慢性咳嗽兒童血清百日咳抗體水平的分析

吳丹遐，李嵐，萬(wàn)彩紅，王文杏，邱在軍，陳強(qiáng)

(1.江西省兒童醫(yī)院呼吸科，南昌 330006；2.上饒市人民醫(yī)院兒科，上饒 334000)

百日咳是一種由百日咳鮑特菌感染引起的呼吸道傳染病， 其發(fā)病率和病死率曾因百日咳疫苗的廣泛覆蓋在全球范圍內(nèi)大幅下降，但是近20 余年來(lái)在一些疫苗接種覆蓋率高的國(guó)家陸續(xù)又發(fā)生了百日咳，該病在全球范圍內(nèi)再次備受關(guān)注[1]。 臨床對(duì)百日咳缺乏較深入的認(rèn)識(shí)， 接種過(guò)疫苗的患兒再次感染百日咳的臨床表現(xiàn)常不典型， 一部分只表現(xiàn)為慢性咳嗽[2-3]。 目前國(guó)內(nèi)對(duì)慢性咳嗽兒童百日咳毒素抗體水平調(diào)查的數(shù)據(jù)有限， 而疾控監(jiān)測(cè)到的百日咳感染數(shù)據(jù)往往無(wú)法反應(yīng)真實(shí)的流行情況，本研究擬檢測(cè)血清PT-IgG 抗體，評(píng)估慢性咳嗽兒童百日咳感染狀況， 協(xié)助臨床工作者更全面地認(rèn)識(shí)百日咳。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 本研究納入江西省兒童醫(yī)院呼吸科2019 年10 月至2020 年12 月診治的年齡≤14歲的慢性咳嗽兒童。兒童慢性咳嗽定義[4]：病程> 4周，咳嗽是主要或唯一臨床表現(xiàn)，胸部X 線片無(wú)明顯異常。 所有研究對(duì)象均按照2013 年修訂的中國(guó)兒童慢性咳嗽診斷與治療指南推薦的診斷流程進(jìn)行診斷，收集患兒的一般臨床信息，包括年齡、咳嗽病史、咳嗽患者接觸史和百白破疫苗接種史等；采集患兒血清， 離心分離取上層血清，-80 ℃保存?zhèn)錅y(cè)， 用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清百日咳毒素抗體水平。 本研究獲得江西省兒童醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 檢測(cè)方法與結(jié)果判讀 抽取靜脈血2 mL，離心分離取上層血清，置于-80 ℃冰箱保存?zhèn)錅y(cè)。 本研究采用ELISA 法檢測(cè)血清PT-IgG 抗體，試劑盒購(gòu)自歐蒙公司。

結(jié)果判讀: PT-IgG ≥100 IU/mL 判定為近期接種疫苗或百日咳近期或現(xiàn)癥感染，40＜PT-IgG＜100 IU/mL 判定為近期接種疫苗或可疑百日咳近期或現(xiàn)癥感染，PT-IgG＜40 IU/mL 提示無(wú)百日咳近期或現(xiàn)癥感染，PT-IgG＜5 IU/mL 表示百日咳毒素抗體水平在試劑盒檢測(cè)限以下。 本研究認(rèn)為PTIgG≥100 IU/mL 且1 年內(nèi)未接種疫苗的病例為近期或現(xiàn)癥百日咳感染[5]；40＜PT-IgG＜100 IU/mL 且1 年內(nèi)未接種疫苗，考慮為可疑百日咳近期或現(xiàn)癥感染。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS v.10 統(tǒng)計(jì)軟件，疫苗接種率及血清PT-IgG 水平分布采用百分?jǐn)?shù)表示，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基本情況 230 例慢性咳嗽患兒中， 男性155例，女性75 例，男女比例約為2∶1，年齡1 月～13 歲零1 月，中位年齡1 歲零6 月。 3 月～1 歲患兒中1劑以上百白破疫苗接種率達(dá)68.9% (40/58) ，86.2%(131/152) 的1 歲以上患兒按計(jì)劃免疫程序完成了百白破疫苗接種。 230 例患兒中，83.05%（191/230）的患兒在發(fā)病前一周與家庭內(nèi)咳嗽患者有接觸史。

2.2 百日咳抗體檢測(cè)情況 患兒PT-IgG 水平分布情況見(jiàn)圖1。 230 例慢性咳嗽患兒中，48.7%（112/230） 的患兒PT-IgG 抗體水平位于試劑盒檢測(cè)限以上。 ＜3 月齡和3 月～1 歲患兒的可檢測(cè)率最高，分別為55.0%（11/20）和58.6%(34/58)，1 歲～3 歲患兒可檢測(cè)率為49.2%(29/59)，≥6 歲患兒的可檢測(cè)率比3 歲～6 歲患兒的可檢測(cè)率有所增加（44.8%vs 39.1%，χ2=0.274，P=0.6003）；＜3 月齡患兒中PTIgG≥100 IU/mL 的檢出率最高，為20.0%（4/20），3月～1 歲和1 歲～3 歲患兒中PT-IgG≥100 IU/mL的檢出率分別為10.3%（6/58） 和15.3%(9/59)，≥6歲患兒中PT-IgG≥100 IU/mL 的檢出率較3 歲～6歲患兒有所增加(3.4%vs 1.6%，χ2=0.337，P=0.5614)。

圖1 不同年齡段慢性咳嗽患兒血清中PT-IgG 分布

2.3 百日咳感染情況 表1 展示了不同年齡段慢性咳嗽患兒血清PT-IgG 檢測(cè)水平。 本研究共納入230 例慢性咳嗽患兒，有21 例PT-IgG 檢測(cè)水平≥100 IU/mL， 當(dāng)中有6 例存在近期或現(xiàn)癥百日咳感染，4 例年齡＜3 月， 這部分患兒未接種過(guò)百白破疫苗， 病史資料提示在發(fā)病前一周有與家庭內(nèi)咳嗽患者接觸史；另2 例年齡分別為3 歲～6 歲和≥6歲，均在近1 年內(nèi)無(wú)百白破疫苗接種史，無(wú)明確咳嗽患者接觸史；有6 名3 月～1 歲和9 名1 歲～3 歲的患兒在1 年內(nèi)均接種過(guò)百白破疫苗， 不能判斷其是否為百日咳近期或現(xiàn)癥感染。 此外， 共有23例患兒PT-IgG 水平為40 ～＜100 IU/mL， 其中14例患兒年齡在3 月～3 歲之間， 這部分患兒不能排除受疫苗接種影響； 有9 例患兒存在可疑近期或現(xiàn)癥百日咳感染，其中3 例年齡＜3 月，6 例年齡在3 歲以上。

表1 不同年齡段慢性咳嗽患兒PT-IgG 水平的分布（n）

3 討論

本研究納入的230 例年齡≤14 歲的患兒均按照2013 年修訂的《中國(guó)兒童慢性咳嗽診斷與治療指南》推薦的診斷流程診斷為慢性咳嗽，這些患兒沒(méi)有典型的陣發(fā)性痙攣性咳嗽或雞鳴樣回聲，當(dāng)中有6 例存在近期或現(xiàn)癥百日咳感染(2.6%，6/230)，9 例為可疑近期或現(xiàn)癥感染(3.9% ,9/230)。由于臨床癥狀不典型及對(duì)百日咳感染缺乏較深入的認(rèn)識(shí)，臨床醫(yī)生忽視了百日咳感染引起的慢性咳嗽，導(dǎo)致這些表現(xiàn)為慢性咳嗽的感染者成為百日咳的重要傳染源。

臨床醫(yī)生主要根據(jù)百日咳的診斷標(biāo)準(zhǔn)識(shí)別百日咳， 而目前很多不同國(guó)家和地區(qū)的診斷標(biāo)準(zhǔn)中要求咳嗽持續(xù)時(shí)間≥2 周，并同時(shí)具備1 個(gè)以上典型臨床表現(xiàn)，如陣發(fā)性咳嗽、咳嗽后嘔吐或雞鳴樣回聲等[1]。 本研究中6 例近期或現(xiàn)癥百日咳感染患兒和均不具備典型臨床表現(xiàn)，其中4 名患兒年齡＜3 月，另有2 例年齡分別為3 歲～6 歲和≥6 歲。 有研究提示0～3 月齡人群感染百日咳癥狀和體征往往不典型，反復(fù)咳嗽可能是其主要或唯一的癥狀[6]。實(shí)際上進(jìn)行過(guò)疫苗接種的兒童感染百日咳臨床表現(xiàn)常不典型[1]，本研究中2 例3 歲～6 歲和≥6 歲近期或現(xiàn)癥感染百日咳的患兒均為疫苗接種過(guò)的兒童。 百日咳感染后的臨床表現(xiàn)受到多種因素的影響，包括年齡、疫苗接種情況、百日咳感染史以及其他病原體合并感染情況等[7]。 為了幫助臨床醫(yī)生早期識(shí)別百日咳， 中華兒科學(xué)會(huì)感染學(xué)組結(jié)合國(guó)內(nèi)情況，將患者的年齡、免疫狀態(tài)和潛在合并感染因素考慮在內(nèi)， 同時(shí)參考各國(guó)目前采用的百日咳診斷標(biāo)準(zhǔn)和GPI 建議，于近期發(fā)布了“中國(guó)兒童百日咳診斷及治療建議”[8]。該建議不推薦單次ELISA法檢測(cè)PT-IgG 用于診斷0～3 月齡百日咳感染人群，但本研究結(jié)果顯示＜3 月齡患兒PT-IgG 抗體的可檢測(cè)率和PT-IgG≥100 IU/mL 的檢出率最高。有研究表明，不論是單份血清，還是雙份血清（急性期和恢復(fù)期）， 采用ELISA 檢測(cè)百日咳患者PTIgG 的敏感度均為92.2%[9]。 理論上本研究中＜3 月齡嬰兒百日咳抗體升高的可能主要來(lái)自母體抗體，但有研究表明，疫苗接種后母?jìng)骺贵w消減的半衰期僅6 周，0～3 月齡人群得到母?jìng)骺贵w保護(hù)的時(shí)間窗極短[10-11]。

百日咳是一種傳染性極強(qiáng)呼吸道傳染病，主要依據(jù)臨床病狀、 流行病學(xué)資料和病原學(xué)檢查進(jìn)行診斷。 中國(guó)兒童慢性咳嗽診斷與治療指南將兒童慢性咳嗽按病因分為特異性咳嗽和非特異性咳嗽， 而百日咳桿菌感染可能僅表現(xiàn)為慢性咳嗽[4]。本研究調(diào)查分析了慢性咳嗽兒童血清抗百日咳毒素抗體水平情況， 但是僅限于在一個(gè)單位開(kāi)展了研究工作，結(jié)論不具有普適性，亟待開(kāi)展多中心研究以進(jìn)一步驗(yàn)證本研究的初步結(jié)果。 但是，本次研究提示慢性咳嗽患兒中有百日咳感染患者不易被識(shí)別出， 傳統(tǒng)使用的百日咳診斷標(biāo)準(zhǔn)對(duì)目前臨床實(shí)踐的指導(dǎo)意義非常有限， 臨床工作者應(yīng)不滿足于對(duì)典型百日咳臨床表現(xiàn)的認(rèn)識(shí)， 要重視慢性咳嗽患兒中有少數(shù)百日咳近期或現(xiàn)癥感染患兒未被診斷。