新疆南疆地區部分集約化肉牛繁育場主要臨床病癥和生物安全調查

王 凡，馬雪連，孫亞偉，陳 卓，吾買爾江·牙合甫，陳玉珠，馮夢迪，吳 靜，易鵬飛，楊朝輝，夏利寧，鐘 旗，姚 剛

（1.新疆農業大學動物醫學學院，新疆烏魯木齊 830052；2.新疆畜牧科學院畜牧研究所，新疆烏魯木齊 830000）

畜禽養殖場生物安全是指為防止引起疾病的物質進入畜群或限制疾病在牧場傳播而采取的一系列措施，包括保障外部生物安全（防止病原體進入）和內部生物安全（在畜禽群體內部傳播）的所有措施[1-3]。業已證明，畜禽養殖場生物安全計劃的制定與各項措施的貫徹實施是保障動物健康與福利，提高生產率，減少治療藥物使用，控制疫病發生與傳播的最重要系統工程[4-7]。然而，受環境、養殖技術水平等客觀因素影響，預期所需的勞動力、時間和經費投入較高；受主客觀因素影響，采取的生物安全措施在不同畜群養殖場的實施水平與效果也大不相同[8]。因此，不同類型和不同功能的畜禽養殖場，基于較常流行或影響較大的疾病，制定針對性的，符合基本情況的生物安全計劃，可最大程度地防止疾病發生，降低疾病危害，顯著提高養殖效益，保障養殖健康和可持續發展[9-12]。近幾年新疆南疆地區安格斯肉牛養殖發展迅速，已成為當地農牧民脫貧致富、鄉村振興的重要產業之一。但由于養殖歷史較短，安格斯肉牛養殖技術水平有限，動物疾病問題日益凸顯，嚴重制約了安格斯肉牛養殖業的健康發展。因此，本研究針對新疆南疆地區部分集約化安格斯肉牛繁育場常見疾病發生現狀和主要生物安全問題開展調查，以期為該地區集約化肉牛養殖場制定科學合理的生物安全防控措施提供依據，從而保障養殖業健康發展。

1 調查時間、地點及對象

2021 年對新疆南疆喀什地區4 個集約化安格斯肉牛繁育場開展調查。

2 調查方法及內容

2.1 調查

采用現場調查、問卷調查和牧場疾病診療記錄查閱相結合的方法，對牧場肉牛主要疾病臨床癥狀、防疫軟硬件建設、人流物流管控、獸醫技術力量，以及牧工家庭養殖背景、飼養管理、鼠害蠅害防控、無害化處理等進行調查。

2.2 實驗室檢測

2.2.1 樣品采集 分別于2021 年1、5、7 月，采集4 個牛場1 月齡患病犢牛肛拭子和鼻拭子，參考動物流行病學調查相關規程和方法[13-14]，按每場出現臨床癥狀犢牛5%以上的比例采樣進行實驗室診斷。

2.2.2 實驗室檢測 采用PCR 方法，對采集的296 份肛拭子樣品，檢測4 種腹瀉相關病毒——牛諾如病毒（bovine norovirus，BNoV）、牛病毒性腹瀉病毒（bovine viral diarrhea virus，BVDV）、牛冠狀病毒（bovine coronavirus，BCV）和牛輪狀病毒（bovine rotavirus，BRV）；對采集的170 份鼻拭子樣品，檢測4 種肺炎相關病毒——牛傳染性鼻氣管炎病毒（infectious bovine rhinotracheitis，IBRV）、牛病毒性腹瀉病毒（bovine viral diarrhea virus，BVDV）、牛腺病毒3 型（bovine adenovirus 3，BAV-3）和牛副流感病毒3 型（bovine parainfluenza virus type 3，BPIV-3）。病毒基因組DNA 快速提取試劑盒，購自Omega Bio-Tek 公司；DL 2000 DNA Marker、2×TaqPCR Master Mix 瓊脂糖，均購自天根生物有限公司；反轉錄試劑盒（prime script RT reagent kit），購自大連寶生物工程有限公司；Trizol，購 自Invitrogen；Hifair?III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（gDNA digester plus），購自翌圣生物科技（上海）有限公司。

2.3 數據處理與統計

運用Excel 軟件對數據進行統計分析，對主要疾病臨床癥狀、病原檢測以及牧工家庭養殖背景調查結果進行定量（百分比）統計分析，對其他調查結果進行定性描述。

3 調查結果

3.1 主要疾病臨床癥狀

從4 個牧場的疾病記錄來看，各場的總患病頭數分別為1 533、1 667、1 647 和970 頭，平均患病率分別為66.36%、74.39%、81.69%和30.68%；出現的癥狀主要有腹瀉、肺炎、眼疾、弱犢、營養不良、腹痛，其中前5 種癥狀占總臨床癥狀的95%以上（表1）。在有疾病臨床癥狀的犢牛群中，腹瀉癥狀在各繁育場占比均較高，其次是肺炎，其他癥狀占比均較低。

3.2 主要病原檢測

檢測結果（表2）顯示，BCV、BNoV、BVDV 和BRV 的陽性檢出率分別為19.93%、15.20%、0.03% 和0.01%，IBRV、BAV-3、BVDV和BPIV-3 的陽性檢出率分別為28.24%、14.12%、7.06%和5.88%。結果表明，BCV 和BNoV 是引起犢牛腹瀉的主要病原，IBRV 和BAV-3 是引起犢牛肺炎的主要病原。

3.3 生物安全調查

3.3.1 消毒防疫硬件建設 在消毒防疫硬件建設方面，各牧場均存在基礎設施設備不齊全，未嚴格區分凈道和污道，獸醫診療室配置不完整等問題。其中：4 個牧場的正門均缺少車輛消毒池和高壓水槍，車輛進出時只能進行噴霧消毒；部分場區缺乏消毒間及紫外線更衣室，人員消毒通道深度過淺，長度較短；消毒通道內噴霧裝置運行不暢，冬季寒冷時易結冰；各牧場均未嚴格設定凈道和污道。各牧場消毒設施設備配備情況見表3。各牧場獸醫診療室基礎配置不完整，基本的疾病診療、消毒防疫設施設備匱乏，無法開展免疫效果檢測、藥物敏感性試驗等。缺乏高壓滅菌設備，無法對有害物、手術器械等實施高壓滅菌處理。圖1 為部分缺乏的設施設備。

表3 各牧場消毒設施設備配備情況

3.3.2 人流、物流消毒情況 牧場環境及圈舍的消毒程序不規范，缺乏相應的檢查制度，存在消毒隨意性大、消毒藥物單一和消毒前圈舍清潔不徹底等問題。生產區內有飼養人員串圈舍行為，且進出圈舍未經嚴格消毒。另外，門衛的消毒程序流于形式，外來人員和返場牧工以及外來車輛進入場區時，未嚴格消毒，甚至未消毒就進入場區。

3.3.3 牧工家庭畜禽養殖背景 對牧場169 名牧工的家庭畜禽養殖背景以問卷形式進行調查。結果（表4）顯示：接近半數的牧工家庭中飼養畜禽，其中飼養牛、羊的接近90%，62.67%牧工對存在的動物疫病不了解，54.67%的牧工回家后直接接觸畜禽，還有部分牧工回家和返場后不嚴格消毒，不洗澡更換衣物。

表4 牧工家庭畜禽養殖背景調查結果

3.3.4 獸醫技術人員 牧場獸醫技術人員數量不足，各獸醫人員對應預防和治療的牛只數量較多，人均超過600 頭，且技術人員的獸醫專業知識水平參差不齊。各牧場獸醫人員配備情況見表5。

表5 各牧場獸醫技術人員配備情況

3.3.5 牧工生物安全意識 牧場牧工大多數為當地農民，文化程度較低，專業知識匱乏，對規模化養殖場的操作規范熟練程度較低，消毒防疫意識淡薄，很多牧工家中飼養畜禽或有飼養畜禽的經歷，習慣于自家散養方式，主動嚴格執行消毒程序的意識不高。調查發現，大多數牧工對消毒不重視，消毒程序不規范。場區工作人員進出生產區時，不執行嚴格消毒程序，有些為了方便甚至繞過消毒通道直接進入生產區，部分牧工從生產區返回到生活區時不更換衣服、鞋帽。

3.3.6 飼養與管理情況 （1）規章制度建設。牧場的人員管理、車輛管理、消毒管理、飼養管理、防鼠防蟲管理、用藥管理、檔案管理等各項管理制度普遍不健全，并且存在制度措施落實不到位問題。（2）飼料及衛生清理。部分青貯窖頂層存在約15 cm 厚的青貯飼料霉變現象（圖2-A），飼喂時不清理干凈，就與正常青貯飼料混合飼喂；圈舍清理不及時、不徹底，可見死亡、流產胎兒，胎衣隨意丟棄（圖2-B），圈舍水槽沒有定期清洗、換水。（3）犢牛初乳管理。對安格斯初產母牛初乳產量進行抽樣測定評估（n=20）發現，初產母牛初乳平均產量為731 mL，但個體差異變化范圍較大，為160～4 050 mL（圖3），提示部分安格斯母牛初乳產量不高，導致新生犢牛初乳攝入不足，而牧場又缺乏相應的犢牛初乳補飼管理技術措施。

3.3.7 鼠害蠅害情況 調查發現，牧場存在老鼠、蚊蠅以及鳥類等有害生物入侵現象。在生活區、精料庫和圈舍內均有老鼠出沒的蹤跡，精料庫內可見部分精料袋被老鼠咬破（圖4-A）。夏、秋季節，在生活區、圈舍、獸醫室等場所蚊蠅較多（圖4-B）。牧場缺少防鳥設施設備，鳥類可自由出入牧場，在生活區、生產區和牛舍運動區自由飛行。

3.3.8 糞污清理及無害化處理情況 調查發現，場內工作人員忽視對養殖環境衛生的控制和改善，對圈舍及運動場清理不充分，對糞尿混合物清理不及時，導致圈舍、活動場內的糞便堆積嚴重，衛生環境較差，存在疫病傳播風險。各牧場的無害化處理方式均為直接深埋，處理方式單一；牧場對病死牛尸體處理不規范，病死牛隨意放置（圖5）；掩埋點距離場區較近且處理區域無標識；病死牛無害化處理過程中，操作人員未做好防護措施。

4 討論

4.1 引發腹瀉、肺炎的主要病毒流行情況

BCV、BNoV、BVDV 等是導致犢牛腹瀉的主要病毒，感染程度因國家、區域、牛種類（奶牛或肉牛）以及診斷技術不同而異。Lorenzetti 等[15]調查發現，巴西肉牛BCV 牛群感染率達61.5%；劉蓉菁等[16]研究發現，我國新疆、青海、西藏等地區牛群BCV 感染率普遍較高，平均血清抗體陽性率達80%以上。2003 年以來，相繼被證實BNoV是美洲、非洲和亞洲地區導致犢牛腹瀉的重要病毒[17]。Guo 等[18]2018 年首次報道在我國牛群中檢測出BNoV。BVDV 在世界范圍內均有分布，牛群感染風險較高，自20 世紀90 年代以來，歐洲許多國家的BVDV 陽性率平均在50%以上[19]。王新平等[20]對國內不同地區的牛群糞樣進行BVDV 檢測，發現感染率為16.5%～89.0%，表明我國某些地區BVDV 感染率較高。BVDV 不僅引起犢牛腹瀉，還與牛呼吸道和生殖疾病相關[21]。引發牛呼吸道疾病綜合癥（bovine respiratory disease complex，BRDC）的病毒性病原包括IBRV、BAV-3 和BPIV-3 等[22-23]。BRDC 常導致奶牛產奶量降低，肉牛胴體品質下降，犢牛肺炎發病率和死亡率上升，治療成本增加，給全球養牛業造成巨大經濟損失[24]。本研究所調查的喀什地區4 個牧場為2018年新建的安格斯肉牛繁育場，當年開始從澳大利亞引進安格斯牛，所有引進的肉牛均經過嚴格的海關檢疫和隔離檢疫，為無疫牛群。而本次調查發現，牧場均有腹瀉、肺炎等臨床癥狀的犢牛出現，且引起腹瀉的病毒以BCV 和BNoV 為主，引起肺炎的以IBRV 和BAV-3 為主。無疫牛群引入國內后發生腹瀉和肺炎疾病，可能與國內相關病原流行率較高，牧場基礎設施不完善，消毒防疫不到位，人員、物流管控不嚴等相關。

4.2 防控建議

4.2.1 完善牧場基礎設施 調查發現，部分牧場缺少消毒池，消毒設備不完善，消毒更衣室配置不完整，缺少捕鼠、防鳥裝置等。由于當地條件所限，牧場在建設時許多基礎設施尚未完善，這可能是導致牧場出現各種疾病的重要因素。建議牧場根據自身基礎設施建設情況，完善基礎設施配置。

4.2.2 加強管理和人員培訓，提高生物安全意識調查發現，牧場的牧工多為當地農民，文化程度和專業知識水平較低，主動消毒防疫意識不高，同時牧場管理制度不健全，對牧工缺少培訓。牧工家庭畜禽養殖背景調查發現，近一半牧工家庭飼養牛、羊等家畜，其中一半以上牧工對自家飼養畜禽的健康狀況不了解，且在歸家后直接接觸畜禽，而且還存在部分牧工歸家返場不消毒、不更換衣物等行為。這些行為都可能是牧場疾病引入的原因。建議各牧場加強管理制度建設，定期進行人員培訓，嚴格落實安全防護措施，定期抽檢各牧場生物安全措施關鍵點的落實情況，查漏補缺，保護動物、環境和牧工自身的安全。

4.2.3 加強人流、物流管控與消毒 調查發現，牧場均存在人員、車輛、投入品進出消毒隱患。牧場正門的消毒流于形式，來訪人員及外來車輛未經消毒即可出入牧場，牧工進出生產區不消毒或消毒不嚴格，在生產區內頻繁串圈。這些行為都可能造成病原在牧場內傳播。建議牧場加強牧工及外來人員管控，對人員、進出場車輛及投入品嚴格執行消毒程序。

4.2.4 規范消毒和無害化處理程序 調查發現，各牧場均缺乏規范的消毒程序，人員及車輛物流的消毒存在較大漏洞，這會對病原的引入或病原在牧場間的傳播帶來風險，也是導致犢牛腹瀉和肺炎等的重要因素。建議各牧場根據自身情況，制定適合本牧場的消毒程序和管理制度，確保牧場工作人員認真遵守并執行到位。另外，各牧場存在處理方式單一、掩埋點距離場區較近、處理區域無標識等諸多無害化處理不規范問題，導致病原傳入風險較高。建議各牧場嚴格按照相關規程進行無害化處理。

4.2.5 建立合理的免疫方案 牧場在引入安格斯肉牛時，雖然進行了IBRV 免疫，但本次調查對有肺炎癥狀的犢牛進行病原檢測發現，IBRV 感染率較高，其他病原如BNoV、BCV、BAV-3 也存在較高的感染率。牧場未建立合理的免疫方案，可能是導致疫病發生的潛在原因。因此，各牧場應建立合理規范的免疫程序，加強疫病防控，降低疫病發生風險。

4.3 局限性

生物安全風險因子與動物患病或檢測結果之間存在一定關聯，但本研究未進行此方面的定量統計分析。下一步，需要對每個場的患病與健康動物群體進行單因素或多因素風險分析，找出生物安全的高風險環節和因素，“一場一策”制定對應的生物安全控制措施。同時，結合病原檢測結果，開展科學防治。

5 結論

新疆南疆地區安格斯肉牛繁育場的腹瀉和肺炎發病率較高，主要由BNoV、BCV、IBRV、BAV-3 等病原引發，其原因是牧場在防疫設施設備建設、消毒制度落實、人流物流管控、規章制度建設以及飼養管理、鼠害蠅害防控、無害化處理等生物安全控制方面存在隱患。因此，各牧場應針對病原流行情況和存在的生物安全問題，制定并實施合理的控制方案和確實可行的生物安全措施，控制腹瀉、肺炎等疾病的發生和流行，提高經濟效益。