，詳見表3。

表3 成都產澤瀉采用水蒸氣蒸餾法所得揮發油中相對含量大的化合物

2.2 成都產澤瀉與其他產地澤瀉揮發油相同的化合物

實驗提取成都產澤瀉所得的化合物與其他產地澤瀉的化合物有少部分相同，具體詳見表4、表5。

3 討論

經過對參考文獻[10-13]的解讀與分析，發現不同產地澤瀉揮發油有部分化合物相同，主要選取福建省、四川省以及江西省所產澤瀉的揮發油進行成分研究解析，將這幾個產地澤瀉揮發油進行比對，發現共有21個化合物重復出現(出現在以上四個產地≥2次)，具體為δ-欖香烯、β-欖香烯、α-欖香烯、1，7，7 三甲基-2-乙烯基雙環[2.2.1]庚-2-烯、異長葉烯、斯巴醇、γ-古蕓烯、2-戊基呋喃、3，5 辛二烯-2-酮、蛇麻烯、γ-木羅烯、2-蒈烯、氧化石竹烯、香樹烯、雅檻藍烯、紫羅烯、十六烷酸乙酯、棕櫚酸、3，5-辛二烯-2-酮、巴倫西亞烯、(+)-喇叭烯。

實驗研究對象為成都產澤瀉，經過水蒸氣蒸餾法提取的揮發油與上文提及的4個產地澤瀉揮發油相同的化合物占據提取分析出總化合物中的很小部分，詳見表5，可以初步說明，成都產澤瀉與其他產地澤瀉中揮發油成分有明顯不同。

表4 成都產澤瀉與其他產地(不同提取方法)澤瀉揮發油相同的化合物數量

表5 成都產澤瀉與其他產地(不同提取方法)澤瀉揮發油具體相同化合物

雖然未對澤瀉的揮發油進行定量測定，但在水蒸氣蒸餾法提取成都產澤瀉揮發油過程中發現，澤瀉藥材本身含油量較少，最先提取出的揮發油呈淡黃色的透明油狀，經過一段時間的提取，揮發油逐漸變為深綠色。經過后期的討論，猜測澤瀉揮發油可能是氧化的緣故，才轉變了顏色。這也為今后研究澤瀉揮發油的藥理作用提供了參考。

通過提取成都產澤瀉揮發油成分來進一步完善不同產地澤瀉揮發油的化合物研究。同時，經過將不同產地澤瀉進行比較，說明澤瀉具有一定的地域特點，選取質量優良的澤瀉，發現新的化合物和新的療效，為后續研究澤瀉揮發油活性以及開發利用澤瀉提供思路。