不同獻血間隔期對單采粒細胞獻血者外周血細胞水平變化的研究

王慧 范恩勇 孫海英 黃文杰 許守廣

[摘要] 目的 了解不同獻血間隔期對單采粒細胞獻血者外周血細胞水平變化的影響。方法? 所有樣本均來自江蘇省揚州市中心血站2012年3月至2017年12月單采粒細胞獻血者，年齡18～55周歲，平均41.5歲，按照獻血間隔期的不同，分為4周、3個月、6個月三組，分別在獻血者獻血前及獻血間隔期滿后檢測獻血者外周血細胞水平。利用全自動血細胞分析儀進行血細胞計數(shù)，主要測定項目包括WBC、RBC、Hb、Hct、PLT、RET等指標。結(jié)果? 同一獻血間隔期、同性別獻血前、后比較，WBC、RBC、Hb、Hct、PLT等指標獻血前、后差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。間隔期4周女性獻血者RET指標較獻血前明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論? 對單采粒細胞獻血者獻血間隔期的確定，建議男性不少于4周、女性不少于3個月。制訂科學、合理的單采粒細胞獻血間隔期，既能保證單采粒細胞產(chǎn)品的質(zhì)量，又能最大限度地保護獻血者的身體健康受到傷害。

[關(guān)鍵詞] 無償獻血者;單采粒細胞;外周血細胞;獻血間隔期

[中圖分類號] R457.1? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2022）12-0020-03

[Abstract] Objective To understand the effect of different blood donation intervals on the changes of peripheral blood cell levels in apheresis granulocyte donors. Methods All samples were collected from apheresis granulocyte donors from March 2012 to December 2017 in Yangzhou Central Blood Station in Zhejiang Province， aged 18 to 55 years， with an average age of 41.5 years. They were divided into three groups according to different blood donation intervals： 4-week group， 3-month group， and 6-month group. The peripheral blood cell levels of blood donors were measured before the blood donation and after the expiration of the blood donation interval. Blood cell count was performed using an automatic hematology analyzer， and the main measurement items included WBC， RBC， Hb， Hct， PLT， and RET. Results There was no significant difference in WBC， RBC， Hb， Hct， PLT and other indicators before and after blood donation between the same blood donation interval and the same gender （P>0.05）. The RET parameters of female blood donors at 4-week intervals were significantly increased compared with those before blood donation， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion For the determination of blood donation interval of apheresis granulocyte donors， it is recommended to be not less than four weeks for males and not less than three months for females. Establishing a scientific and reasonable interval for apheresis granulocyte blood donation can ensure the quality of apheresis granulocyte products and maximize the protection of the health of blood donors from harm.

[Key words] Voluntary blood donors; Apheresis granulocytes; Peripheral blood cells; Blood donation interval

粒細胞輸注（GTX）曾被作為一種輔助的治療手段一度應(yīng)用于臨床，取得一定療效，治療原理主要是其含有的大量粒細胞[約（1.5～3.0）×1010個/袋）]，可增強患者的抗感染能力;盡管大量的臨床研究顯示其有助于清除感染、延長患者的生存時間、提高危重患者的生存率，但在臨床應(yīng)用中也暴露出一些問題，如粒細胞抗原性強，輸注容易產(chǎn)生同種免疫反應(yīng);產(chǎn)品中常混有大量有免疫活性的淋巴細胞，免疫功能低下的患者輸注后可能導致輸血相關(guān)移植物抗宿主病（TA-GVHD）。臨床醫(yī)療機構(gòu)隨后便逐步放棄對中性粒細胞過低的患者采用預防性粒細胞輸注，治療性粒細胞輸注呈日益減少的趨勢[1-2]。但近年來，隨著細胞免疫研究的不斷推進和發(fā)展，人們對中性粒細胞（neutrophil）的免疫功能又有了全新的認識，越來越多的研究顯示，粒細胞在腫瘤微環(huán)境中的促腫瘤、抗腫瘤及在腫瘤免疫治療中均發(fā)揮著重要作用[3-4]，單采粒細胞（apheresis granulocytes）產(chǎn)品又開始被臨床醫(yī)療機構(gòu)重視起來，并逐漸重新應(yīng)用于臨床。現(xiàn)行的《全血及成分血質(zhì)量要求》（GB 18469-2012）[5]和《血液儲存要求》（WS 399-2012）[6]等國家相關(guān)標準對單采粒細胞的質(zhì)量及儲存要求都做出明確規(guī)定，但現(xiàn)行的《獻血者健康檢查要求》（GB 18467-2011）[7]和《血站技術(shù)操作規(guī)程》（2019版）[8]對單采粒細胞采集間隔及捐獻周期均未有明確規(guī)定和統(tǒng)一要求。本研究旨在探討不同獻血間隔期對單采粒細胞獻血者血細胞指標變化的影響，摸索更為科學、合理的單采粒細胞采集間隔及捐獻周期，既保證單采粒細胞產(chǎn)品的質(zhì)量，更要保護粒細胞獻血者的身體健康，從而促進無償獻血事業(yè)持續(xù)、健康、穩(wěn)定發(fā)展。

揚州市中心血站自2012年3月開展單采粒細胞采集，采集間隔期參考美國血庫協(xié)會（American Association of Blood Banks，AABB）[9]對單采粒細胞的采集標準，并結(jié)合國內(nèi)目前單采血小板的采集標準，取得較好的效果，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源

所有標本均來自江蘇省揚州市中心血站2012年3月至2017年12月單采粒細胞獻血者，年齡18～55周歲，平均38.54歲。獻血者均符合《獻血者健康檢查要求》，單采粒細胞捐獻者還應(yīng)同時滿足血細胞比容（Hct）≥0.36，采前白細胞計數(shù)（WBC）在3.5×109/L～9.5×109/L范圍內(nèi)。所有獻血者在捐獻前均在《公民無償獻血登記表》中“獻血者知情同意書”一欄中簽署知情同意書。

1.2 方法

按照獻血間隔期的不同，分為4周、3個月、6個月三組，分別在獻血者獻血前及獻血間隔期滿后檢測獻血者外周血細胞水平。檢測方法：留取EDTA-2K抗凝血樣各2 ml，利用全自動血細胞分析儀進行血細胞計數(shù)，主要測定項目包括白細胞計數(shù)（WBC）、紅細胞計數(shù)（RBC）、血紅蛋白濃度（Hb）、血細胞比容（Hct）、血小板計數(shù)（PLT）、網(wǎng)織紅細胞（reticulocyte，RET）等。

1.3 質(zhì)量抽檢

按照《全血及成分血質(zhì)量要求》對所采集的單采粒細胞產(chǎn)品進行外觀、容量、中性粒細胞含量、血細胞比容、無菌試驗等指標檢測，由揚州市中心血站質(zhì)量技術(shù)科檢測。

1.4 主要儀器

MEK-7222K全自動血細胞分析儀（日本光電公司生產(chǎn)），CS-3000plus血細胞分離機（美國百特公司生產(chǎn)），CK40倒置顯微鏡（日本OLYMPUS公司生產(chǎn)），BD9050全自動細菌培養(yǎng)系統(tǒng)（美國BD公司生產(chǎn)）。

1.5 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學分析，計量資料采用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 檢測結(jié)果

不同獻血間隔期單采粒細胞獻血者獻血前及滿間隔期后外周血細胞計數(shù)結(jié)果統(tǒng)計。見表1。

2.2 產(chǎn)品質(zhì)量抽檢

不同獻血周期單采粒細胞產(chǎn)品質(zhì)量抽檢情況。見表2。

3 討論

中性粒細胞是在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞質(zhì)呈無色或極淺的淡紅色，有許多彌散分布的細小的（0.2～0.4 μm）淺紅或淺紫色的特有顆粒，正常成人 PMN 數(shù)量為 （4～10）×109/L;來源于骨髓，具有分葉形或桿狀的核，胞漿內(nèi)含有大量既不嗜堿也不嗜酸的中性細顆粒，這些顆粒多是溶酶體，內(nèi)含髓過氧化酶、溶菌酶、堿性磷酸酶和酸性水解酶等豐富的酶類，與細胞的吞噬和消化功能有關(guān)。中性粒細胞具有的趨化、吞噬和殺菌等功能使其在固有免疫中發(fā)揮十分重要的作用，并處于機體抵御細菌、真菌等病原微生物的第一線[10]。近年來的研究不斷發(fā)現(xiàn)，中性粒細胞可分泌多種細胞因子發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，中性粒細胞的免疫調(diào)節(jié)功能越來越受到國內(nèi)外醫(yī)學界的普遍重視[11]，其在自身免疫疾病發(fā)病機制中具有重要作用。與此同時，中性粒細胞在腫瘤微環(huán)境中也具有雙重作用，其在致癌過程中表現(xiàn)出一系列的促腫瘤和抗腫瘤作用，且與微環(huán)境中細胞因子的種類和數(shù)量密切相關(guān)[12-13]。特別是近幾年的多項研究報道已證實，癌細胞是粒細胞的靶細胞，粒細胞抗癌有望成為人類抗癌的又一重要方法[14-23]，粒細胞成分的應(yīng)用可能會越來越受到臨床醫(yī)療機構(gòu)的重視，單采粒細胞也有望成為采供血機構(gòu)的又一重要血液產(chǎn)品。因此，探索單采粒細胞的采集間隔及捐獻周期也就顯得尤為重要和必要。目前，本站對單采粒細胞獻血者，每次采集1個治療量的粒細胞，容量為200 ml，產(chǎn)品中除含有大量的中性粒細胞外，還含有少量紅細胞（<30 ml）、血小板等成分，或多或少會對獻血者機體免疫水平產(chǎn)生一定的影響，可引起獻血者機體“平衡-失衡-再平衡”的狀態(tài)和過程。

本研究結(jié)果顯示，獻血前女性獻血者與男性獻血者比較，WBC、PLT水平無變化，而RBC、Hb、HCT、RET較男性獻血者則顯著降低，存在性別差異。對同一獻血周期、同性別的獻血者的獻血前、后比較，WBC、RBC、Hb、Hct、PLT等指標的差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。獻血間隔期為4周的女性獻血者，獻血后RET較獻血前明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），究其原因，可能與女性獻血者自身早期的生理性、周期性失血，及自身免疫負反饋調(diào)節(jié)而耐受等有關(guān)，今后還需對女性獻血者繼續(xù)進行跟蹤調(diào)查[24]。對同性別的、但不同獻血周期的獻血者進行比較，4周、3個月、6個月等不同獻血間隔期捐獻單采粒細胞，獻血前、后WBC、RBC、Hb、Hct、PLT等指標的差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。除了獻血間隔期為4周的女性獻血者獻血后RET較獻血前有明顯升高以外，其他獻血間隔期的獻血者均能得到較好的恢復。

本研究結(jié)果同時顯示，不同獻血間隔期所采集的單采粒細胞產(chǎn)品均能符合《全血及成分血質(zhì)量要求》。分析其原因，可能與采供血機構(gòu)對單采粒細胞獻血者進行的獻血前血液篩查有關(guān)，在血細胞分離機參數(shù)設(shè)置準確、采集時間正常的前提下，只要獻血者在獻血前的各項指標都符合采集要求，就能采集到符合國家相關(guān)標準所規(guī)定的單采粒細胞產(chǎn)品。但是，獻血間隔期為4周的女性獻血者，獻血后的RET指標還未完全恢復到獻血前狀態(tài)，說明如果剛滿4周獻血間隔期，就立即再對女性獻血者進行下一次的單采粒細胞成分采集，或多或少會對她們的身體健康造成一定的傷害。另外，單采粒細胞獻血者的獻血間隔期不能只是單純參照單采血小板獻血者的獻血間隔期，因為對單采血小板獻血者而言，捐獻出的僅僅是血小板，其他有效成分均會回輸?shù)将I血者體內(nèi);而對單采粒細胞獻血者而言，除了采集出足夠量的單采粒細胞以外，還會采集出少量的紅細胞、血小板、淋巴細胞等成分，勢必或多或少會對獻血者的身體健康造成一定的影響。因此，有必要考慮延長單采粒細胞獻血者、特別是女性獻血者的獻血間隔期，以進一步觀察和分析其外周血細胞相關(guān)指標的變化[25]。

綜上所述，對單采粒細胞獻血者間隔期的確定，除了參考美國血庫協(xié)會（AABB）標準要求以外，結(jié)合本研究的結(jié)果，提出如下建議：男性獻血間隔期不少于4周、女性獻血間隔期不少于3個月。因此，制訂科學、合理的單采粒細胞獻血間隔期，既能保證單采粒細胞產(chǎn)品的質(zhì)量，又能最大限度地保護獻血者的身體健康受到傷害。

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（收稿日期：2021-04-12）